小麦锈菌AFLP分子标记技术体系的建立

唐静蒲志刚张敏阎文昭

【摘要】：以小麦条锈菌、杆锈菌、叶锈菌的夏孢子为材料,通过DNA提取、酶切、PCR扩增、凝胶电泳等系列程序摸索和优化,建立了锈菌的AFLP分子标记体系如下:40μl酶切体系中采用了EcoRI、TrulI各5U,37℃3h,65℃3h双酶切4μl100ng/μl的DNA;然后加入10μl连接混合液22℃连接3h,16℃10h;连接产物5μl,10μMEcoRI、10μMTru1I预扩引物各1.5μl,PCR反应液25μl,ddH2O17μl进行预扩;预扩产物稀释20倍后取5μl,50ng/μlEcoRI、Tru1I选扩引物各1μl,PCR反应液10μl,ddH2O3μl体系进行选择性扩增,为小麦锈病和其他真菌性病害的分子标记克隆及抗病育种的辅助选择提供了有力工具。

【作者单位】：四川农业大学农学院四川农业科学院生物技术核技术研究所四川农业大学农学院四川农业科学院生物技术核技术研究所
【关键词】： 小麦锈菌 AFLP标记
【基金】：国家“863”计划课题资助(2002AA245041)
【分类号】：S435.121
【正文快照】：

小麦锈病是世界各小麦产区最为重要的病害之一,锈菌孢子能随高空气流进行远距离传播,其生理小种的变异较大,传播也极为广泛[1],给准确掌握某一地区小麦锈菌生理小种的发生带来极大的困难,也给小麦抗锈育种和品种合理布局增加了难度。近年来,国内外通过一些分子标记手段在小麦

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