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25型蓝舌病病毒VP2蛋白原核表达及其单克隆抗体制备

李一经  李佳璇  武啸  臧明鑫  谢双羽  姜艳平  崔文  唐丽杰  
【摘要】:蓝舌病(Bluetongue,BT)为蓝舌病毒(Bluetongue virus,BTV)引起,以高热、白细胞减少、黏膜溃疡性炎症等为主要症状的反刍动物传染病。试验将25型BTV VP2蛋白分段基因分别克隆至p MAL-c5x载体,以终浓度1.0 mmol·L-1IPTG为诱导剂,在大肠杆菌中分别诱导表达带麦芽糖结合蛋白(MBP)标签的融合蛋白MBPVP2-A、MBPVP2-B、MBPVP2-C。分别以带His标签的重组VP2分段蛋白VP2-A、VP2-B、VP2-C为免疫原,以试验表达VP2分段蛋白MBPVP2-A、MBPVP2-B、MBPVP2-C为抗原筛选杂交瘤细胞。通过细胞融合筛选出6株稳定分泌单克隆抗体的交杂细瘤胞,其中4株Mc Ab亚型鉴定为Ig G;2株Mc Ab亚型鉴定为Ig M。试验为建立25型BTV血清学鉴别诊断方法奠定基础。

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