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动物血清中SARS-CoV-2抗体检测方法的建立与评价

邓均华  白露露  白晶晶  孙杰  颜世君  王娟  郝丽影  黄甜  谭菲菲  靳亚平  田克恭  
【摘要】:为针对不同动物开展SARS-CoV-2相关研究工作提供检测手段,针对SARS-CoV-2 S1蛋白建立了一种可检测不同动物血清中的SARS-CoV-2抗体的ELISA方法。通过构建表达SARS-CoV-2 S1蛋白的重组杆状病毒,收获重组杆状病毒培养上清纯化蛋白,建立SARS-CoV-2双抗原夹心ELISA抗体检测方法,并评价该方法的特异性、敏感性及临床适用性。结果显示,获得可表达SARS-CoV-2 S1蛋白的重组杆状病毒,表达纯化获得SARS-CoV-2 S1蛋白,并对该蛋白进行HRP标记,建立了SARS-CoV-2双抗原夹心ELISA抗体检测方法,该方法检测SPF小鼠、兔、猪及动物源性冠状病毒抗体阳性血清均为阴性;检测SARS-CoV-2 S1蛋白免疫兔血清,稀释至1∶320时仍为阳性;检测SARS-CoV-2人工感染雪貂灭活血清,感染前均为阴性,感染后13 d和20 d均为阳性。表明建立的SARS-CoV-2双抗原夹心ELISA抗体检测方法具有良好的特异性、敏感性和临床适用性,可用于多种动物血清中SARS-CoV-2抗体的检测。

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