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人细胞色素P450 2C9 cDNA的克隆、鉴定及真核细胞表达重组质粒的构建

汪爱今  钱瑛  钱羽力  余应年  
【摘要】:从人肝组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增人细胞色素P4502C9的cDNA。以T-A克隆方法将该基因的cDNA连接到pGEM-3Z质粒上,然后通过内切酶图谱分析及部分序列分析加以鉴定,结果显示克隆片段具有人细胞色素P4502C9内切酶图谱和核苷酸序列,该片断含5′端和3′端部分非编码区及完整的编码区。最后将该cDNA片段连接到哺乳动物细胞的表达质粒pREP9中。为建立表达人细胞色素P4502C9基因的细胞系打下了基础。

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