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《中国农学通报》 2007年03期
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牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法研究

高存福  秦建华  赵月兰  左玉柱  包永占  李艳琴  
【摘要】:【目的】建立快速、简便、特异的检测牛病毒性腹泻病毒抗原的RT-PCR方法;【方法】根据已发表的牛病毒性腹泻病毒株(BVDV)5’端非编码区保守序列设计合成了两条引物,应用RT-PCR技术对两株BVDV标准株(OregonC24V and NADL)进行基因扩增,对扩增产物进行酶切鉴定。同时设猪瘟兔化弱毒疫苗株、轮状病毒株、MDBK细胞作对照;【结果】两株BVDV标准株均扩增出了长度为325bp的片段,扩增产物经酶切后形成长度为111bp和214bp两条片段,而对猪瘟兔化弱毒疫苗株、轮状病毒株、MDBK正常细胞扩增均为阴性,与预期结果一致。【结论】PCR检测方法可以快速准确地对牛病毒性腹泻-黏膜病作出诊断。该方法的敏感性可高达10-1TCID50。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 郜玉钢;李璠瑛;刘佳佳;杜锐;臧埔;;鹿源牛病毒性腹泻病毒E_0基因的RT-PCR扩增[J];生物学杂志;2009年01期
2 韩猛立;李娜;黄新;薄新文;王新华;赵玉龙;钟发刚;;牛病毒性腹泻病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用[J];西北农业学报;2010年10期
3 孟雨;吴发兴;朱紫祥;张志;张燕霞;刘爽;李晓成;王晶钰;;牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J];中国兽医科学;2010年01期
4 于吉锋;廖党金;刘亚刚;杨小艳;于晓东;;牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术研究进展[J];中国畜禽种业;2011年09期
5 李倬;田镔;李明生;平玲;;牛病毒性腹泻病毒反转录PCR快速检测方法的建立与初步应用[J];西北民族大学学报(自然科学版);2012年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 季新成;牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒分子生物学检测技术研究[D];西北农林科技大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 孟雨;牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及5’-UTR基因遗传变异分析[D];西北农林科技大学;2010年
2 李宁;牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立与gP48基因克隆及原核表达[D];河北农业大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 涂长春,李红卫,金扩世,章金钢,白安斌,刘士英,扈荣良,殷震;猪瘟病毒石门株特异cDNA片段的扩增与序列分析[J];病毒学报;1994年01期
2 李春阳,单松华,华修国;应用RT-PCR技术快速检测鉴定猪瘟病毒[J];上海交通大学学报(农业科学版);2003年01期
3 糜克永,王蔷,朱勇,任向远,杨玉莹;牛病毒性腹泻病毒基因组cDNA文库的构建[J];中国病毒学;1995年02期
4 邱昌庆,高双娣,周继章,程淑敏,李英才,陈桂华,杨学礼;我国规模化肉牛场牛病毒性腹泻-粘膜病流行状况监测[J];中国兽医科技;1998年08期
5 王新平;朱维正;任文陡;常国权;胡庆祥;刘汉章;薛兰英;李险峰;杜增先;王德才;;牛、羊感染病毒性腹泻-粘膜病的调查[J];中国畜禽传染病;1993年04期
6 杨桂梅,徐自忠,高洪,花群义,周晓黎,杨昌焰;二重RT-PCR同时检测VSV与BVDV核酸[J];中国预防兽医学报;2003年04期
7 周绪斌,王新平,宣华,涂长春;鉴别牛病毒性腹泻病毒和猪瘟病毒的复合PCR方法及其应用[J];中国兽医学报;2002年06期
8 谢西锋,崔保安;牛病毒性腹泻的研究概况[J];中国兽医杂志;2001年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 臧金灿;樊国燕;乔宏兴;丁明星;;RT-PCR技术检测河南省猪瘟病毒的研究[J];安徽农业科学;2006年24期
2 金扩世,涂长春,殷震;猪瘟病毒保护性囊膜糖蛋白E1基因的研究进展[J];病毒学报;1996年03期
3 李兆华;;RT-PCR技术在BVDV检测中的应用研究进展[J];山东畜牧兽医;2010年02期
4 赵月兰,张宁,胡自然,秦建华;牛病毒性腹泻病研究进展[J];当代畜牧;2002年11期
5 陈义祥,黄夏,刘翠权,胡丽萍,陈芳芳,黄胜斌,何丹,刘棋;猪瘟病毒与猪圆环病毒2型混合感染的检测[J];动物医学进展;2005年09期
6 张宁;秦建华;赵博伟;张富梅;胡晓悦;赵月兰;;牛病毒性腹泻-黏膜病诊断方法研究进展[J];动物医学进展;2008年02期
7 邓波;李凯航;薛霞;孙泉云;;上海地区奶牛场牛病毒性腹泻-黏膜病的血清学调查[J];动物医学进展;2011年04期
8 孔繁德,陆承平;牛病毒性腹泻-粘膜病的最新研究进展[J];福建畜牧兽医;2005年03期
9 殷进方;吴志鹏;江灿芬;张险朋;;猪瘟病毒的实时荧光RT-PCR检测[J];中国畜牧兽医;2009年10期
10 杜坚;转基因动物研究进展[J];广西畜牧兽医;1995年02期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 郭显坡;王金良;魏凤;王晓虎;沈志强;;SYBR Green I 实时RT-PCR检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒方法的建立及初步应用[A];中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会(第三届中国兽药大会学术论坛)论文集[C];2010年
2 郜玉钢;刘佳佳;杨鹤;张连学;臧埔;;鹿源BVDV敏感中药筛选的研究[A];现代化中药制剂发展与中药药理学研究交流会论文集[C];2009年
3 朱紫祥;顾立伟;张志;高磊;闫伟硕;李晓成;;猪源牛病毒性腹泻病毒PCR检测方法的建立及NS5b区基因序列分析[A];《2010中国猪业进展》论文集[C];2010年
4 王新平;涂长春;李红卫;宣华;费恩阁;殷震;;从疑似猪瘟病料中检出牛病毒性腹泻病毒[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 涂长春;中国猪瘟流行病学现状与防制研究[D];中国农业大学;2004年
2 李清秀;表达HIV-1的重组痘苗病毒的构建及免疫策略对含有蒙脱石的DNA疫苗免疫作用的影响[D];吉林大学;2004年
3 刘亚刚;猪瘟疫苗防制奶牛、牦牛病毒性腹泻/粘膜病的研究[D];四川大学;2004年
4 张光辉;河南省肉牛规模化养殖场牛病毒性腹泻的诊断与防制技术研究[D];南京农业大学;2004年
5 郜玉钢;鹿源BVDV分离鉴定、E_0基因的克隆与表达及免疫原性研究[D];吉林农业大学;2005年
6 孙永科;表达猪瘟病毒石门株E0/E2基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究[D];西北农林科技大学;2007年
7 钟发刚;牛病毒性腹泻病毒抗原检测、流行病学研究及分离株E2基因的克隆表达[D];四川农业大学;2008年
8 宋德光;犊牛口腔黏膜上皮细胞cDNA文库的构建及其水泡性口炎病毒受体的筛选[D];吉林大学;2008年
9 季新成;牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒分子生物学检测技术研究[D];西北农林科技大学;2010年
10 任艳;牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2与牛胚胎滋养层细胞相互作用的分子机制研究[D];石河子大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李婷;新型微生物传感器的应用研究[D];湖南大学;2009年
2 李立;反转录—套式聚合酶链式反应检测牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的研究[D];河南农业大学;2000年
3 杨利峰;猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法的建立及试剂盒的研制[D];山西农业大学;2005年
4 李玉梅;东北地区梅花鹿四种疫病的血清学调查[D];吉林农业大学;2005年
5 徐璐;猪瘟间接ELISA和猪瘟及主要繁殖障碍病的荧光PCR技术的研究[D];中国兽医药品监察所;2005年
6 张宝宁;牛病毒性腹泻—粘膜病病毒的分离、RT-PCR鉴定、NS2-3区基因克隆及变异分析[D];河北农业大学;2006年
7 王明杰;猪瘟兔化弱毒疫苗株cDNA分子克隆与嵌合分子克隆的构建[D];新疆农业大学;2006年
8 刘增再;盐渍肠衣猪瘟病毒的实验室检测研究[D];湖南农业大学;2006年
9 邓宇;牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗原捕获ELISA检测试剂盒的标准化研究[D];石河子大学;2006年
10 王丹娜;牛病毒性腹泻病毒p80基因的分段表达及其抗原性分析[D];东北农业大学;2006年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄新;钟发刚;王新华;;牛病毒性腹泻-粘膜病流行现状及防制研究进展[J];草食家畜;2009年04期
2 赵月兰,张宁,胡自然,秦建华;牛病毒性腹泻病研究进展[J];当代畜牧;2002年11期
3 朱文斯,赖平安,黄茜华,张鹤晓,杨伟;荧光RT-PCR快速检测禽流感病毒H5亚型的研究[J];中国医药导刊;2003年01期
4 李兆利;薛飞;朱远茂;;牛传染性鼻气管炎病毒gB蛋白研究进展[J];动物医学进展;2006年04期
5 张宁;秦建华;赵博伟;张富梅;胡晓悦;赵月兰;;牛病毒性腹泻-黏膜病诊断方法研究进展[J];动物医学进展;2008年02期
6 唐泰山;邓碧华;王凯民;张常印;雷治海;;牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J];动物医学进展;2009年04期
7 王新平,周绪斌;瘟病毒间的差异及起源[J];动物医学进展;1997年02期
8 王新平,周绪斌;猪感染牛病毒性腹泻病毒的研究进展[J];动物医学进展;1998年01期
9 王新平,费恩阁;牛病毒性腹泻的临床类型与致病机理的研究进展[J];动物医学进展;1998年03期
10 孔繁德,陆承平;牛病毒性腹泻-粘膜病的最新研究进展[J];福建畜牧兽医;2005年03期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 郜玉钢;鹿源BVDV分离鉴定、E_0基因的克隆与表达及免疫原性研究[D];吉林农业大学;2005年
2 王海燕;IBR间接ELISA的建立及重组gE糖蛋白与单抗的研制[D];吉林大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 柏亚铎;牛传染性鼻气管炎PCR诊断方法的建立及初步应用[D];吉林农业大学;2002年
2 张宝宁;牛病毒性腹泻—粘膜病病毒的分离、RT-PCR鉴定、NS2-3区基因克隆及变异分析[D];河北农业大学;2006年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 李倬;马省强;陈文芳;石真真;平玲;;牛病毒性腹泻病毒夹心ELISA快速检测方法的建立与初步应用[J];甘肃农业大学学报;2012年03期
2 程涛;王慧煜;黄新;余多慰;韩雪清;;转基因玉米Bt176液相芯片检测方法的建立[J];生物技术通报;2012年04期
3 邓宇;张荣;丛雁方;张建武;袁世山;文心田;郑浩;;猪源牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J];畜牧兽医学报;2011年07期
4 童钦;霍志云;胡桂学;王炜;武华;;牛病毒性腹泻病毒检测方法的研究进展[J];中国农学通报;2012年14期
5 李倬;田镔;李明生;平玲;;牛病毒性腹泻病毒反转录PCR快速检测方法的建立与初步应用[J];西北民族大学学报(自然科学版);2012年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 张祎娜;白佳桦;黄正;刘彦;;奶牛流产的微生物学因素及其诊治[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(下册)[C];2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 齐巍巍;转IRF-1基因牛胎儿成纤维细胞的BVDV及IBRV抗性研究[D];南京农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王新平,周绪斌;瘟病毒间的差异及起源[J];动物医学进展;1997年02期
2 罗廷荣,波丹,黄宪高,梁家权,刘芳,黄伟坚,秦爱珍,温荣辉,陆芹章,余克伦;RT-PCR检测猪瘟病毒初探[J];广西农业生物科学;2001年01期
3 纪金春;贺生录;谢占玲;金美旦巴;王海林;;牛病毒性腹泻/粘膜病的诊断与防制[J];青海畜牧兽医杂志;1990年03期
4 谢占玲;牛病毒性腹泻的研究进展[J];青海畜牧兽医杂志;1997年01期
5 王新华,沈敏,周鹏飞,钟发刚,温建新;分泌抗BVDV McAb杂交瘤细胞株的建立[J];西北农业学报;1999年03期
6 郑志刚,刘佩兰,郑增忍,王永玲,杜元钊;关于牛病毒性腹泻/粘膜病血清中和抗体的调查报告[J];动物检疫;1991年05期
7 傅烈振,朱燕,王宁,潘滋书,张楚瑜;应用反转录 - 聚合酶链技术快速检测猪瘟病毒RNA的研究[J];中国兽医科技;1998年06期
8 李佑民,刘振润,武银莲;牛病毒性腹泻—粘膜病病毒株(长春184)的分离与鉴定[J];兽医大学学报;1983年02期
9 王新平,涂长春,李红卫,金扩世,宣华,常国权,孙红梅,朱维正,费恩阁,殷震;从疑似猪瘟病料中检出牛病毒性腹泻病毒[J];中国兽医学报;1996年04期
10 王新平,涂长春,李红卫,宣华,朱维正,费恩阁,殷震;牛病毒性腹泻病毒P125基因重要区的比较与分析[J];中国兽医学报;1996年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 方绍庆;许红岩;耿金培;王洪来;;应用抗原捕捉EL ISA快速检测牛病毒性腹泻病毒[J];中国畜牧兽医;2005年12期
2 邓宇,王新华;ELISA在牛病毒性腹泻病检测中的应用[J];动物医学进展;2005年10期
3 杨玉秀;王海妮;吴云锋;;侵染荷兰郁金香的郁金香碎色病毒和黄瓜花叶病毒的RT-PCR检测[J];西北农业学报;2008年01期
4 高存福,秦建华,赵月兰,包永占,张宁;牛病毒性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J];中国兽医科技;2005年08期
5 刘燕,钱爱东;禽流感病毒H_5和H_9亚型RT-PCR检测方法的建立[J];吉林农业大学学报;2004年01期
6 牛国辉;季新成;段晓东;晁群芳;;牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定[J];新疆农业科学;2010年05期
7 俞伏松;车勇良;江斌;吴胜会;林琳;陈少莺;林天龙;;RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究[J];福建农业学报;2007年03期
8 郭瑞;李峰;李明福;成卓敏;师迎春;李世访;;苹果锈果类病毒新疆分离物的核苷酸序列分析[J];农业生物技术学报;2007年06期
9 马秋明;王学艳;王晶钰;何维明;;牛病毒性腹泻病毒陕西株的分离与NS_(5b)基因序列测定[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2008年12期
10 刘振江;金宁一;鲁会军;李国江;刘昊;岳云强;郭欢欢;周红宁;杨中华;谢辉;;云南省思茅地区乙型脑炎病毒及黄热病毒的分子流行病学监测[J];中国动物检疫;2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王劭;陈少莺;林锋强;程晓霞;江斌;陈仕龙;林琳;朱小丽;;猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立和应用[A];福建省科协第七届学术年会分会场——“坚持科技创新,建设海西现代畜牧业”研讨会论文集[C];2007年
2 陈云霞;侯韶毅;卢桂娟;陆有飞;高永锐;王成业;黄伟坚;;牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(下册)[C];2009年
3 臧琳;张璐;宋德武;母连志;丛彦龙;丁壮;;检测鹅源新城疫病毒RT-PCR方法的建立与应用[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(下册)[C];2009年
4 郭巍;戴伶俐;李雪峰;闫妍;王英原;周建华;相文华;;马流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
5 明艳林;郑国华;陈良华;吴琦;苏勇波;;二温式RT-PCR快速检测兰花斑点病毒技术的研究[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
6 王忠发;顾松叶;施慧;沈飚;;快速荧光定量RT-PCR定量检测对虾Taura综合症病毒(TSV)的方法建立与应用[A];2011年浙江省医学会医学病毒学分会、医学微生物与免疫学分会学术年会论文汇编[C];2011年
7 南松剑;沈志强;刘吉山;陈继春;;山东省猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR检测与分析[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年
8 栾婧婧;高运东;仲跻峰;赵宏坤;;半巢式RT-PCR快速检测犊牛轮状病毒方法的建立[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(下)[C];2005年
9 孔繁德;王荣;陈琼;吴德峰;徐淑菲;;多重RT-PCR一步法技术同时检测猪瘟病毒和蓝耳病病毒方法的建立以及初步应用[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
10 曾伟伟;王庆;王英英;张乐生;刘宝芹;石存斌;吴淑勤;;草鱼呼肠孤病毒三重RT-PCR检测方法的建立及其初步应用[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 高营 李国庆;地爆器材检测处废站获科技奖[N];解放军报;2009年
2 记者 李天舒;猪肉牛乳检测有新法[N];健康报;2010年
3 通讯员 傅强 吴枫;汪东进赴检测公司苏丹现场调研[N];石油管道报;2010年
4 本报记者 陈焰萍;谷歌推恶意软件示警功能 用户搜索时被感染可被检测[N];通信信息报;2011年
5 记者 谭华健;近40家企业“家门口”检测[N];中山日报;2009年
6 记者 马昭;检测车辆黑尾巴摒除作弊更严格[N];西安日报;2009年
7 本报记者 张樯;取消检测能否消除乙肝歧视[N];深圳特区报;2009年
8 记者 沈兴国;杭州启用先进方法检测汽车“黑尾巴”[N];绍兴日报;2010年
9 记者 连雅婕 通讯员 于柏林 于洋;长春应化所 检测蛋白质有了新方法[N];长春日报;2010年
10 记者 王龙玉;我市将全面实施免费婚检和孕前优生检测[N];金华日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 董秀梅;牛副流感病毒3型山东分离株致病性研究及荧光定量RT-PCR的建立[D];中国农业科学院;2012年
2 翟小龙;EZH2基因与上皮性卵巢癌相关性的研究[D];四川大学;2004年
3 张红斌;信息系统内部威胁检测与感知方法[D];西安电子科技大学;2009年
4 李江;角蛋白降解菌Streptomyces fradiae var.k-11中蛋白酶基因的克隆及表达[D];中国农业科学院;2005年
5 宋振梅;Clusterin在食管鳞癌中表达的研究与应用[D];山东大学;2005年
6 孙京臣;家蚕质多角体病毒RDRP的基因克隆、表达及定位研究[D];中山大学;2004年
7 张焕容;伪狂犬病病毒、猪细小病毒和流行性乙型脑炎病毒检测基因芯片的构建及检测技术研究[D];四川农业大学;2005年
8 何嘉;涎腺粘液表皮样癌的耐药相关因素及其产生机理和基因芯片的检测分析研究[D];四川大学;2004年
9 张久松;西尼罗病毒感染病原体检测方法与流行病学调查研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
10 左秀美;克—雅氏病新的潜在标志物H-FABP的检测及朊蛋白基因研究[D];吉林大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 田相军;猪水泡病病毒RNA的检测及VP1基因在原核中的表达[D];山东农业大学;2005年
2 邓建军;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测住院患儿肠道星状病毒[D];四川大学;2004年
3 陈官菊;禾谷镰孢与小麦寄主互作研究[D];南京农业大学;2005年
4 张颖;RT-PCR技术检测贝类中诺瓦克样病毒的研究[D];河北农业大学;2006年
5 李彦明;兽用疫苗中霉形体污染的套式PCR检测技术研究[D];山西农业大学;2004年
6 郑林英;间接夹心ELISA检测鸭肿头败血症病毒的研究[D];四川农业大学;2005年
7 黄瑛;昌吉市奶牛结核病、布鲁氏菌病普查与防治对策研究[D];西北农林科技大学;2005年
8 张欣;拱桥加固技术研究与实践[D];重庆大学;2005年
9 贾玉珍;DHI体系检测与提高奶牛生产性能的应用研究[D];吉林大学;2005年
10 郭丰哲;既有钢筋混凝土桥梁的耐久性检测及评估研究[D];西南交通大学;2005年
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