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液相色谱-串联质谱法同时测定对乙酰氨基酚及其相关代谢产物

郭波  唐秀玲  石磊  党学良  张琰  
【摘要】:目的:建立一种检测小鼠血浆中对乙酰氨基酚(APAP)及其5个代谢产物的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,将之应用于对乙酰氨基酚的代谢研究。方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以对氨基苯甲酸(PABA)为内标,采用LC-MS/MS法,C18色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L~(-1)乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(55∶45),流速为0.5 ml·min~(-1),柱温为25℃,采用电喷雾离子化(ESI),正离子多反应监测(MRM)检测方式进行定量分析:APAP,[M-H]~-,m/z 152.0→110.0;APAP-cys,[MH]~-,m/z 271.2→140.1;APAP-glut,[M-H]~-,m/z 457.0→328.0;APAP-NAC,[M-H]-,m/z 313.4→208.0;APAP-sulf,[MH]~-,m/z 232.4→152.1;APAP-gluc,[M-H]~-,m/z 328.2→152.1;IS,[M-H]~-,m/z 138.2→120.0。结果:在0.2~10μg·ml~(-1)(APAP)、1.0~20μg·ml~(-1)(APAP-gluc)、1.0~20μg·ml~(-1)(APAP-sulf)、1.0~20μg·ml~(-1)(APAP-glut)、0.4~15μg·ml~(-1)(APAP-NAC)和0.2~10μg·ml~(-1)(APAP-cys)范围内线性良好(r≥0.990 0)。各测定物的日内精确度均在85%~115%间,精密度均小于15%,加样回收率均在85%~115%之间,RSD均低于15%。结论:该方法快速、灵敏、准确,适用于小鼠血浆中对乙酰氨基酚及其5个代谢产物的定量测定。

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