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抑癌蛋白PTEN在雌激素和胰岛素样生长因子1诱导子宫内膜癌细胞ERK活化中的作用

张育军  魏丽惠  李小平  王建六  
【摘要】:背景与目的:雌激素和胰岛素样生长因子1(insulinlikegrowthfactor1,IGF-1)在子宫内膜癌细胞中的信号转导机制尚不清楚。本文拟研究雌激素和IGF-1在子宫内膜癌细胞信号转导中激活细胞外信号调节激酶(extracellularsignal-regulatedkinase,ERK)的情况,探讨与细胞骨架蛋白同源的磷酸酶(phosphataseandtensinhomologue,PTEN)在雌激素和IGF-1诱导的ERKs活化中的作用。方法:构建野生型PTEN和突变型PTEN(G129E)的逆转录病毒载体,体外转染Ishikawa细胞,用G418筛选稳定表达的细胞系。Westernblot检测PTEN基因在Ishikawa细胞中的表达,并检测和观察17-β-雌二醇和IGF-1对细胞系Ishikawa-EGFP(对照)、Ishikawa-PTEN和Ishikawa-PTEN(G129E)ERKs活化的浓度效应和时相特点,以及17-β-雌二醇在瞬时转染pCXN2hERα和pCXN2hERβ的NIH3T3细胞中激活ERK的情况。结果:IGF-1可激活ERK,以ERK2为主。不同浓度IGF-1作用于Ishikawa-EGFP和Ishikawa-PTEN时,对ERK2活化无明显区别。40μg/L的IGF-1作用显示5min时ERK2活化最明显。PTEN在IGF-1作用Ishikawa30min、2h和24h时均能抑制ERKs活化,而在5min时没有明显作用。40μg/LIGF-1刺激Ishikawa-PTEN(G129E)5min,和Ishikawa-EGFP相比,无明显改变。17-β-雌二醇可激活ERK,以ERK2为主。不

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