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《中国卫生检验杂志》 2009年09期
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单增李斯特菌LAMP方法的建立

严剑波  王虹玲  朱水荣  梅玲玲  
【摘要】:目的:探索建立一种能应用于单增李斯特菌检测与鉴定的LAMP方法,以适合在基层实验室开展应用。方法:针对单增李斯特菌invA基因靶序列,设计5条特异性LAMP引物,建立LAMP反应条件与体系。结果:整个检测过程仅需1.5 h,可通过肉眼目测或电泳检测判断结果,对5株单增李斯特菌和英诺克李斯特菌等共23株其它实验株的invA基因进行检测,结果显示该方法有良好的特异性;检测限试验显示敏感性稍差但不影响对单增李斯特菌分离疑似菌株鉴定及疑似食品污染物的批量检测。结论:本研究建立的LAMP方法能够快速、特异地检测单增李斯特菌;简单经济,不需要其他辅助仪器,结果即可直观判断;适合基层实验室、应急检测或现场监测等使用,具有较高的推广价值。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 蒋亚男;满朝新;赵凤;刘颖;薛玉清;胡惠秩;李博;姜毓君;;环介导恒温扩增方法快速检测乳中单增李斯特菌[J];中国乳品工业;2011年04期
2 蒋亚男;满朝新;赵凤;刘颖;薛玉清;胡惠秩;李博;姜毓君;;PMA-LAMP检测单增李斯特活菌方法的建立[J];食品工业科技;2011年07期
3 荣蓉;张丽芳;李雨函;佟巍;刘先菊;王艳蓉;向志光;刘云波;;实验动物金黄色葡萄球菌LAMP检测方法的建立[J];中国比较医学杂志;2012年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 叶宇鑫;沙门氏菌分子生物学快速检测方法研究[D];华南理工大学;2011年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 周晓辉,焦新安;产单核细胞李斯特菌的分子鉴定与亚分型研究[J];中国人兽共患病杂志;2003年05期
2 梅玲玲;程苏云;朱敏;王赞信;;2000~2004年浙江省食品中产单核李斯特菌污染状况调查[J];中国卫生检验杂志;2006年07期
3 王红;林玲;崔敏莉;陈燕梅;许烈英;何晓冬;张正东;;2005~2007年自贡市食源性疾病病原菌污染状况调查[J];中国卫生检验杂志;2008年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 刘秀峰;江建真;林萍;;单核细胞增生李斯特菌研究进展[J];海峡预防医学杂志;2010年05期
3 周晓辉,焦新安,邓云飞,巢国祥,殷月兰,唐丽华,谈娟;应用PCR快速检测单核细胞增生症李斯特菌的研究[J];扬州大学学报;2003年03期
4 王福;;单核细胞增生李斯特菌研究进展[J];口岸卫生控制;2011年05期
5 马学平;李丽;秦迎旭;高建炜;田涛;;人源细粒棘球蚴的RAPD分析体系建立[J];宁夏医学杂志;2010年03期
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7 王丽丽;赵瑜;唐慧林;何艳玲;林松;;食品中单增李斯特菌PCR-NALF检测方法[J];食品与发酵工业;2011年11期
8 蒋亚男;满朝新;赵凤;刘颖;薛玉清;胡惠秩;李博;姜毓君;;PMA-LAMP检测单增李斯特活菌方法的建立[J];食品工业科技;2011年07期
9 张辉;王兴龙;;食品中单核细胞增生性李斯特氏菌PCR快速检测[J];食品科学;2008年04期
10 吕添;武海涛;曹正茂;王小红;;单核细胞增多性李斯特菌iap基因的克隆、表达与p60蛋白的纯化[J];食品科学;2010年11期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 蒋建军;缺失inlC2突变株增强单核细胞增多症李斯特菌对上皮细胞的内化作用的研究[D];石河子大学;2011年
2 张辉;单增李斯特菌ActA的表达、免疫原性及胶体金试纸研制[D];吉林大学;2008年
3 龙飞;基于活菌内标的单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR方法的建立[D];华中农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 冯晓慧;单增李斯特菌在肉牛屠宰过程中的流行特点及其热失活模型的建立[D];山东农业大学;2011年
2 徐金亭;免疫磁珠的制备及其富集、分离单增李斯特菌的研究[D];暨南大学;2011年
3 李欣华;食源性单核增生性李斯特氏菌毒力基因分布及致病力的研究[D];河北农业大学;2012年
4 周晓辉;产单核细胞李斯特菌的快速检测与分子亚分型研究[D];扬州大学;2004年
5 任艳红;单核细胞增生性李斯特氏菌溶血素基因的克隆与原核表达[D];东北农业大学;2004年
6 邹运明;重组李氏溶血素的纯化及阻断ELISA检测病原的初步探索[D];东北农业大学;2005年
7 王禹;产单核细胞李斯特菌iap基因的克隆、表达及致病性李斯特菌的快速检测[D];扬州大学;2007年
8 熊国华;单增李斯特菌及溶血素O与葡萄球菌三种肠毒素免疫胶体金检测技术研究[D];沈阳农业大学;2007年
9 张亚爽;LAMP和PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌的研究[D];河北农业大学;2008年
10 靳晓燕;食源性单核增生性李斯特氏菌分布及其内化素基因亚型分类研究[D];河北农业大学;2008年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡广超;陈丽颖;王艳玲;耿娟;付彦峰;;荧光原位杂交技术及其研究现状[J];安徽农业科学;2007年02期
2 张景彬;;论食品中沙门氏菌的检测方法[J];成才之路;2007年06期
3 彭丽娟;周勇;杨瑜;惠长野;赵卫;万成松;;肠出血性大肠杆菌O157P:H7紧密黏附素的基因克隆、表达及功能研究[J];南方医科大学学报;2009年04期
4 孔繁德;陈琼;彭海滨;陆承平;;斑点免疫金渗滤法检测沙门菌的研究与应用[J];中国国境卫生检疫杂志;2006年04期
5 蔡哲钧;冯杰雄;朱圣禾;;核酸环介导等温扩增技术[J];国际检验医学杂志;2006年12期
6 焦新安;;沙门菌分类学进展[J];国外医学(微生物学分册);1999年01期
7 孙园园;赵鹏;刘骏;王富海;钱科;朱金连;;沙门氏菌检测方法研究进展[J];中国畜牧兽医;2011年01期
8 刘芳;王丽;李琳;山崎伸二;石磊;;环介导等温核酸扩增技术快速检测产毒亚历山大藻[J];现代食品科技;2007年11期
9 朱胜梅;吴佳佳;徐驰;屈炯;成炜;陈福生;;环介导等温扩增技术快速检测沙门菌[J];现代食品科技;2008年07期
10 鲁曦;师宝忠;王彬;石磊;;LAMP法检测乳粉中的阪崎肠杆菌[J];现代食品科技;2010年05期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 周晓辉,焦新安;单核细胞增生症李斯特菌的分子亚分型法及其应用[J];动物医学进展;2003年03期
2 陈敏,王颖;上海市食品中李斯特氏菌污染情况调查[J];上海预防医学杂志;2001年03期
3 张秀丽,廖兴广,王想霞,孙桂军,李强,韩晓声,章松,李岩;河南省食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染状况的调查[J];中国公共卫生;1998年10期
4 周晓辉,焦新安;李斯特菌细胞溶解素在疫苗研制中的应用[J];中华微生物学和免疫学杂志;2003年05期
5 魏建忠;李郁;焦新安;王桂军;李春芬;黄金林;;应用PCR技术快速检测市售猪肉中产单核李斯特菌[J];中国卫生检验杂志;2006年04期
6 梅玲玲;程苏云;朱敏;王赞信;;2000~2004年浙江省食品中产单核李斯特菌污染状况调查[J];中国卫生检验杂志;2006年07期
7 张秀丽;廖兴广;张丁;胡巅;高葆真;炊慧霞;张广伟;王万海;;2005年河南省食源性致病菌和耐药性监测[J];中国卫生检验杂志;2006年07期
8 丁秀萍;秦树民;代静林;冯艳洁;刘兰吉;袁玉荣;;2005~2006年秦皇岛市食源性疾病病原菌污染状况调查[J];中国卫生检验杂志;2007年06期
9 李小春;;近5年来温州市食品中食源性致病菌主动监测[J];中国卫生检验杂志;2007年10期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 蒋亚男;满朝新;赵凤;刘颖;薛玉清;胡惠秩;李博;姜毓君;;环介导恒温扩增方法快速检测乳中单增李斯特菌[J];中国乳品工业;2011年04期
2 赵贵明,何艳玲,边凌淳,刘沛;李斯特氏菌选择性培养基改良实验[J];中国公共卫生;2004年08期
3 孙晞,吴建中,张宁,欧仕益,唐书泽;荧光实时定量PCR检测单核李斯特菌方法学建立及应用[J];实用预防医学;2005年03期
4 朱振华;王双桂;;基于特异性噬菌体引物PCR检测水产品中单增李斯特菌方法的初步研究[J];检验检疫科学;2007年S1期
5 郑华英;江元山;吕均;熊燕;龙一兵;曾莹春;;单增李斯特菌食品分离株多重PCR鉴定与分型[J];中国公共卫生;2009年03期
6 王艳;赵爱兰;叶长芸;;荧光定量PCR技术用于模拟临床标本单增李斯特菌检测的研究[J];中国人兽共患病学报;2009年06期
7 荆红波;杨杰;张彦春;;2009年顺义区食品中单增李斯特菌污染及耐药状况调查[J];中国卫生检验杂志;2010年07期
8 金萍;叶艳华;王炜;;南京市食品中单核细胞增生李斯特菌的污染情况分析[J];中国生物制品学杂志;2010年10期
9 冯家望;吴小伦;王小玉;李丹琳;陈静静;唐食明;游淑珠;;多重-巢式PCR检测食品中单增李斯特菌研究[J];中国国境卫生检疫杂志;2007年01期
10 吴瑞英;黄宝明;梁均和;;单增李斯特菌选择性增菌培养分离的初步探讨[J];中国卫生检验杂志;2007年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 龙轶;周小明;邢达;;基于磁珠分离和超分支滚环扩增的单增李斯特菌电化学发光检测[A];第七届全国光生物学学术会议论文摘要集[C];2010年
2 范晴;谢芝勋;刘加波;庞耀珊;邓显文;谢志勤;谢丽基;彭宜;;牛病毒性腹泻病毒LAMP检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
3 范芸;胡云建;艾效曼;宁尚勇;程玮;李江涛;常乃柏;;一起血液病区单增李斯特菌病的爆发并文献复习[A];第十届全国化疗药理暨抗感染药理高峰论坛资料汇编[C];2010年
4 斯国静;俞骅;刘涛;胡俊;;单核细胞增生李斯特菌在市售食品中污染现状分析[A];2011年浙江省医学会医学病毒学分会、医学微生物与免疫学分会学术年会论文汇编[C];2011年
5 马保华;吕平;林日兰;陈锋;劳春霞;;使用Reveal试剂盒快速检测单增李斯特菌的初步研究[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
6 陈洵;杜正平;谭慧媚;韩长磊;常晓斌;曹以诚;;LAMP基因快速检测技术在微生物检测中的应用[A];微生物实用技术生态环境应用学术研讨会论文集[C];2008年
7 郑华英;江元山;吕均;熊燕;龙一兵;曾莹春;;单增李斯特菌食品分离株多重PCR鉴定分型[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
8 王志梅;贾广乐;张映;;牛结核病LAMP检测方法的建立及应用[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
9 李奎;袁媛;李琦;陈江源;陈平;黄璐琦;刘志国;;冬虫夏草的LAMP检测鉴定方法[A];中华中医药学会第十届中药鉴定学术会议暨WHO中药材鉴定方法和技术研讨会论文集[C];2010年
10 孙敏;雷质文;贾俊涛;刘云国;高宏伟;;创伤弧菌LAMP检测方法的建立6[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 胡敏/编译;开放代码软件稳步发展[N];电脑商报;2004年
2 记者 王建高 通讯员 杨照孟庆文;即墨为产学研搭建平台[N];科技日报;2005年
3 ;胚胎工厂化生产和移植技术[N];科技日报;2004年
4 浙江 陈士凡;投影机使用十注意[N];中国电脑教育报;2001年
5 新疆 赵振强;投影机的维护及简易故障排除[N];电子报;2001年
6 江苏 周坚;利用DSB仿真型单片机实验板实现键控流水灯[N];电子报;2005年
7 陈士凡;用好多媒体教室的几则建议[N];中国电脑教育报;2003年
8 浙江省金华市江滨小学 应双扬;投影机灯泡知识点滴[N];中国电脑教育报;2004年
9 陈士凡;用好投影机的十则建议[N];中国电脑教育报;2002年
10 江西 魏广平;TK378对讲机编程及调整的补充[N];电子报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈健舜;单核细胞增多性李斯特菌分子进化与酸应激功能基因组学研究[D];浙江大学;2010年
2 隋建新;单增李斯特菌鸡卵黄抗体的抑菌性能及其机理研究[D];中国海洋大学;2010年
3 郗远;植物提取物对单增李斯特菌的抑制作用及乳化香肠的品质影响[D];南京农业大学;2011年
4 田静;熟肉制品中单增李斯特菌的风险评估及风险管理措施的研究[D];中国疾病预防控制中心;2010年
5 邓小芸;网状内皮组织增生症病毒LAMP检测方法及感染性分子克隆的建立[D];东北农业大学;2011年
6 蔺国珍;布鲁氏菌病LAMP检测方法的建立及双基因共表达分子疫苗研究[D];中国农业科学院;2012年
7 乔岩梅;炭疽芽孢杆菌特征基因恒温扩增检测方法的研究[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2007年
8 张辉;单增李斯特菌ActA的表达、免疫原性及胶体金试纸研制[D];吉林大学;2008年
9 许静;LAMP检测法用于日本血吸虫病早期诊断及疗效考核的研究[D];苏州大学;2011年
10 朱庆平;赖型钩端螺旋体致病相关基因invA的克隆、表达及其功能研究[D];四川大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王小丽;环介导等温扩增(LAMP)技术检测猪肉中单核增生性李斯特氏菌的研究[D];河北农业大学;2010年
2 冯晓慧;单增李斯特菌在肉牛屠宰过程中的流行特点及其热失活模型的建立[D];山东农业大学;2011年
3 田媛;抗单增李斯特菌单克隆抗体制备方法的研究[D];河北农业大学;2011年
4 徐金亭;免疫磁珠的制备及其富集、分离单增李斯特菌的研究[D];暨南大学;2011年
5 林婷婷;单增李斯特菌溶血素基因的原核表达及其单克隆抗体的制备[D];暨南大学;2011年
6 何勇琴;单核细胞增生性李斯特菌特异性抗体的制备研究[D];上海海洋大学;2011年
7 苗晓莉;单核增生李斯特菌对于宿主抗病毒能力的影响[D];中国科学技术大学;2011年
8 路彦霞;茎环型引物—环介导等温扩增技术检测奶粉中单增李斯特菌的研究[D];河北农业大学;2012年
9 刘园园;沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌的同步快速检测方法的研究[D];华南理工大学;2010年
10 陈钢;单增李斯特菌酶联免疫吸附法的研究[D];南昌大学;2010年
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