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小鼠神经干细胞中一氧化氮合酶的表达

林绿标  章翔  吴景文  李侠  费舟  刘先珍  梁景文  
【摘要】:目的 体外分离、培养和鉴定胎小鼠神经干细胞(NSC)并检测其一氧化氮合酶 (NOS)的表达 ,为进一步阐明NOS在NSC中的作用奠定基础 .方法 利用含EGF的条件培养基 ,从胚胎小鼠大脑皮层中分离并体外培养胎小鼠NSC ,在含胎牛血清的培养基中诱导其分化 ;用充纯氮气的方法造成细胞缺氧 ,观察缺氧对NOS的诱导作用 ;免疫组织化学方法检测细胞中nestin ,nNOS ,eNOS和iNOS的表达 .结果 原代培养的细胞具有连续增殖并形成克隆的能力 ,在含血清的培养基中能分化为神经元及神经胶质细胞样细胞 ;免疫组化nestin ,nNOS和eNOS在一般培养条件下呈阳性表达 ,而iNOS呈阴性表达 ,经充氮气缺氧诱导后 ,iNOS呈阳性表达 .结论 成功分离并培养小鼠NSC ;发现不同亚型的NOS在NSC不同培养条件下有不同的表达 .

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