4'-甲基醚金连木黄酮对棕榈酸诱导的大鼠阴茎海绵体内皮细胞功能障碍的影响

【摘要】：目的：探讨双黄酮类药物4'-甲基醚金连木黄酮（4'-O-methylochnaflavone， MF）对棕榈酸诱导的大鼠阴茎海绵体内皮细胞（rat cavernous endothelial cells， RCECs）功能障碍的影响。方法：将RCECs随机分为4组，分别为正常+牛血清白蛋白组（NC组）、棕榈酸（palmitic acid，PA）组、MF治疗组、淫羊藿次苷Ⅱ（icasiside II，ICA Ⅱ）治疗组。采用蛋白印迹实验检测各组细胞的蛋白激酶B(protein kinase B， PKB/AKT)和内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）蛋白表达水平，使用一氧化氮荧光探针检测MF以及ICA Ⅱ对RCECs内一氧化氮含量的影响，使用CCK-8试剂盒检测MF、ICA Ⅱ对PA诱导后的RCECs增殖能力的影响。结果：与NC组相比，MF组、ICA Ⅱ组处理后细胞内一氧化氮含量显著增加（P0.05），MF组的效果优于ICA Ⅱ组（P0.05）。与NC组相比，PA组的eNOS和AKT蛋白表达水平明显降低，提示成功构建了用于模拟高脂环境的体外RCECs内皮功能障碍模型（P0.05）。MF组干预后能够有效提高eNOS、AKT的表达水平，表明MF可促进恢复游离脂肪酸造成的内皮细胞损伤（P0.05）。CCK-8增殖实验显示PA显著降低RCECs的增殖数量（P0.05），而给予MF、ICA Ⅱ治疗后细胞增殖能力得到显著恢复（P0.05）。结论：在RCECs中，MF与ICA Ⅱ能够有效增加细胞内一氧化氮含量，PA处理后AKT/eNOS通路的下调揭示其参与内皮细胞损伤的发生、发展，而MF的干预能够有效逆转上述变化，此外，PA诱导下RCECs的细胞增殖能力明显下降，而MF与ICA Ⅱ干预能够恢复上述变化。双黄酮类药物MF对PA诱导的RCECs细胞功能障碍有一定程度的修复作用。