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《中国农业科学》 1998年03期
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苏云金芽孢杆菌cry基因PCR-RFLP鉴定体系的建立

宋福平  张杰  谢天健  杨自文  戴莲韵  李国勋  
【摘要】:根据苏云金芽孢杆菌(Bt)cry2、cry3和cry4/cry10型基因的保守区分别设计了3对通用引物S5un2/S3un2、S5un3/S3un3和S5un4/S3un4。PCR扩增产生约1.2kb、1.4kb和1.5kb的产物,然后分别用HincI/MspI、BglI/PstI和BstEI/DraI酶切,并经RFLP分析鉴定Bt菌株的cry基因型。利用该方法对含已知cry2、cry3和cry4/cry10型基因的Bt菌株和遗传工程菌进行基因分析,得到的结果与预测的RFLP相符,证明该方法可行。在此基础上对14株Bt分离株的基因型进行了鉴定,其中有9株分离株含cry2型基因;仅菌株Bt22含cry3型基因;所有被测菌株均不含cry4/cry10型基因。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 苏旭东;檀建新;张伟;林扬;;苏云金芽孢杆菌的分离与鉴定[J];安徽农业科学;2006年19期
2 郑琦;唐玉明;关雄;;苏云金芽胞杆菌cry基因研究进展[J];安徽农业科学;2012年22期
3 于亚军;夏新莉;尹伟伦;;果树抗虫基因工程研究进展[J];北方园艺;2008年07期
4 李先军;李强;杜超;王树艳;;Bt野生菌Q1杀虫晶体蛋白及基因型分析[J];承德医学院学报;2011年02期
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6 郭丽伟;苏俊平;宋萍;张冬冬;王勤英;;一株对蚊子幼虫高效的Bt新菌株的特性研究[J];河北农业大学学报;2011年05期
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8 李先军;高继国;齐东来;李一丹;康立功;李海涛;;十株Bt野生菌杀虫晶体蛋白及基因型分析[J];东北农业大学学报;2009年09期
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宋萍;苏云金芽胞杆菌分离鉴定及对马铃薯二十八星瓢虫特异活性菌株研究[D];河北农业大学;2012年
2 周思军;大豆抗虫基因转移及其转化系统优化研究[D];东北农业大学;2000年
3 张杰;对鞘翅目害虫高毒力的Bt cry基因分离克隆和工程菌的构建[D];中国农业科学院;2000年
4 李长友;对鳞翅目害虫高毒力Bt菌株B-Hm-16和B-Pr-88的分子生物学研究[D];东北农业大学;2001年
5 宋福平;苏云金芽孢杆菌特殊异性cry基因的研究[D];东北农业大学;2001年
6 姚江;高效广谱苏云金芽孢杆菌Ly30株的分子生物学研究[D];中国农业科学院;2002年
7 陈中义;多功能质粒载体与组合Bt杀虫蛋白基因工程菌研究[D];中国农业科学院;2002年
8 戴小枫;中国植物保护科学技术发展战略研究[D];中国农业科学院;2003年
9 郑爱萍;微生物来源的防病、杀虫相关因子的分离与功能解析研究[D];四川农业大学;2004年
10 黄建安;茶树分子遗传图谱构建及多酚氧化酶基因的SNP研究[D];湖南农业大学;2004年
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1 冯静静;苏云金杆菌cry7Ab8基因的克隆表达及工程菌构建[D];河北农业大学;2011年
2 毛云莹;成都平原农田土壤芽孢杆菌的分离鉴定及三株Bt菌的生物特性和毒力研究[D];四川农业大学;2011年
3 何晓明;苏云金芽胞杆菌新型vip3基因克隆、表达及活性分析[D];东北农业大学;2011年
4 王一喆;小菜蛾高毒力苏云金芽胞杆菌的筛选与分子特性研究[D];华中农业大学;2011年
5 茅洁瑜;对鞘翅目害虫具有活性的新型cry基因的研究[D];华侨大学;2011年
6 黄凯;转录调控因子CodY在苏云金芽胞杆菌中的作用研究[D];华中农业大学;2011年
7 王伟;Bt工程菌HD8Ea2的构建及Cry8Ea2蛋白对华北大黑鳃金龟中肠微生物的影响[D];河北农业大学;2012年
8 葛东华;苏云金芽胞杆菌MB-15菌株特性及其可湿性粉剂的研究[D];河北农业大学;2012年
9 王志鑫;苏云金芽孢杆菌菌株的分离及cry8型基因的克隆[D];河北农业大学;2012年
10 苏俊平;苏云金芽胞杆菌的分离鉴定及高毒力菌株的研究[D];河北农业大学;2012年
【同被引文献】
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4 胡英华;朱庆荣;苏加岱;;二点委夜蛾的发生为害及综合防治对策[J];山东农业科学;2011年11期
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6 戴美学,张红梅,严芝学,李世国,祖爱民;苏云金杆菌SD-5菌株的生物毒力研究[J];山东农业科学;1994年06期
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中国重要报纸全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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5 李长友;对鳞翅目害虫高毒力Bt菌株B-Hm-16和B-Pr-88的分子生物学研究[D];东北农业大学;2001年
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7 姚江;高效广谱苏云金芽孢杆菌Ly30株的分子生物学研究[D];中国农业科学院;2002年
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10 陆秀君;苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因的克隆与表达研究[D];河北农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 秦悦;小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的分子机制研究[D];中国农业科学院;2011年
2 何晓明;苏云金芽胞杆菌新型vip3基因克隆、表达及活性分析[D];东北农业大学;2011年
3 郭巍;苏云金芽孢杆菌cry2Aa基因克隆及表达的研究[D];东北农业大学;2000年
4 郑爱萍;拮抗细菌对水稻纹枯病的生物防治研究[D];四川农业大学;2001年
5 王玲平;黄瓜感染枯萎病菌后生理生化变化及其与抗病性关系的研究[D];山西农业大学;2001年
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8 吴玉娥;苏云金芽孢杆菌Cry1Ie1末端缺失蛋白的研究[D];东北农业大学;2003年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 苏旭东;檀建新;张伟;林扬;;苏云金芽孢杆菌的分离与鉴定[J];安徽农业科学;2006年19期
2 袁祖丽;刘秀敏;李华鑫;孙晓楠;;应用于茶学领域的植物生物技术[J];安徽农业科学;2008年12期
3 许禔森;;苏云金芽孢杆菌cry1Ac15基因的克隆及原核表达[J];安徽农业科学;2008年14期
4 袁成志;高美玲;张艳馥;;Bt基因介导的大豆抗蚜虫表达载体的构建[J];安徽农业科学;2009年23期
5 段永兰;侯金丽;邢文会;;我国微生物农药的研究与展望[J];安徽农业科学;2010年08期
6 王鹤茹;刘燕舞;;Bt生物农药发酵研究进展[J];安徽农业科学;2010年19期
7 林志伟;张海燕;孙冬梅;秦翠红;南大鹏;;黄绿木霉菌菌株产几丁质酶发酵条件的研究[J];安徽农业科学;2011年09期
8 魏吉利;黄诚华;潘雪红;商显坤;王伯辉;黄冬发;;蔗扁蛾幼虫在甘蔗上的生物学特性观察[J];安徽农业科学;2011年11期
9 姜竹;李晶;王玉霞;张云湖;;人参土传病害生防菌株的筛选及抑菌活性研究[J];安徽农业科学;2011年11期
10 池康;秦飞;郝德君;;我国昆虫多样性的环境影响研究进展[J];安徽农业科学;2011年17期
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1 费仁雷;李克斌;肖春;尹姣;曹雅忠;;铜绿丽金龟发生为害特点及防治[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
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3 吴丽云;;蚊媒病防治[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年
4 张永嵘;;微生物资源概述[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年
5 王玉美;华金平;;湖北棉花遗传改良研究现状剖析[A];中国棉花学会2004年年会论文汇编[C];2004年
6 魏建荣;;外来入侵物种——美国白蛾防控策略简析[A];第二届中国林业学术大会——S6 森林昆虫与自然调控论文集[C];2009年
7 李文凭;张健娜;朱西儒;;我国微生物杀虫剂研究与应用的初步分析[A];第三届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第二届全国生物农药研讨会论文集[C];2004年
8 夏立秋;孙运军;;生物农药的发展与苏云金杆菌杀虫剂研究[A];第三届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第二届全国生物农药研讨会论文集[C];2004年
9 黄张敏;;苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的研究进展[A];第四届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会暨第三届生物农药研讨会论文集[C];2006年
10 陈晓辰;宋经元;姚辉;陈士林;韩建萍;;宏基因组学与道地药材研究[A];第十一届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑维列;西藏色季拉山长鞭红景天种群生态学特性研究[D];中南林业科技大学;2010年
2 秦毅;表达苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白Vip3Aal的球孢白僵菌工程菌株的构建及其对斜纹夜蛾幼虫的肠道与体壁侵染力[D];浙江大学;2010年
3 耿丽丽;转Bt cry8Ea1、cry8Ha1基因花生的研究[D];中国农业科学院;2011年
4 张群林;源于地衣的苏云金芽胞杆菌分离及对广州管圆线虫生测和活性因子的研究[D];福建农林大学;2011年
5 宋萍;苏云金芽胞杆菌分离鉴定及对马铃薯二十八星瓢虫特异活性菌株研究[D];河北农业大学;2012年
6 姚江;高效广谱苏云金芽孢杆菌Ly30株的分子生物学研究[D];中国农业科学院;2002年
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1 李君君;高效降解茶粕纤维素菌株的筛选[D];安徽农业大学;2010年
2 刘艳菊;发根农杆菌介导的Bt基因Cry8e转化大豆抗蛴螬研究[D];河南师范大学;2010年
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4 林智敏;杀虫基因cry1Ca的人工合成、原核表达及其转基因水稻的培育[D];福建师范大学;2010年
5 赵丹;苏云金杆菌Enhancin-like蛋白的鉴定及增效作用分析[D];河北农业大学;2011年
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7 张晓;生物综合防治法制研究[D];山东师范大学;2011年
8 李勃;HrpZpsta基因表达载体的构建及在大豆中的遗传转化[D];吉林农业大学;2011年
9 仪登霞;甘蓝转crylIa8和crylBa3双价Bt基因的研究[D];中国农业科学院;2011年
10 苏芙蓉;超市食品中Bt的分离鉴定及安全性分析[D];福建农林大学;2011年
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1 董明;杜立新;王容燕;王金耀;曹伟平;宋健;冯书亮;;一株对鳞翅目害虫高毒力的苏云金芽孢杆菌菌株基因型鉴定及新基因cry2Ah3克隆[J];应用与环境生物学报;2010年06期
2 张群林;林群新;吴小凤;余洁;关雄;;源于地衣的苏云金芽孢杆菌分离及PCR-RFLP分析[J];福建师范大学学报(自然科学版);2009年04期
3 张杰,宋福平,左雅慧,戴莲韵,黄大昉;31株苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因型鉴定及表达产物研究[J];微生物学报;2000年04期
4 王津红,吴卫辉,陈月华,任改新;中国苏云金芽孢杆菌的分布与cry基因的多样性[J];微生物学通报;2001年03期
5 李先军;李强;杜超;王树艳;;Bt野生菌Q1杀虫晶体蛋白及基因型分析[J];承德医学院学报;2011年02期
6 刘汝,闫建平,袁志明;苏云金芽孢杆菌cry1基因的PCR-RFLP鉴定分析[J];华中师范大学学报(自然科学版);2005年01期
7 李凤梅,李平,闫敏,郑爱萍,孙惠青;苏云金芽孢杆菌的筛选和初步鉴定[J];生物技术;2003年06期
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9 高梅影,戴顺英,彭可凡,魏蒂;苏云金杆菌cry 1C基因检测及其与杀虫活性的关系[J];微生物学杂志;2002年05期
10 宋玲莉,高梅影,戴顺英,彭可凡;苏云金芽孢杆菌抗东亚飞蝗(Locusta migratoria manilensis)的活性[J];应用与环境生物学报;2005年05期
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7 涂玉蓉;陈建红;张济培;任涛;牛森;张秋姜;;鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌的PCR-RFLP鉴别[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
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10 张丽;张浩;李拥军;;海门山羊GDF9基因的RFLP分析[A];全国养羊生产与学术研讨会议论文集(2007-2008)[C];2008年
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5 记者 张颖 伊洁;农林大学学生喜获“挑战杯”特等奖[N];福建日报;2005年
6 本报记者  范建;夺回失去的棉花市场[N];科技日报;2006年
7 记者 赵引德;新型高效广谱菌株安全环保经济[N];农资导报;2007年
8 记者 瞿剑;破解Bt棉种植和转基因生物安全世界性难题[N];科技日报;2008年
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10 程志新;高三全一册生物练习题[N];山西科技报;2003年
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6 宋福平;苏云金芽孢杆菌cry1le1和cry8基因的研究[D];中国农业科学院;2003年
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1 张怀江;苏云金芽孢杆菌cry2Ac基因的克隆及其特性的研究[D];河北农业大学;2005年
2 刘旭光;苏云金芽孢杆菌cry基因芯片检测方法的研究及应用[D];中国农业科学院;2004年
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5 薛建丽;苏云金芽孢杆菌CrylAa、CrylC的协同作用和同源重组的研究[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2004年
6 张何;苏云金芽孢杆菌4.0718菌株杀虫晶体蛋白基因的克隆及表达研究[D];湖南师范大学;2003年
7 任莹博;苏云金芽孢杆菌cry基因克隆表达和质粒复制区克隆的研究[D];河北农业大学;2003年
8 陈宇熹;高效杀蚊苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29的发酵优化[D];福建农林大学;2010年
9 谢宇飞;苏云金芽孢杆菌010菌株chi36基因克隆、表达和活性测定[D];福建农林大学;2010年
10 魏蒂;PCR法鉴定苏云金芽孢杆菌菌株的杀虫晶体蛋白基因[D];中国科学院武汉病毒研究所;2001年
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