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《色谱》 2013年03期
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柱前衍生-超高效液相色谱法测定鱼卵中的17种氨基酸

孙言春  许宪祝  徐衍岭  谭志军  牟振波  杜宁宁  
【摘要】:建立了一种快速、灵敏的柱前衍生-超高效液相色谱-光电二极管阵列检测器(UPLC-PDA)测定史氏鲟(Aci-penser schrenckii)、达氏鳇(Huso dauricus)和小体鲟(Acipenser ruthenus)鱼卵中17种氨基酸含量的方法。采用6.0mol/L的盐酸水解鱼卵,提取液经低压浓缩、碱性中和,然后以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)为衍生试剂在pH 8.8硼酸盐缓冲溶液中衍生化。采用的色谱分离柱为Waters BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为30 mmol/L乙酸铵水溶液(pH 3.5)和乙腈(含0.15%(v/v)甲酸及30 mmol/L乙酸铵),梯度洗脱,流速为0.7 mL/min,在260 nm波长下检测。17种氨基酸在5.0~1 000μmol/L浓度范围内,峰面积与浓度之间的线性关系良好(r2≥0.995 0)。以标准加入法测定回收率和相对标准偏差(RSD),在100、500、750μmol/L的添加水平下,17种氨基酸的平均回收率为75.4%~107.3%,RSD为2.19%~12.3%。以3倍信噪比(S/N3)计方法的检出限,17种氨基酸的检出限为0.94~4.04μmol/L。应用该方法检测了3种鲟鳇鱼鱼卵中的17种氨基酸含量。结果表明,该方法简便、准确、快速、可靠。

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【参考文献】
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