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PPARγ基因干扰体外对兔骨髓间充质干细胞成脂基因的影响

白祥  禹宝庆  黄建明  许大峰  
【摘要】:目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ基因干扰体外对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂基因的影响。方法通过对兔骨髓培养分离出BMSCs,并用流式细胞术分析BMSCs细胞表面分子。实验分为5组,对照组:BMSCs未经任何处理;模型组:BMSCs给予0. 09 mol/L乙醇处理;空si RNA组:BMSCs给予0. 09 mol/L乙醇+空si RNA; PPARγ组:BMSCs给予0. 09 mol/L乙醇+PPARγsi RNA; T0070907组:BMSCs给予0. 09 mol/L乙醇+T0070907。并用RT-PCR和Western印迹方法检测PPARγ、PETALA2(AP2)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、脂肪酸转运蛋白(FATP) 1和脂肪酸转运酶(FAT)基因表达水平的变化。结果BMSCs表面抗原CD90(89. 03%)、CD105(90. 90%)、CD73(95. 03%)均呈阳性表达; CD13(0. 83%)、CD34(1. 09%)、CD45(1. 29%)基本无表达。模型组和空si RNA组脂肪细胞计数和三酰甘油含量明显高于对照组(P0. 01),PPARγ或T0070907干扰后PPARγ组和T0070907组脂肪细胞计数和三酰甘油含量明显降低(P0. 01),与对照组差异无统计学意义(P0. 05)。模型组和空si RNA组PPARγ基因和蛋白表达水平明显高于对照组(P0. 01),用PPARγ干扰后或加入T0070907后,PPARγ组和T0070907组PPARγ基因或蛋白表达水平明显降低(P0. 01),而与对照组差异无统计学意义(P0. 05)。模型组和空si RNA组Ap2、LPL、FATP1和FAT基因表达水平明显高于对照组(P0. 01),用PPARγ干扰后或加入T0070907后,PPARγ组和T0070907组成脂基因表达水平明显降低(P0. 01),与对照差异无统计学意义(P0. 05)。结论 PPARγ基因干扰对BMSCs向脂肪细胞转化具有明显抑制作用,其机理可能与抑制PPARγ基因和成脂基因的表达有关。

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