| | | | | 沙门菌脉冲场凝胶电泳分型研究 | | | 侯凤伶;刘维华;申志新;韩艳青;申玉学;王英豪;张淑红 | | | 目的:为研究河北省食品中污染的主要沙门菌菌株间的同源关系,特建立了脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法,通过PFGE分型研究在我省建立沙门菌DNA指纹图谱基因库,以便将来对不同来源的沙门菌DNA图谱进行即时比较,确定同源性,进而确定食源性疾病的传染源、传播途径、流行范围等,为从根本上防止食源性疾病的发生提供技术基础。方法:对2005~2007年间我省食源性致病菌监测网从各类食品样品中分离出的7种主要沙门菌(山夫登堡沙门菌、鸭沙门菌、阿贡纳沙门菌、猪霍乱沙门菌、德比沙门菌、伊鲁木沙门菌、肠炎沙门菌),用蛋白酶K和TE缓冲液提取菌体DNA后,用XbaⅠ限制性内切酶消化胶块,然后在CHEF-DRⅢ型仪器上进行脉冲场凝胶电泳,电泳条件为:0.5×TBE电泳缓冲液、冷却温度14℃、initial switch 2.16 s,final switch 63.8 s,time17hours,angle=120,6volt/cm。应用H9812作为脉冲场凝胶分子量标准。结果:我省7种主要沙门菌存在的PFGE型别较多,各菌株间亲缘关系较远,在同种沙门菌间相似性系数最小值为4.4%,但也有同源菌株存在。结论:7种主要沙门菌均未显示流行趋势,同时也表明PFGE是一种灵敏、可靠的研究沙门菌分子流行病学的基因分型方法。
【作者单位】：河北省疾病预防控制中心 石家庄050021(侯凤伶;申志新;韩艳青;申玉学;王英豪;张淑红);石家庄市疾病预防控制中心 石家庄050011(刘维华)
【关键词】：沙门菌;PFGE;电泳
【基金】：河北省科技攻关项目(07276910)
【分类号】：R378.22
【DOI】：CNKI:SUN:ZWJZ.0.2008-05-004
【正文快照】：
沙门菌(Salm onella)是最常见的引起食源性疾病的病原菌,在我国由沙门菌引起的食物中毒占首位,沙门菌种类繁多,国际上已发现2300多个血清型,我国有200多种[1]。河北省食品中污染的沙门菌血清型别多,较分散。排前七位的血清型是山夫登堡沙门菌、鸭沙门菌、德比沙门菌、阿贡纳沙 | | |
| | |  推荐 CAJ下载  PDF下载 | | | CAJViewer7.0阅读器支持所有CNKI文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式 | | | | Molecular analysis of Salmonella by pulsed-field gel electrophoresis | | | Hou Feng-ling1;Liu Wei-hua2;Shen Zhi-xin1;Han Yan-qing1;Shen Yu-xue1;Wang Ying-hao1;Zhang Shu-hong1(1.Hebei Center for Disease Control and Prevention;Shijiazhuang 050021;China;2.Shijiazhuang Center for Disease Control and Prevention;Shijiazhuang 050011;China) | | | Objective:To study the relationship between different strains of Salmonella in Hebei Province,a molecular epidemiologic analysis method-pulsed-field gel electrophoresis was established.To establish DNA Fingerprint databases of Salmonella in Hebei Province by using PFGE typing to compare Salmonella from different sourses with the Salmonella databases and determine the origin of the food borne disease,route of transmission and epidemiological area etc.Therefore it was a technological support to prevent the food borne diseases.Methods:Salmonella spp was isolated from each kind of food in food-borne disease surveillance network of 2005~2007(S.senftenberg,S.anatum,S.agona,S.choleraesuis,S.derby,S.irumu,S.enteritidis),which were digested by proteinase K,endonucleased by XbaI and pulsed-field electrophoresis(PFGE) with a CHEF-DRⅢ in 0.5× TBE buffer with recirculation at 14℃ and a 6-V/cm gradient with pulses ramping from 2.16 to 63.8 s for 17 hours,molecular marker H9812.Results:The PFGE typing of the Salmonella spp isolated from Hebei had more diffrence,indicating that there was no tight genetic relationship among the strains.Minimum value of similarity coefficient was 4.4% in the same type Salmonella,but there still were some homology strains.Conclusion:There is no prevalence among the Salmonella spp in Hebei.PFGE is a good method for molecular epidemiological typing of Salmonella typhi.
【Keyword】：Salmonella;PFGE;Electrophoresis |
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