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《中国生物工程杂志》 2009年07期
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~(13)CMFA过程中GC-MS分析菌体蛋白氨基酸的~(13)C标记丰度

王建  王泽建  黄明志  钱江潮  储炬  张嗣良  
【摘要】:基于13C标记的代谢通量分析(13CMFA)由于具有准确性和应用性已成为国际上代谢工程研究的热点,其中一个至关重要的问题就是分析菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。用含20%全标记葡萄糖([U-13C])和80%天然葡萄糖的合成培养基喂养维生素B12生产菌Pseudomonas denitrifican,然后在稳态条件下取20mg带13C标记菌体用1ml6mol/L盐酸95℃水解24h得到带13C标记的菌体蛋白氨基酸;氨基酸经分离、浓缩、真空干燥、MBDSTFA衍生化后得到的TBDMS衍生物可以用气相色谱-质谱(GC-MS)进行分析,最后分析质谱图得到15种菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。成功获得菌体蛋白氨基酸13C标记丰度信息的实验方法和样品处理技术,为13CMFA在国内进一步发展提供了参考意义。

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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 陈涛,陈洵,王靖宇,班睿,赵学明;DNA及基因组改组在代谢工程中的应用[J];化工学报;2004年11期
2 赵学明,王靖宇,陈涛,陈洵,班睿,马红武;后基因组时代的代谢工程:机遇与挑战[J];生物加工过程;2004年02期
【相似文献】
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1 王建;王泽建;黄明志;钱江潮;储炬;张嗣良;;~(13)CMFA过程中GC-MS分析菌体蛋白氨基酸的~(13)C标记丰度[J];中国生物工程杂志;2009年07期
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