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抗草甘膦基因GR79Mt表达载体的构建及拟南芥和苜蓿的遗传转化

孙展  郑兴卫  李聪  苗丽宏  
【摘要】:为获得抗草甘膦苜蓿株系,本研究在抗草甘膦基因GR79Mt序列前加叶绿体转运肽基因CTP2序列,并在启动子和终止子两端分别加入PvuⅠ酶切位点,插入到载体pCAMBIA2300中,成功构建植物表达载体pCA-GM。采用CaCl2冻融法将其转入农杆菌中,进一步基于农杆菌介导法进行了目的基因的拟南芥和紫花苜蓿转化。经PCR和RT-PCR验证,目的基因已转入拟南芥中。本研究共得到12株苜蓿抗性苗,经PCR分析鉴定,其中两株转化成功,结果初步表明已将目的片段基因转入苜蓿中。本研究可为抗除草剂苜蓿的应用提供了种质资源和参考方法。

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