| | | | | 体细胞核移植克隆民猪:培养液对卵母细胞成熟及胚胎发育的影响 | | | 刘忠华;田江天;郑重;王振坤;宋军;尹智;高力;马海鹍;孔庆然;孙爽;李玉田;王洪斌 | | | 体外培养成熟的卵母细胞是进行克隆猪研究所需受体卵母细胞的主要来源,卵母细胞成熟质量与体细胞核移植胚胎发育能力关系密切.为提高卵母细胞体外成熟率和成熟质量,进而提高体细胞核移植猪的成功率,本实验以改进的TCM199培养液为基础液(T),分别添加10%的猪卵泡液(T+pFF)和10%的胎牛血清(T+FBS)后进行卵母细胞成熟培养,以成熟率和体细胞核移植胚胎发育率等重要指标为标准,研究了pFF和FBS对卵母细胞成熟及核移植胚胎发育能力的影响.T,T+pFF和T+FBS组在成熟培养后42h卵母细胞成熟率分别为(53.2±3.8)%,(69.7±3.8)%和(70.2±3.7)%,添加10%的pFF和FBS显著(P<0.05)提高了卵母细胞成熟率;3组不同成熟培养液获得的成熟卵母细胞在体细胞核移植后囊胚发育率差异不显著,但T+pFF组的囊胚细胞数(34.5±2.24)显著(P<0.05)高于T组的囊胚细胞数(26.6±1.25).来自T+pFF组的体细胞核移植胚胎经手术法移植入发情周期为第0天或第1天的18头受体母猪输卵管,其中有3头受体母猪妊娠发育到期,获得克隆民猪14头,其中有6头健康成活至今.实验结果表明,培养液中添加10%pFF可以有效提高卵母细胞成熟比例和成熟质量,在含有10%pFF培养液中获得的成熟卵母细胞具有支持核移植胚胎全程发育的能力.
【作者单位】：东北农业大学生命科学学院 哈尔滨150030(刘忠华;田江天;郑重;王振坤;宋军;尹智;孔庆然;孙爽);东北农业大学动物医学学院 哈尔滨150030(高力;马海鹍;王洪斌);哈尔滨市三元畜牧实业有限公司 哈尔滨150030(李玉田)
【关键词】：体细胞核移植;体外成熟;胎牛血清;猪卵泡液;猪
【基金】：黑龙江省教育厅海外学人基金(1055HZ031);东北农业大学“211人才专项”基金资助
【分类号】：Q813
【DOI】：CNKI:SUN:JCXK.0.2007-06-005
【正文快照】：
自从克隆羊“多莉”出生以来,目前已经有10余种克隆哺乳动物出生[1~12].而且基于体细胞核移植路线的转基因动物也在多个物种取得成功[13~15].世界上首例克隆猪是在2000年出生的[4],之后又相继有多个基因修饰猪顺利出生[16~19],展示出克隆猪和转基因猪在人类器官移植领域、人类疾病模型动物以及家猪保种和育种等方面的强大应用潜力.卵母细胞质量对体细胞核移植成功率的影响巨大.目前进行克隆猪和基因修饰猪研究所用的卵母细胞主要有两种来源:体内成熟卵母细胞和体外成熟卵母细胞.应用体内成熟卵母细胞的优点是卵母细胞成熟质量好,核移植后重… | | |  推荐 CAJ下载  PDF下载 | | | CAJViewer7.0阅读器支持所有CNKI文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式 |
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