收藏本站
《中国卫生检验杂志》 2011年07期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

利用大肠埃希菌分泌表达乙型肝炎病毒核心抗原

吴宗华  胡波  李朝霞  祝中一  
【摘要】:目的:研究乙型肝炎病毒核心(C)基因在大肠埃希菌(E.coli)中的表达,以期获得分泌表达的具有良好免疫反应性和特异性的HBcAg。方法:构建重组质粒pET-3c-cAg、pET-30a-cAg、pGEX-4T-1-cAg,转入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达HBcAg。SDS-PAGE、ELISA和Western blot对表达产物进行分析。结果:限制性内切酶酶切和DNA序列分析证实HBV C基因正确克隆到E.coli各表达载体中。ELISA和Western blot分析表明,以pET-3c和pET-30a为表达载体能在E.coli分泌表达HBcAg,而以pGEX-4T-1为载体只能胞内表达,其中以pET-3c为载体的分泌表达量最高,培养上清中其效价为1∶128;用分泌表达的HBcAg作为诊断抗原检测抗-HBc阴阳性血清及国家参考品,符合率为100%。结论:成功获得HBcAg在E.coli的分泌表达,且其具有较高的特异性和免疫反应性。

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 杨海杰,张军,罗文新,李少伟,管保全,夏宁邵;一种高效、稳定的分泌型原核表达载体的构建及应用[J];厦门大学学报(自然科学版);2003年04期
2 李朝霞;席云;洪国强;胡波;梁敏坚;许珏;李林;;乙型肝炎病毒合成e基因在毕赤酵母中的表达及产物免疫学特性[J];中华检验医学杂志;2006年09期
3 田树萍;于艳华;辛咏梅;孙桂珍;;乙型肝炎病毒核心抗体特殊模式检测结果比较[J];中国误诊学杂志;2009年19期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 王颖彬,张军,林长青,徐颖潇,罗文新,吴婷,彭耿,夏宁邵;重组人类T淋巴细胞白血病病毒抗原及双抗原夹心法ELISA抗体诊断试剂盒的研制[J];病毒学报;2004年02期
2 洪国强;胡波;李朝霞;;HIV-1膜蛋白基因gp120和gp41的合成及在毕赤酵母中的表达[J];广东医学;2008年02期
3 周倩;何小维;彭运平;刘晓云;王海龙;;乙肝e抗原在大肠杆菌中的高效表达和优化[J];现代生物医学进展;2009年11期
4 杜云英;郭秋华;何小维;;毕赤酵母菌高效表达乙肝表面抗原的研究[J];现代生物医学进展;2009年17期
5 周倩;何小维;罗志刚;赵喜红;;重组乙型肝炎病毒e抗原的研究进展[J];中国生物工程杂志;2008年06期
6 于方;;论高校学报的“快讯”栏目[J];学报编辑论丛;2004年00期
7 曹宝华;朱远航;邹冬兰;李朝霞;李林;;乙型肝炎病毒e、c抗原的B细胞表位预测及其表位比较研究[J];中国自然医学杂志;2009年03期
8 洪国强;李朝霞;陈月燕;胡波;李林;;毕赤酵母及大肠埃希菌表达的重组乙型肝炎病毒e抗原在乙型肝炎病毒e抗体检测中的比较分析[J];中华实验和临床感染病杂志(电子版);2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 于方;;论高校学报的“快讯”栏目[A];学报编辑论丛(第十二集)[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 韩刚;抗前列腺癌异种化PSCA融合抗原DNA疫苗实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 俞海洋;黑胸大蠊浓核病毒含磷脂酶A2功能区在大肠杆菌中的表达及活性研究[D];武汉大学;2005年
2 郝立凯;专性自养极端嗜酸性硫杆菌高效表达载体的构建[D];山东大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 黄云英,黄丽敏,黄鹤鸣,黄震华,张薇;三种方法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的比较[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2005年05期
2 赵玉莹;李维娜;;两种方法对乙型肝炎HBc-IgG阳性结果的比较[J];黑龙江医学;2008年06期
3 何亮,邓小昭,刁振宇,周宗安,郑纪山,高健;原核和真核细胞表达HBeAg的应用研究[J];医学研究生学报;2001年03期
4 罗文新,张军,杨海杰,李少伟,谢小燕,逄淑强,李少菁,夏宁邵;一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用[J];生物工程学报;2000年05期
5 李少伟,张军,何志强,葛胜祥,顾颖,林鉴,刘如石,夏宁邵;大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒ORF2片段的聚合现象研究[J];生物工程学报;2002年04期
6 罗文新,陈敏,程通,管宝全,李少伟,李少菁,张军,夏宁邵;橙色荧光蛋白——绿色荧光蛋白GFPxm的改造[J];生物工程学报;2003年01期
7 梁敏坚,洪国强,李朝霞,胡波,许珏,李林;乙型肝炎病毒核心基因在毕赤酵母中的表达及表达产物在乙型肝炎病毒核心抗体检测中的应用评价[J];中华检验医学杂志;2005年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄永茂;游春芳;张馨琢;邓敏;陈枫;钟利;陈庄;;产ESBLs大肠埃希菌氨基糖苷类抗菌药耐药性及修饰酶基因的研究[J];重庆医学;2010年15期
2 王冬国;周铁丽;;质粒介导产AmpC酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌AmpC基因型检测与分析[J];中华医院感染学杂志;2007年07期
3 ;乙型肝炎核心抗原抗体系统的研究[J];上海医学;1978年04期
4 丁建强,徐冉行,马亦林,陈亚岗;PCR快速检测粪便中志贺菌属和侵袭性大肠埃希菌IpaH基因及其临床应用[J];中华微生物学和免疫学杂志;1999年03期
5 刘水渠;;乙肝病毒抗原抗体的若干研究状况[J];浙江临床医学;2006年11期
6 蓝永英;;乙型肝炎e抗原和e抗体临床意义研究近展[J];广西医科大学学报;1983年01期
7 王立清;1991~1996年饮食服务从业人员HBsAg与HBeAg阳性调查(摘要)[J];青岛大学医学院学报;1998年02期
8 周庆申;供血者乙型肝炎核心抗原的抗体[J];国外医学.输血及血液学分册;2000年06期
9 马红霞;马述清;刘玉堂;伞治豪;;大肠埃希菌AcrAB-TolC外排泵表达水平调控机制的研究进展[J];中国抗生素杂志;2008年08期
10 王家平,王苏建,张洪亚,糜祖煌,张晓梅;65株大肠埃希菌耐消毒剂基因检测结果分析[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 袁文;柴同杰;周玉法;苗增民;张红双;秦梅;;猪圈及其周边社区环境大肠埃希菌气溶胶产生及其传播[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
2 石玉祥;张志勇;支龙彬;李存;赵淑会;钟翠红;;唐山地区致鸡肝炎大肠埃希菌分离鉴定及药物筛选试验[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
3 孙公军;李银;刘宇卓;张则斌;马玉玲;张敬峰;李劲松;陈溥言;;含MDV部分gb基因、鸡γ—干扰素基因和EGFP基因表达盒HVT转移质粒载体pTu-gB-chIFN的构建[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
4 陈科帆;冯秀娟;吕晓菊;;70例产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌尿路感染临床分析[A];第十二次全国临床药理学学术会议会议论文集[C];2010年
5 高艳红;岳文;秦立鹏;张鹏;陈琳;裴雪涛;;人Spindlin1基因的功能初探[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
6 张静喆;章学林;高炬;沈平;顾宏刚;马恩伟;蒋红伟;扬欣;郑培永;朱培庭;;胆道动力相关性胃肠激素与肝阴不足证胆石病关系的研究[A];第九届全国中西医结合普通外科学术交流大会暨胆道胰腺疾病新进展学习班论文汇编[C];2005年
7 张维秋;潘渭涓;陈祥;耿士忠;黄金林;潘志明;焦新安;;禽源大肠埃希菌质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因的检测[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
8 陈科帆;冯秀娟;吕晓菊;;70例产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌尿路感染临床分析[A];第8届全国抗菌药物临床药理学术会议暨北京大学临床药理研究所成立三十周年论文集[C];2010年
9 李晓娣;黄象艳;王凯;崔海荣;张京海;;β-葡萄糖醛酸酶直接快速检测尿液中大肠埃希菌[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
10 李良俊;陆叶;陈学好;;莲藕GBSS基因的克隆与表达的初步研究[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 钱铮;健忘是基因在作怪[N];北京日报;2003年
2 记者钱铮;健忘也是基因作怪[N];人民日报;2003年
3 记者 钱铮;健忘原来也是基因作怪[N];新华每日电讯;2003年
4 淑芬;影响智力的基因找到了[N];中国妇女报;2000年
5 广州军区武汉总医院肿瘤科 章必成;话说基因[N];家庭医生报;2003年
6 张小军;美科学家破译长寿的基因秘密[N];农民日报;2002年
7 记者 李斌;科学家呼吁加强“基因”科普[N];人民日报;2000年
8 ;哪些病与基因有关[N];市场报;2000年
9 梁惠元;达安基因昨成功上市[N];深圳商报;2004年
10 记者 毛磊;基因巨头不再迷基因[N];新华每日电讯;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张志坚;河南地区大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的研究[D];郑州大学;2010年
2 曹颖;双黄连及清开灵对产ESBLs大肠埃希菌抑菌作用的研究[D];北京中医药大学;2011年
3 姜国勇;番茄Tm-2~2基因在烟草中的表达及其编码蛋白特异氨基酸决定对病毒的抗性[D];福建农林大学;2003年
4 郑铃;致肾盂肾炎大肠埃希菌粘附素基因papG的克隆表达及其免疫保护作用的初步研究[D];天津医科大学;2003年
5 袁绍辉;重组BMP-4/7融合基因及其表达蛋白对骨髓基质干细胞生物学行为的影响[D];吉林大学;2005年
6 李渊;痰热清注射液对产ESBLs大肠埃希菌耐药性影响的研究[D];北京中医药大学;2011年
7 闾军;HPO-205与EDAG基因的克隆与功能研究[D];浙江大学;2002年
8 卫功宏;组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin诱导增强人γ-珠蛋白基因表达的分子机制研究[D];中国协和医科大学;2006年
9 隋正红;龙须菜藻红蛋白基因的研究[D];中国海洋大学;2001年
10 徐睿;解偶联蛋白2基因多态性与日本人肥胖的关系[D];第四军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵宝;陕西省致仔猪腹泻大肠埃希菌的血清型、耐药性及质粒谱型研究[D];西北农林科技大学;2010年
2 孔海深;致泻大肠埃希菌的分子分型和流行病学研究[D];浙江大学;2011年
3 陈勇;猪β_2肾上腺素能受体基因的扩增、克隆与表达[D];南京农业大学;2000年
4 耿霞;源于首饰设计的设计DNA探讨[D];合肥工业大学;2008年
5 李晓宁;鸡褪黑激素受体基因的多态性及其在不同组织中表达量的研究[D];山东农业大学;2011年
6 张二芹;禽脑脊髓炎病毒Van Roekel株Vp0、Vp1、Vp3蛋白基因的克隆、表达与活性检测[D];内蒙古农业大学;2003年
7 黄成林;白细胞介素-1αC-889T基因多态性与冠心病关系的初步研究[D];浙江大学;2005年
8 黄玉国;hTGF-β1基因在体转染兔退变腰椎间盘髓核细胞的实验研究[D];河北医科大学;2005年
9 张宝林;一个常染色体显性遗传非综合征型耳聋家系临床分析[D];吉林大学;2005年
10 王智勇;P73在乳腺癌中的表达及其与ER、PR的关系[D];吉林大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026