收藏本站
收藏 | 投稿 | 论文排版

羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建、表达及其免疫原性

陈轶霞  才学鹏  景志忠  丁军涛  王颖  蒙学莲  张燕  贾万忠  乔军  闫鸿斌  房永祥  陈国华  骆学农  
【摘要】:通过PCR方法扩增全长P32基因和截去跨膜区的P32基因(MP32),将其分别克隆到真核表达载体pcDNA3·1(+)和已插入CpG序列的pcDNA3·1-CpG中,构建pcDNA3·1-P32、pcDNA3·1-CpG-P32和pcDNA3·1-CpG-MP32质粒;用脂质体法转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光(IFA)试验验证其表达效果;经肌肉免疫注射健康BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测抗体;在免疫后的第3、5周取免疫小鼠的脾细胞,用流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞亚群。结果所构建的真核表达载体在BHK-21细胞中都能表达P32蛋白;免疫小鼠血清在免疫第2周后均能检测到羊痘特异性IgG抗体;免疫组小鼠脾脏CD4+T细胞数目和CD4+/CD8+T细胞比值明显高于对照组。结果提示,所构建的真核载体可诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,并能刺激小鼠产生较强的细胞免疫应答。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 殷俊磊;周碧君;文明;程振涛;樊翠华;杨颖;杜海燕;;山羊痘病毒P32基因重组真核表达载体的构建与鉴定[J];河南农业科学;2010年09期
2 宁章勇;罗敏意;亓文宝;李小康;程艳芬;;pIRES2-EGFP-LR真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达[J];中国兽医科学;2009年09期
3 李雪梅,赵春丽;人肝再生增强因子基因的克隆和真核表达载体的构建[J];河北农业大学学报;2005年05期
4 张永红;王长法;杨少华;王洪梅;高运东;李景鹏;仲跻峰;;鲁西黄牛IFN-α基因克隆及其真核表达质粒的构建[J];动物医学进展;2006年12期
5 陶红梅;罗立廷;朱婷婷;杨广笑;何光源;;中国春小麦puroindoline a基因的克隆及其真核表达载体的构建[J];生物技术通讯;2007年03期
6 康亚男;李潭清;杨润德;韩新影;吕蔚;;猪圆环病毒ORF2基因和细小病毒VP2基因真核表达载体的构建及鉴定[J];黑龙江畜牧兽医;2009年10期
7 王彬;汤德元;李春燕;曾智勇;王凤;甘振磊;周厚品;;长白猪IL-4基因克隆及真核表达载体的构建[J];猪业科学;2010年11期
8 杜沂平;;鸡β-防御素及其真核表达载体构建分析[J];中国畜禽种业;2011年02期
9 韩彩霞;路义鑫;李晓云;朱艳梅;宋铭忻;;旋毛虫ES抗原P49基因的体外表达分析[J];中国人兽共患病学报;2011年03期
10 贺爱兰;彭东海;吴小玲;廖艳阳;;泛素结合酶UFC1基因的荧光表达载体构建[J];现代农业科技;2011年08期
11 曹志艳;温雷蕾;李静宜;陈晓旭;王作英;董金皋;;玉米大斑病菌St3 HNR基因真核表达载体构建及表达分析[J];河北农业大学学报;2011年03期
12 程相朝,赵德明,吴庭才,李银聚,张春杰;鸡IL-18真核表达载体的构建及其对新城疫疫苗免疫增强作用的研究[J];畜牧兽医学报;2005年05期
13 胡志敏;扈荣良;郑亚东;骆学农;景志忠;岳城;才学鹏;;猪带绦虫六钩蚴TSOL18真核表达载体pVTSOL18m的构建[J];中国预防兽医学报;2006年03期
14 杨玉艾;孙永科;华进联;窦忠英;;人类α-actin启动子真核表达载体的构建及应用[J];畜牧兽医学报;2006年11期
15 陈晓慧;刘明春;石娇;杨群辉;焦阳;;大鼠BDNF基因真核表达载体的构建[J];畜牧与兽医;2006年10期
16 王学敏;李碧侠;任守文;;猪Sar1b基因真核表达载体构建及鉴定[J];安徽农业大学学报;2007年04期
17 徐根亮;由振强;余夏萌;吕冬梅;于涟;;萧山鸡γ-干扰素(IFN-γ)成熟蛋白基因的克隆、原核表达及真核表达载体的构建[J];浙江农业学报;2008年02期
18 席仁荣;刘建军;吴振强;邢秀梅;黄海燕;;靶向Annexin A3短发夹环RNA干扰载体的构建及鉴定[J];安徽农业科学;2008年17期
19 张继乐;陈豪泰;丁耀忠;孙德惠;马丽娜;张杰;金雷;高云英;刘永生;;新城疫病毒Roakin株HN基因的克隆及真核表达载体的构建[J];西北农业学报;2009年02期
20 乔军;孟庆玲;陈创夫;才学鹏;刘佳旭;任艳;张辉;;中国荷斯坦奶牛IL-18基因的克隆与真核表达研究[J];江苏农业科学;2009年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 尹郸丹;梁英民;韩骅;侯丽宏;王耀春;胡兴斌;张萍;康志杰;时宏伟;;RBP-J与KyoT2真核表达载体的构建与鉴定[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
2 郭鹏;闫承慧;郭亮;康建;韩雅玲;;小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建及鉴定[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
3 杨英;刘树铮;;pNEgr-mIL-12真核表达载体的构建及其在体外和体内生物学活性的检测[A];中华医学会放射医学与防护学分会第三次全国中青年学术交流会论文汇编[C];2001年
4 王郡甫;许晓群;张彩;张建华;高春义;;人白细胞介素21真核表达载体的构建及其在NK92细胞中的表达[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
5 郭鹏;闫承慧;郭亮;康建;韩雅玲;;小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建及鉴定[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年
6 蔺丽慧;崔玉宝;李莉;;Fcγ-Der f2载体构建及融合蛋白表达[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
7 彭旭;谭江琳;袁顺宗;马兵;贺伟峰;黄正根;程文广;王晓娟;甘成军;胡婕;杨世伟;杨俊杰;陈希炜;胡晓红;张小容;罗高兴;吴军;;HT036是纤维化相关基因P311的相互作用蛋白[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
8 高蕾;陈幸华;张曦;彭贤贵;孔佩艳;刘林;刘红;张怡;刘耀;;VCAM-1基因的克隆及VCAM-1-pcDNA3.1(+)真核表达载体的构建[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年
9 胡敬海;王春喜;;抑癌基因TIP30真核表达载体的构建[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
10 魏中南;夏剑波;;乙型肝炎病毒前S2基因克隆及真核表达载体的构建[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郭巍;山羊痘病毒基因缺失转移载体及基因缺失突变毒株的构建[D];东北农业大学;2005年
2 郭凯文;ASAP3对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响[D];华中科技大学;2011年
3 廖婵;抗人CD45亚类新单抗ZCH-6-3A4识别抗原表位的研究[D];浙江大学;2011年
4 孙宇辉;人Ang-2基因真核表达载体的构建及对宫颈癌肿瘤血管形成的影响[D];吉林大学;2004年
5 危少华;人重组IL-24基因治疗乳腺癌的实验研究[D];苏州大学;2005年
6 张丽君;bFGF基因转染成骨细胞的生物学性质及成骨研究[D];华南理工大学;2003年
7 李健;miR-155真核表达载体的构建及其在胰腺癌中功能的初步研究[D];中国协和医科大学;2008年
8 许贞书;人血液血管细胞生成素对骨髓基质细胞生物学作用的实验研究[D];福建医科大学;2005年
9 程绍辉;免疫分子的锚定修饰及其抑瘤效果的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
10 王素梅;组织蛋白酶及其组织抑制剂与卵巢癌浸润转移关系的研究[D];广西医科大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韩若婵;羊痘病毒P32基因的克隆、表达及多重PCR诊断方法的建立[D];中国农业科学院;2007年
2 宋晖;KAI1基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞侵袭抑制作用的体外研究[D];第四军医大学;2004年
3 左国伟;人乳头瘤病毒11型E6基因的克隆、真核表达及其功能的初步研究[D];重庆医科大学;2005年
4 涂亦娴;猪瘟病毒E2基因的克隆及其DNA疫苗免疫效果的研究[D];新疆大学;2005年
5 周丹;猪细小病毒SC1株VP2基因表达载体的构建及其表达的研究[D];四川农业大学;2005年
6 李一冬;hTERT真核表达载体的构建与表达[D];郑州大学;2005年
7 李强;重症肌无力抗乙酰胆碱受体单链抗体A7基因真核表达载体的构建[D];延边大学;2006年
8 马维民;羊痘病毒结构蛋白P32基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达[D];甘肃农业大学;2006年
9 王青;新城疫病毒F基因在真核及原核表达系统中的表达[D];西北农林科技大学;2007年
10 许子志;乳腺癌细胞Id1 miRNA真核表达载体构建转染及对MMP9的影响[D];福建医科大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达[N];中国医药报;2003年
2 张中桥;反义Cortactin基因能抑制肝癌细胞转移[N];中国医药报;2006年
3 张中桥;Survivin是脑胶质瘤基因治疗的良好靶点[N];中国医药报;2006年
4 吴一福;首次成功分离出HPA全长编码基因[N];中国医药报;2005年
5 吴一福;四军医大成功建立HCV多表位基因P815细胞系[N];中国医药报;2006年
6 张中桥;西京医院建立稳定表达MAGE-n细胞系[N];中国医药报;2006年
7 万同己;乙肝的基因治疗[N];中国医药报;2004年
8 张中桥;可诱导性真核表达载体构建成功[N];中国医药报;2004年
9 吴一福;第四军医大学发现抑癌新基因[N];中国医药报;2008年
10 张中桥;胃癌免疫治疗研究有新进展[N];中国医药报;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978