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《肿瘤研究与临床》 2003年01期
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AFP/HSP70重组蛋白表达载体抗人肝癌细胞免疫的实验研究

王小平  陈瑞芬  宋爱利  刘彦仿  
【摘要】:目的 :构建真核表达载体 p BBS2 12 - AFP/ HSP70 ,进行肝癌基因工程疫苗主动免疫的初步研究。方法 :构建的真核表达载体 p BBS2 12 - AFP/ HSP70 ,磷酸钙共沉淀法转染 SP2 / 0细胞 ,放射免疫和双夹心 EL ISA法鉴定 AFP和 AFP/ HSP70融合蛋白的表达。以上构建真核载体进行BAL B/ C小鼠股四头肌注射 ,免疫 3次后 ,取脾制备悬液 ,经 PHA和 AFP刺激后 ,与 Hep G2细胞混合培养 ,MTT检测细胞毒反应。结果 :构建的 p BBS2 12 - AFP/ HSP70真核载体经磷酸钙共沉淀法转染 ,建立了分泌表达 AFP/ HSP70融合蛋白的 SP2 / 0细胞株。上真核载体免疫小鼠后脾细胞与肝癌细胞混合培养 ,MTT检测显示对 AFP表达较高的 Hep G2细胞呈现明确的杀伤效应 ,而空载体免疫组混合细胞培养表现较弱的效应。结论 :p BBS2 12 - AFP/ HSP70真核载体的构建及其抗人肝癌细胞的体外细胞毒实验初步显示 p BBS2 12 - AFP/ HSP70作为基因工程疫苗具有一定的意义 ,为今后深入实验研究奠定了良好的基础。
【作者单位】首都医科大学 首都医科大学 首都医科大学 第四军医大学
【分类号】:R735.7

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【引证文献】
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1 蔡述华;核酸疫苗pIRES-CEA-HSP70诱导杀伤结肠癌细胞的研究[D];福建医科大学;2005年
2 刘易欣;肝癌中乙肝病毒基因产物与NF-κB及其下游癌基因表达的相关性研究[D];天津医科大学;2007年
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