稻瘟病菌—假定几丁质酶多克隆抗体的制备及其检测

【摘要】：为检测几丁质酶的表达,制备稻瘟病菌的一假定几丁质酶多克隆抗体,探索其可能运用。将稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)几丁质酶基因克隆入融合表达载体pET-32a,并在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行诱导表达。表达菌株经0.5 mmol/L IPTG诱导4~6 h后,用Ni~(2+)-NTA亲和柱纯化蛋白,得到可溶的几丁质酶-His融合蛋白。以该融合蛋白免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体。ELISA分析表明该抗体效价达1:204.800,特异性良好。用该抗体ELISA检测了稻瘟病菌4个不同田间菌株中,不同的菌株表达量不同。对稻瘟病菌侵染水稻3、5和7d后的病叶进行抗原Western验证,结果表明,稻瘟病菌不同的侵染时间其几丁质酶表达量有明显差异。几丁质酶表达的差异是否与菌株间致病型等生物学和生理学差异有关,目前正在进一步研究。

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前20条

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8	杨静,何霞红,王云月,李作森,朱有勇;水稻遗传多样性田间稻瘟病菌生理小种研究[J];植物病理学报;2004年05期
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前10条

1	何月秋;唐文华;HeiLeungRobertS.Zeigler;;稻瘟病菌致病突变株的分离[A];中国植病学会西南联合学术年会论文集[C];2000年
2	彭友良;杨俊;王维香;赵晓燕;许金荣;王大伟;孙静;;RNA剪切体组分作为稻瘟病菌的一类新致病因子[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
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10	郑小波;张正光;;稻瘟病菌无性重组研究[A];中国植病学会西南联合学术年会论文集[C];2000年

中国博士学位论文全文数据库

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1	靳西彪;海洋中稻瘟病拮抗菌的分离、发酵优化及其活性成分分析[D];四川农业大学;2012年
2	徐飞;基于结构的对于水稻和稻瘟病菌相互作用所包含蛋白的计算研究[D];浙江大学;2009年
3	Irshad Ali Khan（易尔沙）;稻瘟病菌致病相关基因的克隆与功能分析[D];浙江大学;2012年
4	张海峰;稻瘟病菌G蛋白及MAPK信号途径相关基因的功能分析[D];南京农业大学;2011年
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7	翟焕趁;稻瘟病菌菌株FJ81278无毒基因Avr-Pid2的定位及深度测序分析[D];福建农林大学;2011年
8	贺闽;植物病原真菌与昆虫病原真菌侵染寄主表皮的分子机制研究[D];重庆大学;2012年
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10	林雄杰;稻瘟病菌Rab5互作蛋白研究[D];福建农林大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	姜凯;水稻纹枯病及稻瘟病拮抗菌的分离与抗性成分分析[D];四川农业大学;2010年
2	杨帆;稻瘟病菌Rho2同源蛋白的功能分析[D];福建农林大学;2010年
3	陈春南;稻瘟病菌81278ZB15 BAC克隆子805L15中7个假定分泌蛋白的功能分析[D];福建农林大学;2010年
4	赵玉峰;一株稻瘟病拮抗菌株的筛选、诱变育种及抗菌谱测定[D];河南工业大学;2010年
5	林成增;稻瘟病菌假定几丁质酶基因功能分析[D];福建农林大学;2010年
6	刘小红;利用启动子陷阱技术（Promoter trapping）构建稻瘟病菌（Magnaporthe grisea）突变体库[D];浙江大学;2004年
7	金鑫;稻瘟病生防菌Af1、Af4的初步研究[D];华中农业大学;2010年
8	王红;稻瘟病菌亚甲基四氢叶酸还原酶基因（MoMET13）功能的初步研究[D];浙江大学;2011年
9	刘娟;稻瘟病菌（Magnaporthe grisea）致病相关基因的分子标记及克隆[D];南京农业大学;2003年
10	王宝华;稻瘟病菌交配型鉴定及其有性后代的遗传分析[D];福建农林大学;2001年

中国重要报纸全文数据库

前10条

1	冯国明;近年稻瘟病为何高发[N];湖南科技报;2007年
2	本报记者卢育辉梁少棉;我省攻克稻瘟病世界性难题[N];广东科技报;2006年
3	水清;防治穗颈瘟，水稻破口期用药是关键[N];江苏农业科技报;2008年
4	张尚武;加强水稻病虫害监控[N];湖南日报;2008年
5	杨俊本报记者王欢;“穗颈瘟”为何肆虐万亩稻田[N];四川日报;2005年
6	尚武;加强水稻病虫害监控[N];湖南科技报;2008年
7	何可佳;稻田常用高效低毒低残留农药简介（下）[N];湖南科技报;2006年
8	河北省农林科学院滨海农业研究所孟令启;冀东稻区穗瘟病的预测及防治[N];河北科技报;2006年
9	;保护性稻瘟病防治剂——三环唑[N];四川科技报;2001年
10	涂飞;水稻病害防治[N];四川科技报;2002年

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