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姜黄素通过Wnt/β-catenin信号通路诱导人晶状体上皮细胞的凋亡和细胞周期阻滞

朱梦云  崔双慧  郝泽宇  王文锐  杨清玲  陈昌杰  王剑锋  周琦  
【摘要】:目的探讨姜黄素对人晶状体上皮细胞株SRA01/04(HLEC-SRA01/04)细胞周期和凋亡的影响及其相关分子机制,为姜黄素治疗和预防后发性白内障提供理论依据。方法体外培养HLEC-SRA01/04细胞,加入终浓度分别为0μmol/L(对照组)以及20、40和60μmol/L的姜黄素处理孵育24 h或48 h后,MTT法检测各组细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测HLEC-SRA01/04细胞周期、线粒体膜电位和细胞凋亡率;Western blot法检测姜黄素对HLEC-SRA01/04细胞中caspase-9、caspase-3、Bcl-2、Bax、Cyclin B1、CDK1、β-catenin、c-myc、Cyclin D1蛋白水平表达的影响。结果 MTT显示:随着姜黄素的浓度逐渐增加,HLECSRA01/04细胞较对照组抑制率逐渐增高(P0.001);随着作用时间的延长,各实验组HLEC-SRA01/04细胞增殖抑制率均逐渐增高(P0.001);流式细胞仪结果显示:各组中HLEC-SRA01/04细胞凋亡率和细胞G2/M期比例随姜黄素浓度增加逐渐增高,而线粒体膜电位随着姜黄素浓度增加逐渐下降(P0.001)。Western blot实验显示:随着姜黄素浓度的增加,HLEC-SRA01/04细胞中caspase-3、caspase-9和Bax的表达量逐渐增高,Bcl-2、Cyclin B1、CDK1和β-catenin的表达量逐渐降低,同时Wnt/β-catenin信号通路下游靶蛋白Cyclin D1和c-myc表达量也逐渐降低。结论姜黄素可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路进而抑制HLEC-SRA01/04细胞增殖,并将细胞周期阻滞在G2/M期,从而诱导其凋亡。

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