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《中华心血管病杂志》 2007年12期
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高浓度胰岛素对树突状细胞分化成熟及免疫功能的影响

陆浩  钱菊英  姚康  孙爱军  黄榕翀  郝颖  施鸿毓  王克强  邹云增  葛均波  
【摘要】:目的胰岛素抵抗及高胰岛素血症是动脉粥样硬化发生的重要危险因素,但其机制尚不明确。树突状细胞是目前发现的功能最强的专职性抗原提呈细胞,研究发现树突状细胞参与了动脉粥样硬化免疫炎症反应的过程。研究探讨胰岛素对人单核源的树突状细胞(monocyte deriveddendritic cell,MoDC)分化成熟、免疫功能的影响及其作用机制。方法采用免疫磁珠法分离人外周血 CD14~+单核细胞,在含重组人粒-单核细胞集落刺激因子(rhGM-CSF,100μg/L)和重组人白细胞介素-4(rhIL-4,20μg/L)的完全培养基中培养5天,使其分化为 MoDC。然后单独加入1、10、100 nmol/L浓度的胰岛素。另用 PI3K 抑制剂 LY294002及 MAPK 抑制剂 PD98059干预后再加入1、10、100 nmol/L 浓度的胰岛素。以 PBS 和脂多糖(LPS)分别为阴性及阳性对照组。干预24h 后采用流式细胞术检测树突状细胞表型(CD83、CD86)。FITC-Dextran 检测树突状细胞吞噬功能。ELISA 法检测细胞培养上清细胞因子(IFN-γ、TNF-α和 IL-12)浓度。结果与 PBS 对照组比较,10、100 nmol/L 浓度的胰岛素明显上调了 MoDC 表面 CD83及共刺激分子 CD86的表达(P0.05),且促进 MoDC 分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ和 IL-12,10 nmol/L 的胰岛素减弱了 MoDC 的吞噬功能,而1 nmol/L 的胰岛素则没有以上作用。PD98059及 LY294002干预后使10、100 nmoL/L 浓度胰岛素上调 CD83和 CD86表达及促进TNF-α、IFN-γ和 IL-12分泌的作用明显减弱(P0.05)。结论高浓度胰岛素通过 MAPK 及 P13K 两条途径促进了树突状细胞分化及免疫功能的成熟。高浓度胰岛素可能通过促进树突状细胞免疫功能成熟参与了动脉粥样硬化免疫炎症反应的发生、发展。

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