《甘肃农业大学学报》2008年03期 加入收藏    获取最新 
 H9N2亚型禽流感病毒NA基因的原核表达及其免疫反应性分析
 易华山;侯顺利;独军政;胡永浩;包世俊;常惠芸
 　　采用PCR方法扩增H9N2亚型禽流感病毒A/Ck/GS/2/99株NA基因(1 400 bp),克隆至pET-28a(+)载体上,构建重组原核表达载体pET-NA,转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,以终浓度0.8 mmol/L的IPTG诱导表达8 h.表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析表明:该载体能高效表达NA蛋白,相对分子质量约52KD,纯化产物能与N2亚型的AIV鸡血清发生特异性反应.
【作者单位】：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;甘肃农业大学动物医学院;甘肃农业大学动物医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室 甘肃兰州730046;甘肃农业大学动物医学院;甘肃兰州730070;甘肃兰州730046;兰州军区疾病预防控制中心;甘肃兰州730020;甘肃兰州730046;甘肃兰州730070;甘肃兰州730070;甘肃兰州730046
【关键词】：禽流感;血凝素;原核表达;H9N2;免疫反应性
【基金】：农业部畜禽病毒学重点开放实验室开放课题资助.
【分类号】：S852.5
【DOI】：CNKI:SUN:GSND.0.2008-03-006
【正文快照】：
　　禽流感(avianInfluenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类疾病,严重危害畜牧业发展和人类健康.自1997年爆发H5N1高致病性禽流感病毒(Highly Pathogenic Avian Influenza Virus,HPAIV),1999年爆发H9N2亚型禽流感病毒(A-vian Influenza Virus,AIV)以来,说明流感病毒(Influenza v
 
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 Prokaryotic expression of avian influenza virus NA Gene (H9N2) and its immunoreactivity analysis
 YI Hua-shan1;3;HOU Shun-li1;2;DU Jun-zheng1;HU Yong-hao3;BAO Shi-jun;CHANG Hui-yun1 (1.Key Laboratory of Animal Virology of Ministry of Agriculture;State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology;Lanzhou Veterinary Research Institute;Chinese Academy of Agricultural Sciences;Lanzhou 730046;China;2.Center of Disease Control;Lanzhou Military Area;Lanzhou 730020;China;3.College of Veterinary Medicine;Gansu Agricultural University;Lanzhou 730070;China)
 　The NA gene with a length of 1 400 bp was amplified by PCR from A/Ck/GS/2/99(H9N2)strains of avian influenza virus.The correct NA gene was inserted into the expression vector pET-28a(+) to obtain the recombinant plasmid pET-NA.The target gene was successfully expressed in the host cell E.coli BL21(DE3)induced with 0.8 mmol/L IPTG for 8 hours.The NA protein with relative molecular mass of approximately 52 000 was observed on the SDS-PAGE gel.The immunoreactivity of expressed protein was analyzed by Western blot using positive serum of avian influenza virus H9N2 subtype.The results showed that recombinant NA protein can bind to positive serum of N2 subtype.
【Keyword】：avian influenza virus;NA;prokaryotic expression;H9N2;immunoreactivity
 【参考文献】 共（1）篇 
 西文参考文献找到 1 条
 
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