| | | | | 心肌细胞裂解液诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化作用 | | | 吕学祥;曾秋棠 | | | 目的:用心肌细胞裂解液体外诱导分化骨髓间充质干细胞(SMCs),观察SMCs能否表达脑钠肽(BNP)及β1受体mRNA,是否具有受体后信号转导通路。方法:分离新生乳鼠的心肌细胞并制成心肌细胞裂解液,自成年小鼠长骨骨髓中分离MSCs,并用含有心肌细胞裂解液的培养基培养1周。用逆转录聚合酶链反应方法定性检测MSCs中BNP及β1受体mRNA水平,用放射免疫方法测定MSCs中环磷酸腺苷(cAMP)的含量。结果:诱导组SMCs能表达BNP及β1受体mRNA,对照组不表达BNP和β1受体mRNA。诱导的SMCs经10-8,10-7,10-6,10-5mol/L异丙肾上腺素(ISO)作用2 h后,均能增加细胞内cAMP含量,且具有ISO浓度依赖性(P<0.05或P<0.01)。诱导的SMCs经不同浓度的美托洛尔(MET)10-6,10-5mmol/L作用10 min后,和1×10-7mol/L ISO再一起作用110 min后,测定细胞内cAMP含量与空白组比较,差异无统计学意义;与10-7mol/L ISO作用结果比较,差异有统计学意义(P<0.01),表明MET能完全阻断ISO升高细胞内cAMP作用。结论:心肌细胞裂解液能体外模拟心肌微环境诱导分化SMCs表达β1受体及BNP mRNA,并具有受体后活性的信号转导通路。
【作者单位】：华中科技大学协和医院心内科华中科技大学同济医学院心血管病研究所;华中科技大学协和医院心内科华中科技大学同济医学院心血管病研究所 武汉;430022;武汉;430022
【关键词】：细胞分化;间充质干细胞;心肌细胞裂解液;受体,肾上腺素能β;环磷酸腺苷
【分类号】：R329
【DOI】：CNKI:SUN:LCXB.0.2008-03-021
【正文快照】：
心肌细胞能表达肾上腺素能β受体,在调节心脏传导性和收缩性等方面起着重要作用〔1〕。脑钠肽(BNP)在调节水盐平衡方面起着重要作用。己有研究〔2~4〕证实,骨髓间充质干细胞(SMCs)能在体外经诱导分化剂5-氮杂胞苷诱导为心肌样细胞。少量研究〔5〕表明心肌细胞裂解液能体外模拟 | | | | | |  推荐 下载CAJ全文  下载PDF全文 | | | CAJViewer7.0阅读器支持所有CNKI文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式 | | | | Differentiation of mesenchymal stem cells into cardiomyogenic cells under the induction of myocardial cell lysate | | | LV Xuexiang ZENG Qiutang(Institute of Cardiovascular Diseases;Tongji Medical College;Huazhong University of Science and Technology;Wuhan;430022;China) | | | Objective:In order to understand the effects of cardiac microenviroment on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells(MSCs) into myocardial-like cells,we stimulated the cardiac microenviroment in vitro by adding myocardial cell lysate into the culture system of MSCs and investigated whether brain natriuretic peptide(BNP) and β1 adrenergic receptor(AR) are expressed in cultured SMCs,and if so,whether they have downstream signaling systems.Method:Myocardial cells isolated from newly born rats were lysed by repeated freezing and defrosting.MSCs isolated from adult rat were cultured in two different systems:medium with myocardial cell lysate and control medium. RT-PCR was used to measure BNP and β1AR mRNA expression in cultured MSCs.Cyclic adenosine monophosphate(cAMP) in myocardial cell lysate cultured MSCs was measured by radioimmunoassay.Result:There were not expression of BNP and β1AR mRNA in normal cultured MSCs.After induced by myocardial cell lysate,BNP and β1AR mRNA were expressed.Isoproterenol augmented cAMP in cultured MSCs,which was fully inhibited by metoprolol.Conclusion:The normal cultured rat MSCs didn't express BNP and β1AR mRNA,after treated with myocardial cell lysate,cultured rat MSCs expressed BNP and β1AR mRNA.β1AR had functional signal transduction pathway.
【Keyword】：Cell differentiation;Mesenchymal stem cell;Myocardial cell lysate;Receptor,adrenergic,beta;Cyclic adenosine monophosphate(cAMP) |
| | | | | | 1 | 张勇,蔡振杰,陈如坤; 小鼠骨髓基质干细胞定向诱导为前体心肌细胞 [J]; 第四军医大学学报; 2004年17期 | | 2 | 唐海沁,马健,翟志敏,朱薇波,李结华,阮迪云,颜丹; 人骨髓间充质干细胞体外定向分化过程中心肌细胞特征表达及膜电位变化 [J]; 临床心血管病杂志; 2007年06期 | | 3 | 黄峻,卢新政,马根山,张晓文,侯麦花; 5-氮胞苷诱导大鼠骨髓基质细胞表达β肾上腺素能受体的研究 [J]; 中华心血管病杂志; 2004年08期 | | 4 | 袁岩,陈连凤,张抒扬,吴炜,陈浩,严晓伟; 心肌细胞裂解液对骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化诱导作用的研究 [J]; 中华心血管病杂志; 2005年02期 |
|
| | | | | | 1 | 张勇,陈如坤; 兔缺血心肌中移植自体骨髓基质干细胞的治疗作用 [J]; 第四军医大学学报; 2006年01期 | | 2 | 郑东,杨述华,冯勇,杨操,李进,梅荣成,唐欣,徐亮; 骨髓基质干细胞的单克隆培养和分化的实验研究 [J]; 第四军医大学学报; 2007年15期 | | 3 | 张卫泽,樊艳,陈永清,马凌,秦勉,哈小琴,韩娟萍; 血管紧张素Ⅱ对成人脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化的影响 [J]; 第四军医大学学报; 2008年08期 | | 4 | 曹欣欣,戴玉华,张抒扬,陈连凤,杨琳,方全,严晓伟; 人骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化 [J]; 基础医学与临床; 2007年02期 | | 5 | 肖诗亮,郑日善; 不同方法诱导的骨髓间充质干细胞移植修复大鼠梗死心肌 [J]; 华中科技大学学报(医学版); 2007年03期 | | 6 | 牛萍,黄从新,赵月强,杨波,赵庆彦,王腾,范国华; 重组起搏基因质粒构建生物起搏器的实验研究 [J]; 中华心血管病杂志; 2006年12期 | | 7 | 曹欣欣,戴玉华,张抒扬,陈连凤,赖晋智,严晓伟; 异源性心肌细胞裂解液诱导骨髓干细胞免疫源性的实验研究 [J]; 中华心血管病杂志; 2006年10期 | | 8 | 李莉,张发宝,高平进,杨黄恬,朱鼎良; 大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的体外条件研究 [J]; 中国分子心脏病学杂志; 2006年03期 | | 9 | 买霞,陈莉,扎拉嘎胡,战丽艳,徐瑞成; 大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性观察 [J]; 中国组织工程研究与临床康复; 2007年03期 | | 10 | 吕学祥,曾秋棠; 低氧环境对骨髓间充质干细胞诱导分化的影响 [J]; 中国组织工程研究与临床康复; 2008年12期 |
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| | | | | | 1 | 吴铁军,蔡振杰,俞世强,胡军,胡巧霞,赵科研,周和平; 不同浓度5-氮胞苷对骨髓间质干细胞体外诱导分化的作用 [J]; 第四军医大学学报; 2003年15期 | | 2 | 郑奇军,蔡振杰,俞世强,杨光,王亚云,胡军; 骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞的实验研究 [J]; 第四军医大学学报; 2002年20期 | | 3 | 卢新政,黄峻,李新华,王赤京,张佩生,陈永生; 甲状腺激素对慢性心力衰竭患者外周血淋巴细胞β肾上腺素能受体密度的影响 [J]; 临床心血管病杂志; 2002年12期 | | 4 | 卢新政,张晓文,黄峻,马根山,侯麦花; 大鼠骨髓基质细胞培养方法的改良 [J]; 中国心血管杂志; 2004年01期 |
|
| | | | | | 1 | KATRISTSIS D G,KARVOUNI E,KARABINO S,et al; Transcoronary transplantation of autologous mesenchymal stem cells and endothelial progenitors into infracted human myocardium [M];Cathter Cadivas Interv; 2005年 | | 2 | GROVE J E,BRUSCIA E,KRAUSE D S,et al; Plasticity of bone marrow-derived stemcells [M];Stem Cells; 2004年 | | 3 | CHEN S L,FANG W W,QIAN J,et al; I mprove-ment of cardiac function after transplantation of autol-ogous bone marrow mesenchymal stem cells in pa-tients with acute myocardial infarction [M];Chinese Med J; 2004年 | | 4 | RUBIO D,GUILLEN P,BERNAD A,et al; Differ-erentiated adult articular chondrocytes:a population of human multipotent pri mitive cells [M];Exp Cell Res; 2004年 | | 5 | YING M Z,CRISS H,MICHAEL N,et al; Stem cell-derived cardiomyocytes demonstrate arrhythmic potential [M];Circulation; 2002年 | | 6 | PITTENGER MF,MARKAY A M,BECK S C,et al; Multilineage potential of adult human mesenchy-mal stemcells [M];Science; 1999年 | | 7 | JUDITH L,MANJA B,BARTOSZ B,et al; Elec-trophysiological properties of human mesenchymal stemcells [M];J Physiol; 2003年 | | 8 | Rockman HA, Koch WJ, Lefkowitz RJ; Cardiac function in genetically engineered mice with altered adrenergic receptor signaling [M];Am J Physiol; 1997年 | | 9 | Kuznetsov V, Pak E, Robinson RB, et al; Beta 2-adrenergic receptor actions in neonatal and adult rat ventricular myocytes [M];Circ Res; 1995年 | | 10 | Hakuno DH, Fukuda K, Makino S, et al; Bone marrow-derived regenerated cardiomyocytes(CMG Cells) express functional adrenergic and muscarinic receptors [M];Circulation; 2002年 |
|
| | | | | | 1 | 文渊,王梦洪; 体外诱导间充质干细胞向心肌细胞分化的研究进展 [J];国外医学(老年医学分册); 2006年03期; 25-28 | | 2 | 张志,冯英,谢富康; 骨髓间充质干细胞向肌管状结构分化的动态 [J];中山大学学报(医学科学版); 2006年01期; 39-43 | | 3 | 颉玉欣,王旭,张进贵; 间充质干细胞的研究进展 [J];河北医药; 2005年02期; 50-52 | | 4 | 李宝军,邓展生,许宇霞,叶川,周全,张胜利,沈民仁,鞠洪斌; 特定培养基条件下大鼠脂肪间充质干细胞体外定向软骨细胞的分化 [J];中国组织工程研究与临床康复; 2007年03期; 47-50 | | 5 | 张卫泽,陈跃武,陈永清,哈小琴,马凌,秦勉,洪志斌; 5-氮胞苷体外诱导成人脂肪间充质干细胞分化为心肌样细胞的初步研究 [J];中国循环杂志; 2006年03期; 70-73 | | 6 | 赵媛,徐立; 大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及向脂肪细胞分化的实验研究 [J];四川解剖学杂志; 2007年01期; 32-33 | | 7 | 段小军,杨柳,周跃; 荧光蛋白标记对兔骨髓间充质干细胞体外成脂诱导的影响 [J];第三军医大学学报; 2005年18期; 78-80 | | 8 | 张卫泽,陈跃武,哈小琴,陈永清,秦勉,马凌,郭建巍,洪志斌; 成人脂肪间充质干细胞体外定向诱导分化为心肌样细胞的实验观察 [J];第四军医大学学报; 2006年21期; 32-34 | | 9 | 崔颖,王宏,徐天睿,李学佩,李凌松; 人胚胎关节软骨来源的间充质干细胞 [J];北京大学学报(医学版); 2004年03期; 57-62 | | 10 | 李现铎,耿红全,朱哲,潘骏,谢华,陈方; 孕中期羊水来源胎儿间充质干细胞的分离与培养及其生物学特性研究 [J];中华医学杂志; 2006年07期; 55-57 |
|
| | | | | | 1 | 唐佩弦; 间充质干细胞及其临床应用前景 [A];第三届全国血液免疫学学术大会论文集 [C]; 2003年 | | 2 | 熊中华,许倩,陆德云; 人脐血间充质干细胞向肝细胞分化的研究 [A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编 [C]; 2006年 | | 3 | 姜铧,张洹; 小鼠胎肝间充质干细胞体内向骨骼肌细胞分化的研究 [A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编 [C]; 2005年 | | 4 | 戴育成; 间充质干细胞的生物学特性和应用 [A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编 [C]; 2005年 | | 5 | 郭虹,刘杰文,杨少光,曹德骏,刘津华,廖联明,赵春华; 具有间充质干细胞特征的CD_(105)~+细胞在胎儿多种组织器官的分布 [A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编 [C]; 2003年 | | 6 | 姜铧,张洹; 小鼠胎肝间充质干细胞体内向骨骼肌细胞分化的研究 [A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编 [C]; 2005年 | | 7 | 郑春梅,王忠芬,李柳,胡乃平,刘池,张姗姗,肖海燕,刘锋; 胎儿肺脏来源间充质干细胞的鉴定与损伤修复的实验研究 [A];中医药发展与人类健康——庆祝中国中医研究院成立50周年论文集（下册） [C]; 2005年 | | 8 | 曾丽玲,罗仙,朱进霞,钟耀华,陈小章,舒畅,李廷玉; 体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞向上皮样细胞分化 [A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编 [C]; 2006年 | | 9 | 吴英,张毅,江小霞,张双喜,唐佩弦,毛宁; 增强型绿色荧光蛋白基因在人胎盘间充质干细胞中的表达 [A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编 [C]; 2003年 | | 10 | 刘晓静,陈英,余磊,熊绍虎,潘树义,廖华,黄涛,原林; 人动员外周血间充质干细胞的分离与体外培养的实验研究 [A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编 [C]; 2002年 |
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