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《中国人兽共患病学报》 2018年01期
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藏仔猪致病性大肠杆菌疫苗的制备及效果评价

王保宁  贡嘎  王刚  黄筱均  张璇  强巴央宗  索朗斯珠  
【摘要】:目的为了研究藏猪致病性大肠杆菌疫苗以及评价其免疫保护情况。方法从病死藏猪体内分离致病性大肠杆菌,经生化及分子分型鉴定;用临床菌株经培养离心,收集菌体,灭活后,用生理盐水洗涤后,离心收集菌体,用生理盐水调整细菌浓度作为疫苗原液,佐剂疫苗在疫苗原液中加入重组霍乱毒素B亚单位蛋白,最后在疫苗原液中加入甘露糖,分装后冻干为不同组分的疫苗。用KM小鼠,分口服和肌注2个免疫途径,再按高、低2个剂量的佐剂疫苗和不含佐剂的疫苗结合每个免疫途径分4组,其中高剂量为9.0×10~(10) CFU/ml、低剂量为9.0×10~6 CFU/ml,对照组接种生理盐水,分别于0、14、12、42d免疫后于不同时间检测特异抗体,免疫后用2倍LD50的临床菌株攻击。结果小鼠免疫后,肌注组高剂量含佐剂组与高剂量不含佐剂组免疫效果相当,低剂量含佐剂组比不含佐剂组免疫效果好;口服组无论是高、低剂量含佐剂组免疫效果均好于高、低剂量不含佐剂组,且高剂量免疫效果好于低剂量免疫效果。从免疫次数看,无论是肌注还是口服组免疫4次的抗体水平明显好于免疫1、2、3次的抗体水平。结论藏猪致病性大肠杆菌佐剂疫苗能刺激小鼠产生特异抗体,对临床致病性大肠杆菌攻击具有很好保护性,特别是口服高剂量含佐剂疫苗对致病性大肠杆菌攻击可达到100%保护,这对研究方便、可行的预防藏区仔猪腹泻的新疫苗提供了科学依据。

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