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《科技创新导报》 2016年07期
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精氨酸对乳蛋白合成的调控

吴天佑  王洪荣  
【摘要】:脂多糖(Lipopolysaccharide LPS)能调控m TOR信号通路影响炎症反应及乳蛋白的合成。而L-精氨酸(L-Arg)可以经Arg-NO途径及m TOR途径发挥免疫作用并促进蛋白质的沉积。该试验采用LPS刺激中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞建立免疫模型,研究应激条件下L-精氨酸(L-Arg)对奶牛乳腺上皮细胞炎症反应及β-酪蛋白基因表达的影响,旨在探讨L-Arg能否缓解乳腺上皮细胞的免疫应激作用。复苏2代泌乳奶牛乳腺上皮细胞,待长满90%经消化后调整密度接种于6孔板。细胞贴壁后饥饿培养16 h,分为四组(每组3个重复,每个孔为一个重复)分别用DMEM/F12培养基(对照组),终浓度为100 g/LL-Arg、10 g/LLPS、100 g/LL-Arg+10g/LLPS的DMEM/F12培养基培养细胞,分别于12 h、24 h提取细胞总RNA。以β-actin为内参采用Real-time PCR法检测Toll样受体4(TLR4),细胞核因子(NFκB),白介素-1(IL-1β),白介素-6(IL-6),诱导型一氧化氮合成酶(i NOS),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR),β-酪蛋白(CSN2)m RNA的相对表达。12 h时与对照组相比较,添加LPS组能显著上调TLR4、NFκB、IL-1β、IL-6、i NOS、m TOR的表达(0.05);而与LPS组相比,添加L-Arg+LPS组中TLR4,m TOR的表达显著降低(0.05)。24 h时与对照组相比,添加L-Arg组中m TOR的上调差异显著(0.05),添加LPS组NFκB、IL-1β、IL-6、i NOS的表达上调仍然显著(0.05),而m TOR的表达差异不显著(0.05),CSN2的表达显著降低(0.05);与L-Arg组相比添加L-Arg+LPS组中TLR4、NFκB、IL-1β、IL-6、i NOS、m TOR表达显著上调(0.05),而CSN2的表达差异不显著(0.05);与LPS组相比添加L-Arg+LPS组中TLR4、NFκB及炎症因子IL-1β、IL-6的表达显著降低(0.05),β-酪蛋白基因CSN2的表达显著增加(0.05)。LPS刺激泌乳奶牛乳腺上皮细胞促进了炎症因子的表达,并降低β-酪蛋白的表达,而L-Arg能缓解乳腺上皮细胞的炎症反应及β-酪蛋白表达的抑制作用。
【作者单位】扬州大学;
【分类号】:S823

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