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《重庆师范大学学报(自然科学版)》 2008年01期
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草鱼肝胰脏中两种胰蛋白酶的纯化及部分性质的研究

耿莉娜  胡重江  李英文  
【摘要】:本试验采用硫酸铵分级沉淀和鸡卵类粘蛋白偶联的琼脂糖凝胶亲和层析的方法,从草鱼(CtenopharyngodonIdellus)肝胰脏中提取胰蛋白酶进行纯化,得到两种酶,即胰蛋白酶A(GTA)和胰蛋白酶B(GTB),并对其性质进行了分析。结果表明,两种酶的SDS-PAGE电泳均呈现出单一条带,表明已得到高度纯化,两种酶分子量约为27 Kda。以BANPA为底物,测得草鱼胰蛋白酶A(GTA)的动力学常数(Km)为0.37 mM。以TAME为底物测得两种胰蛋白酶最适反应温度为60℃,最适反应pH值为8.0,当温度超过60℃,它们不稳定,这两种胰蛋白酶在pH值9.0~11.0时较稳定。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 刘亮亮;韩玲;郭兆斌;李君兰;;影响猪胰蛋白酶提取部分工艺因素研究[J];食品工业科技;2010年05期
2 黄烨;谢锐田;何建妹;龚翠;周爱梅;;罗非鱼肠道胰蛋白酶和猪胰蛋白酶性质对比研究[J];食品工业科技;2011年05期
3 周超;李素霞;;重组猪胰蛋白酶冻干制剂稳定性研究及在细胞培养中的应用[J];食品与药品;2012年07期
4 张鹏;姜国良;王军仁;;南极大磷虾胰蛋白酶可促进创面的愈合[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年50期
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 吴莎;淡水鱼内脏制备复合酶的工艺研究[D];湖北工业大学;2011年
2 耿莉娜;鲫鱼和黄鳝肝胰脏中胰蛋白酶的纯化、性质及蛋白分解活性的比较研究[D];重庆师范大学;2008年
3 丁茜;奥尼罗非鱼胰蛋白酶的纯化、性质及蛋白消化力的研究[D];重庆师范大学;2009年
4 花育旗;萍乡红鲫胰蛋白酶提取纯化及酶原前体cDNA克隆、序列分析[D];南昌大学;2010年
5 郭娟;齐口裂腹鱼肝胰脏中胰蛋白酶的纯化、性质及酶解动力学的研究[D];重庆师范大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
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2 李菡君;邵文友;姚艳红;王志坚;;长鳍吻鮈消化系统组织学初步研究[J];重庆师范大学学报(自然科学版);2007年03期
3 叶元土,林仕梅,罗莉,杨思华,陈文;温度、pH值对南方大口鲶、长吻鮠蛋白酶和淀粉酶活力的影响[J];大连水产学院学报;1998年02期
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 杨文平;王爱民;孙雪;;饲料中着色剂对黄颡鱼生长和消化酶活性的影响[J];安徽农业科学;2008年35期
3 刘金兰;王培;;美洲鲥鱼消化系统消化酶活性研究[J];安徽农业科学;2009年02期
4 齐红莉;王睿睿;王晓梅;李琳;徐立坡;;反应温度对斜带髭鲷消化酶活力的影响[J];安徽农业科学;2010年03期
5 黄建盛;陈刚;张健东;施钢;潘传豪;;三种饲料对卵形鲳鲹幼鱼消化酶活性的影响[J];安徽农业科学;2010年14期
6 宋威;张芹;;斑点叉尾鮰消化酶活性研究[J];安徽农业科学;2010年29期
7 葛晨霞;周景祥;董晓庆;裴怀全;朱成成;;不同的pH值对翘嘴红鲌消化器官蛋白酶活性的影响[J];安徽农业科学;2010年31期
8 蒋涛;申志新;王国杰;杨成;祁得林;;黄河裸裂尻鱼消化道与肝胰脏淀粉酶的分布与特性研究[J];安徽农业科学;2011年19期
9 马诚;朱敏;李英文;;养殖丁肝胰脏淀粉酶活性的初步研究[J];安徽农业科学;2012年07期
10 张盛周,朱升学,佟媛,张荣,樊爱绪;pH值和温度对虎纹蛙消化系统蛋白酶活力的影响[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2005年02期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 梁志强;李传武;卞伟;刘明求;余长生;杨奠元;;湘华鲮消化系统形态学、组织学与消化酶研究[A];中国南方十六省(市、区)水产学会渔业学术论坛第二十六次学术交流大会论文集(下册)[C];2010年
2 张春梅;王成章;高永革;李振田;刘祥;史莹华;何云;刘圈炜;;含紫花苜蓿饵料对鲤鱼生长性能、肉品质及消化酶活性的影响[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘伟;怀头鲇Silurus soldatovi早期发育生理生态学研究[D];中国海洋大学;2010年
2 王宏田;牙鲆免疫系统和抗病力的研究[D];中国科学院海洋研究所;2000年
3 黄峰;大口鲇化学性消化机能研究[D];华中农业大学;2001年
4 杨代勤;黄鳝营养需要与消化酶的研究[D];华中农业大学;2002年
5 黎军胜;外源因子对罗非鱼消化酶活性和胰蛋白酶mRNA表达的影响[D];南京农业大学;2004年
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8 王纪亭;非淀粉多糖酶在奥尼罗非鱼饲料中的应用及其作用机理的研究[D];中国农业大学;2005年
9 陶红;金线鱼胃蛋白酶纯化鉴定及结构研究[D];华南理工大学;2007年
10 安振华;温度及其周期性波动对刺参Apostichopus japonicus(Selenka)生长和能量收支的影响[D];中国海洋大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵霞;不同养殖密度对两种鲆鲽鱼类生长及免疫指标的影响[D];中国海洋大学;2010年
2 王锐;豹纹鳃棘鲈人工育苗技术和生理指标的初步研究[D];河北农业大学;2011年
3 吴莎;淡水鱼内脏制备复合酶的工艺研究[D];湖北工业大学;2011年
4 孙国祥;流速、温度对封闭循环水养殖大菱鲆摄食效应和动态投喂模型的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
5 付宁;七彩神仙鱼人工繁殖及生态调控育苗技术研究[D];山东农业大学;2010年
6 翁敏婵;延迟首次投喂对河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)仔、稚鱼消化酶活力的影响[D];重庆师范大学;2011年
7 赵春彦;草鱼肝胰脏淀粉酶的纯化及理化性质的研究[D];重庆师范大学;2011年
8 杨宇晖;鳜PEP、LPL基因单核苷酸多态性研究与鱼食性驯化相关分析[D];暨南大学;2011年
9 王彦苏;稳定同位素标记技术分析不同饲料对刺参(Apostichopus japonicus)生长及消化吸收的影响[D];中国海洋大学;2011年
10 袁玉仁;野生和养殖花鲈消化酶活性比较及碱度对花鲈幼鱼消化酶活性的影响[D];中国海洋大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 夏庆;薛正莲;;胰蛋白酶水解酪蛋白所得产物抗菌活性的研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2007年01期
2 陈荣昌;杜泓璇;马尧;羊芹;唐云明;;青鱼胰蛋白酶的分离纯化及部分性质研究[J];安徽农业科学;2008年11期
3 倪寿文,桂远明,刘焕亮;草鱼、鲤、鲢、鳙和尼罗罗非鱼肝胰脏和肠道蛋白酶活性的初步探讨[J];动物学报;1993年02期
4 戴巍;;冷冻鲢鱼片生产工艺[J];保鲜与加工;2006年02期
5 郭善军,陈章宝;团头鲂、淡水白鲳、黄颡鱼的淀粉和蛋白酶活性研究[J];重庆工学院学报;2004年05期
6 沈文英,寿建昕,祝尧荣,金叶飞;银鲫消化酶活性与pH值的关系[J];水产科学;2002年06期
7 苑艳辉,钱和,姚卫蓉;鱼下脚料综合利用之研究近况与发展趋势[J];水产科学;2004年11期
8 冯俊荣;陈营;刘红梅;;牙鲆幼鱼消化能力与肠道蛋白酶活性的研究[J];水产科学;2006年04期
9 周继术;吉红;姜媛;;关于鲤、鲫、草鱼对苹果渣离体消化率的比较研究[J];水产科学;2006年07期
10 胡维;王爱民;王建民;;酶清创的研究进展[J];创伤外科杂志;2010年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 王宁;甲壳动物胰蛋白酶基因的研究[D];中国海洋大学;2004年
2 凌统;中华倒刺鲃胰蛋白酶的cDNA克隆与序列分析[D];西南大学;2006年
3 张美红;黄鳝胰蛋白酶的纯化及动力学性质的研究[D];西南大学;2006年
4 崔伟;真空冷冻干燥设备的分析和黄瓜真空冷冻干燥工艺的实验研究[D];合肥工业大学;2006年
5 郑凯迪;胭脂鱼胰蛋白酶原前体的cDNA克隆、序列分析及饲料对胰蛋白酶活性的影响[D];西南大学;2007年
6 耿莉娜;鲫鱼和黄鳝肝胰脏中胰蛋白酶的纯化、性质及蛋白分解活性的比较研究[D];重庆师范大学;2008年
7 丁茜;奥尼罗非鱼胰蛋白酶的纯化、性质及蛋白消化力的研究[D];重庆师范大学;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 荣婧;蒋爱民;郭善广;吴著敏;吴德彬;;罗非鱼内脏蛋白酶特性及内脏蛋白自溶工艺研究[J];现代食品科技;2012年06期
2 黄烨;谢锐田;何建妹;龚翠;周爱梅;;罗非鱼肠道胰蛋白酶和猪胰蛋白酶性质对比研究[J];食品工业科技;2011年05期
3 于翠芳;李洁慧;王莹;朴美子;张静;;章鱼消化道蛋白酶提取纯化条件的研究[J];实验室研究与探索;2012年08期
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 冯文荣;文昌鱼胰蛋白酶基因的鉴定、表达和功能研究[D];中国海洋大学;2011年
2 孙利燕;荷包红鲤胰蛋白酶的分离纯化及胰蛋白酶的固定化[D];南昌大学;2011年
3 李秀娟;胭脂鱼胰蛋白酶的分离纯化与化学修饰研究[D];重庆师范大学;2010年
4 郭娟;齐口裂腹鱼肝胰脏中胰蛋白酶的纯化、性质及酶解动力学的研究[D];重庆师范大学;2010年
5 刘丹;传统发酵鲍鱼内脏低盐鱼酱油的研究[D];福建农林大学;2012年
6 于淼;带鱼内源消化酶系酶解豆粕的研究[D];中国海洋大学;2012年
7 张鹏;南极大磷虾胰蛋白酶分离纯化及其促进创伤修复作用研究[D];中国海洋大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 倪達書,蒋燮治;花鲢和白鲢的食料问题[J];动物学报;1954年01期
2 彭姜岚;曹振东;付世建;;鲇鱼形态特征参数与体长关系及变异分析[J];重庆师范大学学报(自然科学版);2007年01期
3 桂远明,吴垠,刘焕亮,韩培琪,王莉,李群;温度对草鱼、鲤、鲢、鳙主要消化酶活性的影响[J];大连水产学院学报;1992年04期
4 潘黔生,郭广全,方之平,李占国;6种有胃真骨鱼消化系统比较解剖的研究[J];华中农业大学学报;1996年05期
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6 谢碧文,王志坚;瓦氏黄颡鱼消化系统组织学的初步研究[J];内江师范学院学报;2002年02期
7 张本;;鲩、鲢鱼种摄食强度变化的一些规律[J];水产学报;1966年01期
8 李思发,杨和荃,陆伟民;鲢、鳙、草鱼摄食节律和日摄食率的初步研究[J];水产学报;1980年03期
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10 石志中,方德奎,张卫;白鲢等鱼种对螺旋鱼腥藻消化吸收的示踪实验报告[J];水生生物学集刊;1975年04期
【相似文献】
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1 秦克锋,汪美先,姜绍谆,马文煜;单纯疱疹病毒Ⅱ型三万道尔顿糖蛋白的纯化及其特性研究[J];第四军医大学学报;1985年04期
2 刘浦;人血清中补体成分C_1~-抑制物抗原的分离[J];免疫学杂志;1988年02期
3 王春霞,卿晨,金长振;人胎盘雌二醇 17β-脱氢酶的染料凝胶亲和层析[J];生物化学与生物物理进展;1991年02期
4 赵晓瑜,静天玉;蚯蚓纤溶酶的成分分析[J];中国生物化学与分子生物学报;1998年04期
5 辛海涛;王卫宁;张琳;刘国振;;重组人Jo-1抗原的表达、纯化以及免疫特异性检测[J];河北职工医学院学报;2006年03期
6 刘峥;林原斌;吕慧丹;;交联海藻酸钠磁性微球的制备及固定化胰蛋白酶研究[J];材料导报;2006年12期
7 施媚;何执中;;以壳聚糖为基质对蚯蚓纤溶酶进行亲和层析[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2007年01期
8 周贝贝;李明辉;于雅晴;宋娟;陈光;肖华胜;;一种快速高效的全基因组甲基化CpG岛富集方法的建立[J];中国生物工程杂志;2008年05期
9 李秀娟;郭娟;易艳;李英文;;胰蛋白酶改性的研究现状和展望[J];兽药与饲料添加剂;2009年04期
10 费凡;闫巧娟;江正强;Kumar Narasimha;;膜荚黄芪种子中2种几丁质酶的分离纯化及活性测定[J];西北植物学报;2009年12期
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1 胡重江;;草鱼胰蛋白酶的纯化及部分性质研究[A];中国海洋湖沼动物学会鱼类学分会第七届会员代表大会暨朱元鼎教授诞辰110周年庆学术研讨会学术论文摘要集[C];2006年
2 周智洋;单鸿;邹学农;Steffen Ringgaard;邹立津;李海声;Hans Stødkilde-Jørgensen;Cody Bünger;;家猪体外胰蛋白酶消化关节软骨的7.0TMR T1ρ加权成像与量化分析[A];中华医学会第16次全国放射学学术大会论文汇编[C];2009年
3 卢珊;何静;;含巯基的三维立方介孔氧化铝-氧化硅杂化膜及其固酶性能[A];中国化学会第27届学术年会第01分会场摘要集[C];2010年
4 李伟;罗彦英;李继坤;罗连城;;胰蛋白酶及磷脂酶A_2在大鼠胰源性肺损伤过程中的致损作用及中药对其影响[A];第七届全国中西医结合普通外科临床及基础研究学术会议论文汇编[C];2001年
5 刘冬生;金桂貞;武莉;李泽英;;黄豆粉中胰蛋白酶抑制物,細胞凝集素和脲酶活性的测定方法及其应用[A];中国生理科学会第二届全国营养专业学术会议论文摘要汇编[C];1979年
6 米淑敏;;甲鱼口服液蛋白水解条件的研究[A];北京食品学会青年科技论文集[C];1992年
7 张亚丽;徐忠;;变性脱脂豆粕酶解物的特性研究[A];中国食品科学技术学会第五届年会暨第四届东西方食品业高层论坛论文摘要集[C];2007年
8 袁永俊;高健;;水解鱼肉蛋白的酶法制备[A];中国西部农产品加工及产业化发展战略研讨会论文集[C];2001年
9 林音;程贤甦;;木质素衍生物与胃蛋白酶的相互作用研究[A];2008全国功能材料科技与产业高层论坛论文集[C];2008年
10 朱美财;占志;王雅静;菜庆;;刺桐胰蛋白酶抑制剂突变体在大肠杆菌中的表达及在TPA纯化中的应用[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
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1 本报记者 王彩丽;“豆浆和鸡蛋不能一起吃”[N];卫生与生活报;2006年
2 吴南;喝豆浆的注意事项[N];中国中医药报;2007年
3 薛玉华;常用饲料中的有毒成分与降解方法[N];瓜果蔬菜报.农业信息周刊;2006年
4 李增宁骆彬;喝豆浆 有禁忌[N];家庭医生报;2008年
5 蒲昭和;暴饮暴食易引发急性胰腺炎[N];中国中医药报;2005年
6 赵新培;吃饭组合不当宜致病[N];农民日报;2005年
7 李增烈;胆石症与胰腺炎为何“难舍难分”[N];家庭医生报;2007年
8 湖南中医药大学第一附属医院国家中医肝病中心;胆石症常常引发胰腺炎[N];大众卫生报;2007年
9 陈强;圣农:三条副业链打造大产业[N];福建日报;2006年
10 张禹;什么是胰源性腹泻[N];家庭医生报;2006年
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1 玄国东;米糟蛋白提取及酶法制备抗氧化活性肽及降血压活性肽的研究[D];浙江大学;2006年
2 刘振桐;结核分枝杆菌H37Rv分泌滤液中糖蛋白的筛选[D];大连医科大学;2007年
3 沈元月;脱落酸(ABA)结合蛋白基因克隆、表达及其产物对ABA的特异结合[D];中国农业大学;2003年
4 刘伟;水貂胰蛋白酶消化模型的建立及外源酶对水貂消化和生产性能的影响[D];中国农业科学院;2007年
5 张慧云;IL-12对肥大细胞蛋白酶激活受体表达和介质分泌的影响[D];汕头大学;2007年
6 李世军;胸腺五肽的化学—酶法合成及其脂质体缓释剂型研究[D];吉林大学;2008年
7 王胜芬;脂联素在原核系统中的表达及其抑瘤活性研究[D];中国协和医科大学;2005年
8 牛青霞;蛋白酶活化受体-2激活剂在诱导人脐静脉内皮细胞释放炎症因子中的作用[D];汕头大学;2008年
9 孙杰;中国明对虾(Fenneropenaeus Chinensis)几种免疫相关因子的分离纯化、基因克隆及相互关系研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2009年
10 毕罡;Claudin-3作为候选癌标在前列腺癌诊治中的应用研究[D];第三军医大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗灿;激肽释放酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶联产工艺的研究[D];四川大学;2007年
2 张亮亮;胃蛋白酶、胰蛋白酶对大豆凝集素稳定性的影响[D];吉林农业大学;2007年
3 曹新影;多孔二氧化硅空心微球的制备及其在生物亲和层析中的应用[D];汕头大学;2007年
4 胡重江;草鱼胰蛋白酶的纯化及部分性质研究[D];西南农业大学;2005年
5 陈阶;斑蝥素提取、特异性抗体的制备及其酶联免疫检测方法的研究[D];重庆大学;2008年
6 刘杰;vMIP-Ⅱ在大肠杆菌表达、纯化的条件优化及活性鉴定[D];暨南大学;2003年
7 王文亮;黄粉虫氨基酸保健口服液的研究[D];山东农业大学;2006年
8 张立;新型β-琼胶酶工程菌株的构建、重组表达及体外复性的研究[D];中国海洋大学;2006年
9 高晓鹏;结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因的克隆表达及其促生长作用的研究[D];第四军医大学;2007年
10 杨卓刚;嗜热菌Thermus thermophiles HB8丙酮酸脱氢酶的表达及其酶动力学测定[D];首都师范大学;2008年
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