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O型口蹄疫病毒Real-time PCR检测方法的建立

胡骑  信爱国  李华春  
【摘要】:为建立一种可以快速、准确检测O型口蹄疫病毒的TaqMan荧光定量PCR方法,根据O型口蹄疫病毒VP1基因保守区序列设计特异性引物和TaqMan探针,使用MagMax Express核酸自动提取系统提取O型口蹄疫病毒FMD/O/YM/YN/2000株病毒核酸,建立了检测O型口蹄疫病毒的实时荧光定量PCR方法。该方法标准曲线相关系数达0.999 3,最低检测量达到1.79个拷贝,比传统荧光定量PCR方法灵敏10倍以上,特异性强。该方法可以在2.5h内检测96份临床样品,相对于传统荧光定量PCR方法,效率提高2倍以上。采用MagMax Express核酸自动提取系统配合7500Fast real-time PCR system建立的方法可以实现快速、准确检测O型口蹄疫病毒。

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