HPLC法测定大鼠肝微粒体中UGT酶的底物

【摘要】：目的建立测定大鼠肝微粒中UGT酶底物的HPLC方法。方法选择对硝基酚、对乙酰氨基酚作为UGT的特异性底物。采用高效液相色谱法,分别以非那西丁、咖啡因作为内标,色谱柱为Welchrom C18,体积流量为1mL/min,柱温为30℃。对硝基酚和对乙酰氨基酚的流动相分别为乙腈-0.01mol/L的醋酸铵缓冲液(pH5.00)=35∶65和乙腈-水=14∶86,对应的检测波长分别为316nm和244nm。结果对硝基酚和对乙酰氨基酚在0.5~100μmol/L范围内,线性关系良好。对硝基酚的日内精密度和日间精密度RSD%﹤14.7%,方法回收率为89.9%~111.0%,提取回收率86.5%。对乙酰氨基酚的日内精密度和日间精密度RSD%﹤13.0%,方法回收率105.6%~114.2%,提取回收率78.3%。结论两组方法灵敏、简便、准确,可用于大鼠肝微粒体中UGT酶活性的测定。