收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

烟草花叶病毒运动蛋白的表达及特异性抗体制备

张正坤  吴祖建  沈建国  谢联辉  林奇英  
【摘要】:从烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)感染的发病烟草叶片中提取总RNA,通过RT-PCR扩增得到其运动蛋白基因,将扩增产物克隆到pMD18-T载体上.DNA序列分析表明,所得运动蛋白基因全长为807 bp,与已报道的TMV-U1株系核苷酸和氨基酸同源性均为100%.将目的基因亚克隆到原核表达载体pET-29a上,并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导4 h后蛋白表达量达到最大,超声波显示所得融合蛋白以不可溶形式存在.SDS-PAGA检测蛋白表达情况,表达产物与目的蛋白大小一致,割胶免疫注射家兔得到抗体,ELISA测定效价为25600,Western-blot检测证明在烟草叶片被侵染早期MP得到表达,且抗体特异性良好.

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈玉梅;植物保护用抗菌素的研究与应用——Ⅱ.防治植物细菌病、病毒病、农业害虫及杂草的抗菌素[J];微生物学通报;1980年02期
2 史春霖,王小风;植物病毒的提纯[J];微生物学通报;1980年06期
3 田颖川,覃秉益,王祈楷;放线菌素D对烟草花叶病毒核糖核酸合成的影响[J];科学通报;1981年08期
4 康良仪,周家炽;感染普通烟草花叶病毒或油菜花叶病毒的番茄再生根的离体培养[J];微生物学通报;1981年05期
5 郁操国,蔡同润,王鸣岐,孙玉昆;长叶车前花叶病毒上海分离株外壳蛋白赖氨酸残基的修饰对感染及重组的影响[J];实验生物学报;1981年04期
6 朱培坤,陆妙康,王鸣歧;长叶车前花叶病毒蛋白亚基不同聚集形态对抗原专化性的作用[J];科学通报;1982年24期
7 郁操国,王鸣岐,巫爱珍,孙玉昆;长叶车前花叶病毒(HRVsh)外壳蛋白赖氨酸残基经三硝基苯磺酸修饰后的空间结构变化[J];实验生物学报;1982年01期
8 郑礼 ,黄素珍 ,牛宏舜 ,徐来升 ,陈仲宜 ,蔡同润;芜菁花叶病毒崇明大白菜Y_(12)分离株的生物学鉴定[J];复旦学报(自然科学版);1982年03期
9 本刊编辑部;;Klug获今年诺贝尔化学奖[J];生命的化学;1982年06期
10 王先彬,张秀华;弱株系N_(14)促进番茄早熟[J];微生物学通报;1983年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 成巨龙;;藜科植物中对烟草花叶病毒(TMV)抑制物特性的研究[A];中国烟草学会第三届理事扩大会议文件汇编暨中国科协第三届青年学术年会烟草卫星会议论文集[C];1998年
2 张宝玺;杨桂梅;郭家珍;黄三文;田如燕;;抗病毒病甜(辣)椒的单株选择效果[A];中国科协第3届青年学术年会园艺学卫星会议暨中国园艺学会第2届青年学术讨论会论文集[C];1998年
3 柴立红;陈集双;吴平;施利新;唐爱菊;高毅;徐步进;冯明光;;缓释型茉莉酸(PDJ)对植物RNA病毒负荷量的影响[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
4 安德荣;慕小倩;雷娟利;;几种藜科植物来源的病毒抑制物主要特性研究[A];西部地区第二届植物科学与开发学术讨论会论文摘要集[C];2001年
5 杨立军;喻大昭;杨小军;王少南;张汉亦;;植物源病毒抑制物质研究进展[A];湖北省植物病理学会2002年学术年会论文集[C];2002年
6 晋治波;王锡锋;周广和;;大麦黄矮病毒运动蛋白原核表达产物抗血清的制备及体内检测[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
7 徐磊;陈剑平;;中国小麦花叶病毒RNA2外壳蛋白通读区及19ku富半胱氨酸基因的克隆、表达及编码蛋白定位[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
8 朱洪庆;陈剑平;于善谦;;长叶车前花叶病毒上海分离物基因组全序列测定、侵染性克隆的构建及外源基因的表达[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
9 辛玉成;祝学璋;赵素香;刘元美;王存礼;;抑病毒菌素的分离纯化与应用[A];新世纪(首届)全国绿色环保农药技术论坛暨产品展示会论文集[C];2002年
10 刘文娜;汪矛;;TMV侵染引起番茄系统反应中的结构变化及细胞程序化死亡[A];中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编(1933—2003)[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 温瑞;植物抗病毒基因工程研究 Ⅰ黄瓜花叶病毒复制酶基因表达载体构建和遗传转化 Ⅱ导入病毒基因的转基因植物释放的风险评估[D];浙江大学;2001年
2 邵碧英;烟草花叶病毒弱毒疫苗的研制及其分子生物学[D];福建农林大学;2001年
3 晋治波;大麦黄矮病毒GAV基因组全序列分析及运动蛋白基因介导的抗病毒小麦的研究[D];中国农业科学院;2003年
4 翟梅枝;植物次生物质的抗病活性及构效分析[D];福建农林大学;2003年
5 刘国坤;植物源小分子物质对烟草花叶病毒及四种植物病原真菌的抑制作用[D];福建农林大学;2003年
6 于翠;番茄花叶病毒(ToMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)单克隆抗体制备及ToMV在烟草上致病分子机理研究[D];浙江大学;2004年
7 刘朝辉;黄瓜花叶病毒运动蛋白与微丝作用关系及胞间连丝通透性调节机制的研究[D];中国农业大学;2005年
8 赵明敏;siRNA干扰TMV侵染及其分子机理的研究[D];西北农林科技大学;2005年
9 江陆斌;以烟草花叶病毒为载体在植物中表达外源多肽的研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2003年
10 李巧丽;烟草花叶病毒载体及其在植物中表达外源多肽的研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘太国;非(弱)杀菌化学物质烟草病毒病抗性的诱导及机制研究[D];东北农业大学;2000年
2 吴刚;烟草花叶病毒灭活因子的初步研究[D];福建农林大学;2000年
3 柴立红;二氢茉莉酸丙酯(PDJ)对两种植物RNA病毒的影响[D];浙江大学;2001年
4 吴俊杰;烟草花叶病毒和番茄花叶病毒在烟草上致病性差异的分子机理研究[D];浙江大学;2001年
5 魏军亚;番茄花叶病毒弱毒疫苗(ToMV-K)98.5KDa复制酶与运动蛋白转基因及其与抗病性相互关系[D];西北农林科技大学;2001年
6 张晓鹏;闽江福州段水体病毒的检测[D];福建农林大学;2001年
7 樊小雪;香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA4编码区基因的克隆及原核表达[D];西北农林科技大学;2002年
8 陈宁;灰树花中一种抗病毒蛋白的纯化及其性质[D];福建农林大学;2002年
9 何雅蔷;美洲商陆(phytolacca american)组织培养及抗烟草花叶病利用初探[D];河南农业大学;2003年
10 杨学习;烟草花叶病毒地黄分离物移动蛋白基因的克隆、序列分析及对番茄的遗传转化[D];河南农业大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 王成业;樱桃番茄单干整枝产量高[N];江苏农业科技报;2001年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978