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《中国农业科学》 2004年11期
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花椰菜单染色体的显微分离和LA-PCR扩增

李金泉  周元昌  吴为人  夏法刚  黄代青  
【摘要】：以花椰菜品种‘闽花60天’根尖为材料,采用微细玻璃针法随机分离了40多条花椰菜的单染色体,并用LA-PCR(linker-adaptorPCR)对分离的单染色体进行了体外扩增,研究了单染色体的Sau3A酶切时间对LA-PCR扩增片段大小的影响。结果表明,通过对单染色体的不完全酶切可以显著提高LA-PCR扩增片段的大小;Dot-blotting验证的结果表明,单染色体的扩增产物确实来自其基因组,但Dot-blotting不能有效地鉴别花椰菜的9条染色体。
【作者单位】： 福建农林大学作物科学学院 福建农林大学作物科学学院 福建农林大学作物科学学院 福建农林大学作物科学学院 福建农林大学园艺学院
【关键词】： 花椰菜 显微分离 LA-PCR SauA酶切时间 Dot-blotting
【基金】：福建省青年科技人才创新资助项目(2001J048)
【分类号】：S635
【正文快照】：
染色体的微分离和体外扩增技术是随着分子生物学的发展、结合了细胞遗传学和分子生物学技术而诞生的一项高新技术。该技术也是细胞遗传学和分子遗传学结合的桥梁。它能够根据研究者的需要分离任意一条染色体或区段,并快速高效地建立相应的DNA文库,进行相关的分子生物学研究。

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 魏秀清;西番莲（Passiflora edulis Sims）染色体微分离与单染色体DNA文库的构建[D];福建农林大学;2007年
2 林珲;花椰菜种质资源形态标记与RAPD标记研究[D];福建农林大学;2007年
3 乔锋;柚单染色体微分离及其AFLP分子标记构建[D];福建农林大学;2007年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 黄代青;果树单染色体及其R基因同源序列的分离与克隆[D];福建农林大学;2002年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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7 于华众,李章平,李上共,吴朝明;血浆MMPs水平与甲状腺乳头状癌浸润转移的关系[J];癌症;2005年06期
8 刁英,陈思,黄雨蝶,周明全,胡中立;蕹菜的DAPI显带核型[J];氨基酸和生物资源;2005年01期
9 雷质文,黄劼,梁艳,刘莉,俞开康;用核酸探针技术检测脊尾白虾体内的白斑综合症病毒[J];安徽农业大学学报;2003年01期
10 徐翮飞,罗兵;HSV-1包膜糖蛋白G原核表达克隆的构建和表达[J];青岛大学医学院学报;2001年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 丁晓东;阎丽波;韩芳;;醋栗、黑穗醋栗及其杂种的核型比较[A];中国园艺学会首届青年学术讨论会论文集[C];1994年
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7 魏兰兰;谷鸿喜;;16型人乳头瘤病毒衣壳蛋白在真核细胞中的表达[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年（1993—2003）论文集[C];2003年
8 周兴;张居农;;蚓激酶重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LK~R的构建及其在奶牛乳腺组织中的表达[A];中国奶牛协会2007年会论文集（上册）[C];2007年
9 魏庆宽;李瑾;傅婷霞;柏雪莲;崔勇;王用斌;张佃波;王洪法;付斌;刘玉冰;宰德福;黄炳成;刘克义;韩广东;;抗弓形虫感染DNA疫苗的研究[A];山东预防医学会第二届学术年会论文汇编[C];2006年
10 杨忠义;曹永生;苏艳;刘晓利;李华惠;卢义宣;;中国栽培稻的籼稻和粳稻分类及方法(综述)[A];云南省作物学会2004—2006年优秀论文选集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈晨;盐生杜氏藻Dscbr基因的光保护功能及机制研究[D];四川大学;2007年
2 齐力旺;华北落叶松体细胞胚胎发生与遗传转化系统建立的研究[D];中国林业科学研究院;2000年
3 王宏田;牙鲆免疫系统和抗病力的研究[D];中国科学院海洋研究所;2000年
4 郑燕芳;抗人乳头瘤病毒16型E6基因核酶对宫颈癌细胞株表型和基因调控的影响[D];第一军医大学;2000年
5 陈烨;幽门螺杆菌粘附素HpaA的克隆、表达及其免疫原性和保护性研究[D];第一军医大学;2000年
6 李大力;蜂毒溶血肽及其前体蛋白cDNA的克隆、定点突变和在大肠杆菌中表达的研究[D];大连理工大学;2000年
7 姚乌兰;多粘类芽孢杆菌WY110抗菌蛋白的制备及其基因克隆和表达[D];中国农业科学院;2000年
8 陈孙孝;白念珠菌钙调蛋白基因(CMD1)缺陷菌株的构建及CMD1功能性基因的初步研究[D];第二军医大学;2001年
9 董书强;腺病毒介导血管内皮生长因子B基因转染慢性缺血心肌血管新生的研究[D];第二军医大学;2001年
10 张晓东;CIC-1氯离子通道亚型的克隆及相关电生理特性的研究[D];第四军医大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 白彦霞;营养相关基因(fdr3和TaNRT1)功能的进一步研究[D];首都师范大学;2000年
2 桑红;新生隐球菌产黑素野生株与白化突变株酚氧化酶结构基因(CNLAC1)的比较研究[D];第二军医大学;2000年
3 吴振龙;副溶血性弧菌直接溶血毒素基因的克隆、突变研究[D];第一军医大学;2000年
4 李红;HOXA10基因在人子宫内膜的表达、调控及其与不孕的关系[D];第一军医大学;2000年
5 陈祎招;p16基因对胶质瘤细胞生长作用的实验研究[D];第一军医大学;2000年
6 朱杰青;促黄体素释放激素在大肠杆菌中的融合表达及抗原性鉴定[D];南京农业大学;2000年
7 向小宇;粪产碱菌西藏分离株的鉴定[D];南京农业大学;2000年
8 侯玉峰;新城疫病毒F48E8株F基因的克隆及其在鸡痘病毒中的表达和免疫效果检测[D];南京农业大学;2000年
9 曹哲民;花菇形成机理的研究[D];南京农业大学;2000年
10 李宏梅;重组鸡白细胞介素-2作为免疫增强剂的研究[D];南京农业大学;2000年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 程晓蕾,郭俊成;烟草根尖细胞分裂同步化实验研究[J];安徽农学通报;1997年03期
2 查向东,施六林;两步法诱导根尖细胞同步分裂[J];安徽农业科学;1997年03期
3 崔丽华,陈正华;2种PCR技术扩增微分离的蚕豆染色体[J];北京师范大学学报(自然科学版);2004年02期
4 肖桂芝，马晓明，莫冀香，刘延华，安海谦;不同低温对大蒜根尖分生区细胞的同步化作用[J];承德医学院学报;1995年02期
5 李珊,赵桂仿;AFLP分子标记及其应用[J];西北植物学报;2003年05期
6 王彦华,侯喜林,徐明宇;正交设计优化不结球白菜ISSR反应体系研究[J];西北植物学报;2004年05期
7 陈华,易干军,徐小彪,曾继吾;猕猴桃AFLP分析体系的建立[J];西北植物学报;2005年08期
8 吴菁华;吕柳新;;水仙单染色体特异文库的构建[J];西北植物学报;2006年02期
9 黄代青,吕柳新,王平;银杏第1染色体DNA文库的构建[J];福建农林大学学报(自然科学版);2002年04期
10 吴菁华,黄代青,吕柳新,张志忠;水仙(Narcissus tazetta L.)单染色体的显微分离[J];福建农林大学学报(自然科学版);2003年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 黄代青;果树单染色体及其R基因同源序列的分离与克隆[D];福建农林大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 孙同毅;番茄种质资源遗传多样性RAPD分析及抗病基因同源类似物RGA分析[D];四川农业大学;2004年
2 孙爱花;橡胶树优良品种指纹图谱的构建[D];华南热带农业大学;2005年
3 吴妍;黄花苜蓿（Medicago Falcata L.）种质资源农艺性状及基因组RAPD研究[D];中国农业科学院;2005年
4 周德银;大豆种质资源遗传多样性的表型和RAPD分析的研究[D];福建农林大学;2005年
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6 雷进生;观赏辣椒种质资源遗传多样性研究[D];华中农业大学;2005年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 成海宏;西藏白菜型油菜的演化研究[D];西藏大学;2008年
【二级参考文献】
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7 宋文芹,崔香芹,许文胜,李秀兰,彭永康,陈瑞阳;蚕豆大M染色体长臂端部的显微切割与PCR扩增[J];科学通报;1996年04期
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9 程祝宽,颜辉煌,党本元,胡赞民,顾铭洪,朱立煌;水稻第5染色体短臂端四体在染色体臂微分离中的应用[J];科学通报;1998年03期
10 王槐,周奕华,党本元,胡赞民,王兰岚,李良材,陈正华;大麦染色体的激光微束切割、片段分离及体外扩增[J];科学通报;1998年07期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 孔凡晶;簇毛麦抗白粉病基因的染色体显微切割及其抗病相关基因克隆的研究[D];中国农业科学院;2001年
【相似文献】
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2 赵传孝;;野黑麦染色体的组型分析[J];四川草原;1982年02期
3 李维明,吴为人,卢浩然;检测作物数量性状基因与遗传标记连锁关系的方差分析法及其应用[J];作物学报;1993年02期
4 王正询，林兆平，潘坤清;蕉类的细胞遗传学研究[J];遗传学报;1994年06期
5 崔丽华,胡赞民,王兰岚,李良材,陈正华;黑麦1R染色体的显微分离与回收[J];Acta Botanica Sinica;1997年08期
6 胡赞民,党本元,周奕华,崔丽华,王兰岚,张铁汉,李良材,陈正华;玉米单染色体的分离和体外扩增[J];遗传学报;1998年06期
7 魏建华，周奕华，孙传清，党本元，胡赞民，王象坤，陈正华;水稻第12染色体微分离及LA-PCR扩增[J];中国农业科学;1998年02期
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10 吕柳新,黄代青;植物染色体微分离微克隆技术研究进展与展望[J];福建农业大学学报;2001年03期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
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2 陈希勇;孙其信;倪中福;;小麦耐热性的染色体定位与耐热性基因的遗传效应分析[A];21世纪小麦遗传育种展望——小麦遗传育种国际学术讨论会文集[C];2001年
3 黄代青;周奕华;石锐;胡赞民;吕柳新;;柚(Citrus grandis Osbeck)单染色体微克隆文库的构建[A];Advances in Chromosome Sciences Volume1[C];2001年
4 赵刚;刘江东;周菲;陈戟;张小艳;余其兴;;中华大蟾蜍染色体标本制备的简便方法[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
5 刘榜;赖健耀;胡赞民;熊统安;余梅;樊斌;李奎;;猪12号当构体的显微切割与微克隆研究[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
6 郭东林;王晓萍;郭长虹;徐淑红;李新玲;徐香玲;李集临;;T aestivum小麦单染色体显微分离及微克隆的研究[A];中国遗传学会七届一次青年研讨会暨上海高校模式生物E——研究院第一届模式生物学术研讨会论文汇编[C];2005年
7 张勇;杨足君;冯娟;任正隆;宋文芹;;杨树1号染色体文库构建及其在抗病基因分离中的应用研究[A];中国遗传学会功能基因组学研讨会论文集[C];2006年
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1 本报记者 潘锋;学科交叉为植物染色体工程注入新活力[N];科学时报;2009年
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2 黄代青;果树单染色体及其R基因同源序列的分离与克隆[D];福建农林大学;2002年
3 王骁力;计算生物学中的组合优化问题的研究[D];山东大学;2005年
4 陈汀;计算生物学中若干组合优化问题的研究[D];浙江大学;2006年
5 徐进;杉木分子细胞遗传学研究[D];南京林业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前9条
1 张发云;小麦1B单染色体DNA文库的构建及其鉴定[D];首都师范大学;2002年
2 赖健耀;猪12号染色体显微切割与微克隆研究[D];华中农业大学;2003年
3 李金泉;花椰菜单染色体RFLP体系的构建[D];福建农林大学;2003年
4 王勇;生产系统管理模式及其作业调度问题的研究[D];辽宁工程技术大学;2003年
5 刘庆友;人TPO基因牛体细胞定点整合载体构建与细胞转染研究[D];广西大学;2004年
6 谢小芳;黄麻单染色体的分离和扩增及cDNA探针高通量筛选初探[D];福建农林大学;2004年
7 吴菁华;多花水仙若干品种类型亲缘关系的分子生物学研究[D];福建农林大学;2004年
8 耿克祥;猪13/17罗伯逊易位染色体的显微分离与微克隆研究[D];吉林大学;2006年
9 刘军;平面多杆停歇机构优化设计研究[D];西安电子科技大学;2007年
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