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体外贮存对人富血小板血浆生物学活性的影响

刘云松  周永胜  朱姗姗  曾百进  许永伟  
【摘要】:目的:探索各种贮存条件对人富血小板血浆(human platelet-rich plasma,hPRP)生物学活性的影响,研究hPRP释放生长因子的浓度作为评价hPRP生物学活性指标的可行性,为最终确定一整套应用hPRP的标准化方法奠定基础。方法:制备健康志愿者的hPRP,记录血小板计数。将每份hPRP释放生长因子分为3组,分别贮存在4℃,-20℃和-70℃,在制备后0,2,4,6,8,10d测定3组标本中转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)和血小板衍生生长因子AB(platelet-derived growth factor AB,PDGF-AB)的浓度。同时,应用不同温度(4℃,-20℃,-70℃)贮存10d的hPRP释放生长因子培养人脂肪基质细胞,以MTT法比较各组标本促进细胞增殖的生物学活性。结果:在体外贮存过程中,hPRP释放生长因子TGF-β1和PDGF-AB的浓度下降很快。低温是保存hPRP释放生长因子相对适宜的环境。当贮存10d后,在-20℃和-70℃贮存的标本其TGF-β1的浓度分别为(238.55±36.00)μg/L和(261.12±55.10)μg/L,PDGF-AB的浓度分别为(46.03±17.67)μg/L和(50.78±18.70)μg/L,显著高于贮存在4℃时两种生长因子的浓度[(113.03±16.29)μg/L和(23.27±8.22)μg/L(P0.01)]。MTT实验结果显示,不同温度贮存hPRP,其生物学活性也有显著差异,且与生长因子浓度差异基本一致。结论:hPRP释放生长因子只能在低温环境中短时间贮存,生长因子定量分析是评价hPRP生物学活性较为可靠的指标。

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