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《自然科学进展》 2000年12期
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P15~(INK4b)对人黑色素瘤细胞周期及G_1期相关调控基因的影响

刘军  童迎凯  柳惠图  张伟  高萍  
【摘要】:人黑色素瘤细胞A375是P15~(INK4b)缺失细胞系,通过细胞转染技术将外源P15~(INK4b)cDNA转染A375细胞,经PCR和Western blot检测,证明构建了P15~(INK4b)稳定表达细胞模型MLIK6。流式细胞光度术结果显示,与对照组MLC2相比,MLIK6细胞G_1期升高11%,S期下降14%。利用TdR-N_2O同步法所得同步的MLIK6和MLC2的M期细胞比例分别达到89.1%和76.8%,而G_1期的比例分别为74.3%和76.4%。~3H-TdR掺入的结果显示,MLIK6从G_1期进入S期的时间比MLC2延长2 h,并且掺入强度明显减弱。进一步探讨P15~(INK4b)对G_1/S相关调控基因的影响,发现G_1期的MLIK6细胞在诱导P27表达升高的同时,cyclinD1,CdK4,cyclinE和c-myc的蛋白水平均降低,其中cyclinD1的抑制在晚G_1期附近最显著,而对cyclinE的抑制则在G_1/S转换处表现突出,癌基因c-myc表达受到明显抑制并贯穿于G_1→S全部时间进程中。说明P15~(INK4b)是通过对G_1期不同阶段细胞周期引擎分子cyclinD1,CdK4,cyclinE和癌基因c-myc的抑制及增加CKI P27延缓了G_1/S进程。

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
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【共引文献】
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