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茶树TRAP反应体系的建立及正交设计优化

张丽群  成浩  王丽鸳  韦康  
【摘要】:TRAP标记技术因操作简单、重复性好、效率高等特点得到广泛应用,但该技术在茶树中的研究报道较少,且茶树TRAP-PCR体系优化尚未见报道。笔者采用正交设计的方法,对茶树TRAP-PCR反应中Mg2+、Taq酶、dNTP、固定引物、随机引物5个因素进行了优化研究,建立了茶树TRAP-PCR最佳反应体系。该20μL反应体系含有2μL10×PCRBuffer(Mg2+free),50ng模板DNA,1.75mmo/LMg2+,0.50UTaq酶,0.20mmol/LdNTP,0.20mmol/L随机引物和0.20mmol/L固定引物。根据优化结果,利用最佳反应体系,选用16个茶树品种对TRAP标记多态性进行了初步研究。

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