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《中药药理与临床》 2019年04期
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剑叶耳草多糖对乙型肝炎病毒的抑制作用及其机制研究

蒙明瑜  黄仁彬  梁红  
【摘要】:目的:观察剑叶耳草多糖对乙型肝炎病毒的抑制作用,并初步探究其分子机制。方法:(1)以乙型肝炎病毒转染的Hep G2. 2. 15细胞为体外细胞模型,采用MTT法检测剑叶耳草多糖对Hep G2. 2. 15细胞存活率的影响,在无毒浓度(50、100、200 mg/L)下作用Hep G2. 2. 15细胞,并设置阳性药物恩替卡韦组(1 mg/L)和模型对照组,使用ELISA法测定上清液HBs Ag、HBe Ag的滴度,使用荧光定量PCR法测定上清液HBV DNA的含量。(2)颈静脉注射强阳性HBV DNA鸭血清建立广西麻鸭乙型肝炎模型,随机分为剑叶耳草多糖200、400、800 mg/kg、恩替卡韦1 mg/kg组和模型对照组,持续给药14天,鸭颈静脉采血,检测鸭血清中HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA含量,HE染色观察肝损伤程度。(3)采用荧光定量PCR法检测Hep G2. 2. 15细胞蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号传导及转录激活因子1(STAT1)、信号传导及转录激活因子2(STAT2)、干扰素刺激基因因子3(ISGF3) mRNA以及抗病毒蛋白寡聚腺营酸合成酶(OAS)和蛋白激酶R(PKR) mRNA表达水平。结果:(1)剑叶耳草多糖对Hep G2. 2. 15细胞毒性较低。与模型对照组相比,50、100、200 mg/L剑叶耳草多糖能够明显抑制Hep G2. 2. 15细胞分泌和表达HBV DNA,有效抑制HBs Ag和HBe Ag分泌。(2)与模型对照组广西麻鸭相比,剑叶耳草多糖200 mg/kg组给药后血清HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA含量明显下降,肝病理损伤明显缓解。(3) 100、200 mg/L剑叶耳草多糖能明显上调细胞因子JAK1、STAT1、STAT2、ISGF3 PKR mRNA以及抗病毒蛋白OAS的表达。结论:剑叶耳草多糖具有显著抑制乙型肝炎病毒的作用,其机制与激活JAK/STAT信号转导通路、促进抗病毒蛋白表达有关。

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