收藏本站
《中国人兽共患病杂志》 2001年05期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

日本血吸虫线粒体相关蛋白基因原核表达产物的纯化

胡雪梅  张兆松  王祝鸣  吴海玮  苏川  季珺  王勇  吴观陵  
【摘要】:目的 建立日本血吸虫线粒体相关蛋白原核表达产物的纯化方法 ,获得理想的表达产物。方法 菌体经冻融、超声破菌及提取包涵体后 ,用分子筛层析纯化蛋白质并使之复性 ,再用Western -blot方法对纯化蛋白的抗原性进行分析。经动物免疫后采用dot-ELISA方法检测兔血清中抗体滴度 ,分析纯化蛋白的抗原活性。结果 经分子筛纯化后的融合蛋白rSj3 3 8/ 2 6GST经SDS -PAGE电泳鉴定达电泳纯 ,Westernblot显示纯化蛋白能够被日本血吸虫重感染兔血清及rSj3 3 8/2 6GST免疫兔血清识别。dot-ELISA法检测结果表明经分子筛纯化并复性的rSj3 3 8/ 2 6GST融合蛋白免疫兔血清中特异性抗体的滴度最高 ,为 1∶5 12 0 0。结论 纯化后的融合蛋白rSj3 3 8/ 2 6GST具有较高的纯度及较强的免疫活性 ,可望作为日本血吸虫病疫苗候选分子进一步深入研究。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 胡雪梅,张兆松,吴海玮,李春林,苏川,季旻,王勇,朱翔,吴观陵;日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白rSj338的免疫细胞化学定位[J];中国人兽共患病杂志;2002年05期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 吴雨霞;口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因在原核和真核细胞中的表达[D];甘肃农业大学;2003年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 朱迎春,王琰,高荣凯,刘群英,化冰,陈宇萍;大肠杆菌表达的单链抗体柱复性的研究[J];生物化学与生物物理进展;1999年02期
2 崔立斌,马清钧;新生肽链的折叠与重组蛋白可溶性表达[J];生物工程进展;1998年01期
3 胡雪梅,吴海玮,张兆松,苏川,赵巍,沈蕾,王荣芝,马磊,周吉礼,陈淑贞,吴观陵;日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2000年04期
4 张伟光,蔡海松,林新坚,刘光明,宋思扬,苏文金;旋毛虫p49抗原基因克隆体外表达条件的研究[J];中国人兽共患病杂志;1998年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陆海,吴薇,曾庆银,李义,蒋湘宁,王沙生;大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白的研究[J];北京林业大学学报;2001年06期
2 郑宝亮;旋毛虫排泄/分泌抗原研究进展[J];动物医学进展;2003年01期
3 马金友;余燕;;免疫学方法在旋毛虫病诊断中的应用[J];贵州农业科学;2007年04期
4 郭晓丽;;大肠杆菌BL21生长状态的研究[J];衡水学院学报;2011年01期
5 包广宇,林道虹,庄敏,隋丽华,王静,李迪,谷鸿喜;HPV16 L1蛋白在原核表达系统中的表达与纯化[J];哈尔滨医科大学学报;2001年04期
6 任道峰,崔晶,王中全;旋毛虫重组抗原的体外表达及其影响因素[J];热带病与寄生虫学;2005年03期
7 李永海,徐燕,席慧,刘凤华,周霞,高音;大肠杆菌NADP特异性谷氨酸脱氢酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达与纯化[J];首都师范大学学报(自然科学版);2005年01期
8 徐燕,李永海,刘凤华,席慧,周霞,高音;大肠杆菌酒石酸脱氢酶β亚基的克隆、表达、纯化及包涵体的复性[J];首都师范大学学报(自然科学版);2005年03期
9 包广宇,谷鸿喜,林道虹,庄敏,隋丽华,王静;原核表达系统中HPV16L1蛋白的表达与纯化[J];生物医学工程学杂志;2002年02期
10 颜冰,黄培堂;脑药物转运载体——抗转铁蛋白受体单链抗体的克隆表达及鉴定[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年03期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 胡雪梅;张兆松;吴海玮;李春林;苏川季;王诗宁;王勇;吴观陵;;日本血吸虫线粒体相关蛋白的表位筛选及其免疫保护性研究[A];中国动物学会第八次全国寄生虫学学术讨论会论文摘要汇编[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 胡雪梅;日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白分子及其抗原表位的克隆和免疫保护作用的研究[D];南京医科大学;2001年
2 李文姝;弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗免疫效果研究及弓形虫ROP2-P30基因工程复合抗原的构建[D];苏州大学;2004年
3 宁铂涛;鼠抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单链抗体的研究[D];浙江大学;2005年
4 熊盛;重组人源抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌和巴氏毕赤酵母中的表达、纯化与性质鉴定[D];华南理工大学;2002年
5 周世水;重组人源抗HBsAg单链抗体—干扰素γ在巴氏毕赤酵母中表达的研究[D];华南理工大学;2003年
6 孙强明;rhuGM-CSF/IL-6融合蛋白的基因构建、表达及生物学活性研究[D];中国协和医科大学;2002年
7 陶科;粘质沙雷氏菌杀虫蛋白的分离纯化及其基因的克隆与表达研究[D];四川大学;2006年
8 谢丽萍;阿霉素的微生物转化及dauU基因的阻断突变研究[D];上海医药工业研究院;2006年
9 何卓;日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及在疫苗研究中的应用[D];中南大学;2008年
10 吴秀萍;旋毛虫不同发育时期抗原基因的筛选与鉴定[D];吉林大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 耿梅;丙戊酸钠对人外周血淋巴细胞功能的影响及人白细胞介素7重组蛋白原核表达载体在大肠杆菌中的表达和鉴定[D];暨南大学;2011年
2 高峰;幽门螺杆菌重组Bb-vacA-hpaA候选疫苗的构建[D];大理学院;2011年
3 邹镇;日本血吸虫23KD膜蛋白的原核表达与纯化及双价膜锚定型和分泌型表达疫苗抗感染效果的比较研究[D];华中科技大学;2009年
4 陈京顺;色氨酸羟化酶-2在大肠杆菌中的表达及其毕赤酵母表达菌株的构建[D];北京化工大学;2011年
5 吕玉金;羊种布鲁氏菌16M优势蛋白抗原的鉴定[D];河南农业大学;2011年
6 吴振龙;副溶血性弧菌直接溶血毒素基因的克隆、突变研究[D];第一军医大学;2000年
7 崔春兰;犬旋毛虫肌幼虫体外培养及其排泄分泌物抗原的制备[D];延边大学;2002年
8 李霆;猪细小病毒VP_2蛋白主要抗原域的原核表达与表达产物纯化[D];南京农业大学;2002年
9 姜骞;猪传染性胃肠炎检测试剂的研制及快速诊断方法的研究[D];东北农业大学;2003年
10 多海刚;禽流感病毒H7N?血凝素(HA1)基因在大肠杆菌中的表达与纯化[D];新疆农业大学;2003年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨志军,林焱,李光金,严维耀,徐泉兴,尤永进,郑兆鑫;含T细胞表位和B细胞表位的抗O型FMDV基因工程疫苗诱导豚鼠产生免疫反应[J];复旦学报(自然科学版);2000年05期
2 唐以杰,陈清池;利用大肠杆菌获取重组蛋白的研究进展[J];广东教育学院学报;2001年02期
3 陈金山;张树庸;;基因工程药物[J];科学;2000年06期
4 张永忠;转基因动物的应用与展望[J];山东师大学报(自然科学版);2001年01期
5 蔡志强,徐步进;转基因植物作为生物反应器生产口蹄疫疫苗的研究进展[J];生物工程进展;2001年04期
6 龙建银,王会信,刘莉,王芳,周廷冲;人转化生长因子β1在大肠杆菌中的分泌表达[J];中国生物化学与分子生物学报;1999年02期
7 杨喆,李太华,徐维明;大肠杆菌中外源基因表达的研究进展[J];微生物学免疫学进展;2000年02期
8 胡雪梅,张兆松,苏川,吴海玮,赵巍,季旻珺,吴观陵;日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白对小鼠免疫保护性的初步研究[J];中国血吸虫病防治杂志;2001年04期
9 杨玲,于孟学,尹宏恩,林嘉友,高杨,何夏秀;异质性胞核核糖核蛋白A2基因的克隆、表达、纯化及其临床应用[J];中华微生物学和免疫学杂志;2002年02期
10 江家婉,钟慈声,齐玲,俞永富;曼氏血吸虫表膜两型转糖蛋白在日本血吸虫表膜的免疫细胞化学定位[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;1999年04期
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 李娜;张保平;;鸡IFN-γ表达载体的构建[J];安徽农业科学;2011年23期
2 唐贵文;陈艳;蒋红涛;;电子显微镜技术在寄生虫学领域中的应用[J];贵州医药;2010年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王新军;日本血吸虫抗原T细胞表位的筛选与鉴定[D];南京医科大学;2004年
2 龚国华;口蹄疫O型、A型鸡胚化活疫苗毒株VP1基因的克隆与序列分析[D];新疆农业大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 阎玉河,许威光,陈辉,马增全,朱元晓,蔡仕英;旋毛虫肌幼虫ES抗原的基因克隆及高效表达[J];生物工程学报;1994年01期
2 吴海玮,王荣芝,陈淑贞,苏川,张兆松,吴观陵;日本血吸虫再感染相关基因克隆的筛选与鉴定[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;1998年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郎春鹏;谭晓红;;日本血吸虫26kDa谷胱苷肽-S-转移酶抗血清的制备[J];中国热带医学;2006年12期
2 胡雪梅,张兆松,吴海玮,苏川,赵巍,马磊,周吉礼,吴观陵;日本血吸虫线粒体相关蛋白的特性及抗原表位的分析[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2001年01期
3 胡雪梅,张兆松,吴海玮,李春林,苏川,季旻,王勇,朱翔,吴观陵;日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白rSj338的免疫细胞化学定位[J];中国人兽共患病杂志;2002年05期
4 吕刚;胡旭初;黄灿;李艳文;徐劲;吴忠道;余新炳;;日本血吸虫乳酸脱氢酶原核表达、纯化及鉴定[J];中国公共卫生;2007年10期
5 胡雪梅,吴海玮,张兆松,苏川,赵巍,沈蕾,王荣芝,马磊,周吉礼,陈淑贞,吴观陵;日本血吸虫线粒体相关蛋白的基因克隆及特性鉴定[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2000年04期
6 胡雪梅,张兆松,苏川,吴海玮,赵巍,季旻珺,吴观陵;日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白对小鼠免疫保护性的初步研究[J];中国血吸虫病防治杂志;2001年04期
7 李春玲,胡雪梅,张兆松,季旻珺,苏川,吴海玮;日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关的重组融合蛋白(rSj338/26GST)的免疫原性鉴定[J];中国血吸虫病防治杂志;2002年03期
8 袁仕善,易新元,曾宪芳,黄跃龙,张顺,Larry McReynolds;日本血吸虫成虫组分抗原的分离及小鼠免疫试验[J];中国人兽共患病杂志;2003年05期
9 刘兰英,余新炳,罗树红;快速分离和纯化感染6wk兔肝组织中的日本血吸虫虫卵[J];中国血吸虫病防治杂志;1997年02期
10 周晓红,陈晓光,冯明钊,戴泗维,李华,沈树满,徐莉,刘国章;日本血吸虫可溶性虫卵抗原38kDa分子的纯化及诊断价值的初步评估[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2000年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 胡雪梅;张兆松;吴海玮;李春林;苏川季;王诗宁;王勇;吴观陵;;日本血吸虫线粒体相关蛋白的表位筛选及其免疫保护性研究[A];中国动物学会第八次全国寄生虫学学术讨论会论文摘要汇编[C];2001年
2 王欣之;矫矫;石耀军;冯新港;苑纯秀;金亚美;;日本血吸虫7d童虫消减cDNA文库的构建及测序分析[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
3 苏斌涛;刘文琪;;日本血吸虫感染小鼠体内IL-17的动态变化研究[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
4 付媛;张雪娟;卢福庄;石团员;;日本血吸虫融合蛋白2LHD-Sj23原核表达载体的构建和表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
5 张艳丽;赵犇鹏;李莹;杨健美;苑纯秀;冯新港;;日本血吸虫鞘脂激活蛋白原T细胞免疫原性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
6 陈启军;郝力力;蔡鹏飞;;日本血吸虫小RNA(snRNA)转录组研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
7 易新元;曾宪芳;蔡春;张冉;陈欲晓;曾宪忠;田明礼;;日本血吸虫DNA疫苗的研究[A];中国动物学会全国第九次寄生虫学学术讨论会论文摘要集[C];2003年
8 姜宁;武闯;陈启军;;日本血吸虫23kDa膜蛋白(Sj23)与人免疫球蛋白的相互作用分析[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
9 戴洋;朱荫昌;王晓婷;唐建霞;赵松;;日本血吸虫核酸疫苗体内电穿孔法的进一步研究[A];2011新型疫苗与抗体创制关键技术及质量控制研讨会论文集[C];2011年
10 张旻;韩艳辉;朱珠;李东;洪炀;吴秀娟;傅志强;林矫矫;;日本血吸虫体被表膜蛋白磷酸二酯酶-5(NPP-5)基因的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 季英德;吕志国;纯化火车站悄悄改民营 [N];中国商报;2002年
2 记者 耿挺;解开血吸虫生存秘密[N];上海科技报;2006年
3 刘志国;委员又谈瘟神事[N];人民政协报;2006年
4 记者 任荃;解读血吸虫“生命密码”[N];文汇报;2006年
5 记者 曹玲娟;1300多个血吸虫特有基因被找到[N];人民日报;2006年
6 记者 曹玲娟;我科学家公布日本血吸虫“基因天书”[N];人民日报;2006年
7 冯立中;告别耕牛[N];健康报;2006年
8 高祥森;民间资本搭上火车[N];经理日报;2002年
9 本报记者 王璐;“送瘟神”任重道远[N];保健时报;2008年
10 李天舒;气候变暖可加剧血吸虫病传播[N];健康报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 胡雪梅;日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白分子及其抗原表位的克隆和免疫保护作用的研究[D];南京医科大学;2001年
2 李强;放射状土壤杆菌M-503产生物絮凝剂的制备、纯化及应用研究[D];山东大学;2005年
3 徐境羚;马鹿精子膜蛋白纯化与理化性质分析[D];东北林业大学;2007年
4 马翠丽;天花粉蛋白新有效组分的纯化、一级结构及免疫调节和抗肿瘤活性研究[D];吉林大学;2008年
5 王敏炜;碳纳米管的制备及负载非晶态NiB合金的催化性能的研究[D];华南理工大学;2003年
6 陈静;嗜热毛壳菌热稳定糖化酶纯化及其编码基因的克隆与表达[D];山东农业大学;2006年
7 朱洁;乳酸链球菌素耐药菌株的筛选和耐药机理研究[D];浙江大学;2009年
8 于金刚;碳纳米管的化学修饰及对甲磺酸帕珠沙星的缓释研究[D];中南大学;2008年
9 惠明;枯草芽孢杆菌B53的分离鉴定及产聚γ-谷氨酸的研究[D];中国农业大学;2005年
10 胡志明;血管内皮细胞生长因子的制备及其治疗股骨头坏死的实验研究[D];第一军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗秀菊;日本血吸虫重组亚单位疫苗的研究[D];中南大学;2003年
2 何谐;日本血吸虫与斯氏狸殖吸虫的遗传特征和特异性免疫诊断抗原研究[D];第三军医大学;2010年
3 武闯;日本血吸虫23kDa膜蛋白与人免疫球蛋白的相互作用分析[D];吉林大学;2011年
4 贾侃;基于功能基因组学数据的日本血吸虫候选疫苗分子的预测及初步鉴定[D];上海师范大学;2010年
5 邹镇;日本血吸虫23KD膜蛋白的原核表达与纯化及双价膜锚定型和分泌型表达疫苗抗感染效果的比较研究[D];华中科技大学;2009年
6 张鹏;日本血吸虫Tsunagi样蛋白编码基因功能的鉴定[D];安徽医科大学;2010年
7 王素娟;日本血吸虫SJCHGC06868蛋白的研究[D];中国农业科学院;2010年
8 杨巧林;药物(PZQ)压力下日本血吸虫的耐药性诱导及抗血吸虫新药的筛选[D];苏州大学;2010年
9 刘亚平;日本血吸虫感染小鼠肝星状细胞的功能研究[D];南京医科大学;2010年
10 张艳丽;日本血吸虫鞘脂激活蛋白原T细胞免疫原性及功能研究[D];中国农业科学院;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026