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《中国真菌学杂志》 2010年02期
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PCR-RFLP和多重PCR技术检测常见病原性丝状真菌的实验研究

张晓利  吕雪莲  沈永年  吕桂霞  王淼淼  葛一平  刘维达  
【摘要】:目的建立检测常见丝状真菌感染病原菌的PCR-RFLP和多重PCR方法。方法建立以PCR技术为基础的限制片段长度多态性(RFLP)方法 ,首先用真菌通用引物扩增丝状真菌的ITS区,然后用限制性核酸内切酶对PCR产物进行酶切。用4种丝状真菌的特异性引物建立多重PCR体系,用该体系检测单模板、双模板和三模板的扩增情况,并测定该体系的特异性和敏感性。结果用PCR-RFLP技术能够鉴别5种常见丝状真菌,多重PCR能够根据扩增片段的不同鉴别菌种,在合适的反应条件下,对单模板、双模板和三模板均能扩增出目的片段。结论 PCR-RFLP和多重PCR技术能够快速鉴定丝状真菌感染病原菌,有临床应用的良好前景。

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 秦振宇,吴绍熙,吕桂霞,RoyLHopfer,张宏暨南大学医学院第一附属医院皮肤科,郭宁如;PCR-RFLP鉴别念珠菌、曲霉和隐球菌的探讨[J];临床皮肤科杂志;2000年02期
2 刘军,刘维达;聚合酶链反应检测深部致病真菌的实验研究[J];中华皮肤科杂志;2005年08期
【共引文献】
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1 朱利平,章强强,石尧忠,翁心华,王家俊;皱落念珠菌临床分离株的基因型与表型差异性分析[J];中华传染病杂志;2003年05期
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1 李咏梅;PCR检测小鼠早期侵袭性念珠菌病的实验研究[D];重庆医科大学;2004年
2 刘春梅;落叶松—杨栅锈菌生理小种鉴定[D];西北农林科技大学;2007年
【同被引文献】
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1 陈剑山;郑服丛;;ITS序列分析在真菌分类鉴定中的应用[J];安徽农业科学;2007年13期
2 刘春来;文景芝;杨明秀;李永刚;;rDNA-ITS在植物病原真菌分子检测中的应用[J];东北农业大学学报;2007年01期
3 罗永兰,张志元,冉国华;柑橘内生真菌的分离与鉴定[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2005年04期
4 刘淑艳,李玉;几种主要分子生物学技术在菌物系统学研究中的应用[J];吉林农业大学学报;2000年03期
5 张星耀,赵仕光,吕全,贾秀贞,刘会香;树木溃疡病病原真菌类群分子遗传多样性研究Ⅱ——Botryosphaeria属28S rDNA-PCR-RFLP和RAPD解析[J];林业科学;2000年02期
6 王晓杰,康振生,黄丽丽;PCR技术在植物病害检测中的应用[J];云南农业大学学报;2005年02期
7 李淼,檀根甲,周冬生,丁克坚,张成林,高智谋,吴芳芳;基因芯片技术及其在植物病害研究中的应用[J];植物保护;2003年01期
8 曾树森;吴晓梅;;正常结膜囊细菌的研究[J];国际眼科杂志;2006年04期
9 包勇,陈清英,李莎,何明春,张发强,杨莉莉,曹桂群,夏庆杰,高蜀生;聚合酶链反应快速检测多重耐药葡萄球菌实验研究[J];华西医学;2004年01期
10 王耿新;PCR技术在医学检验中的应用现状[J];实用医药杂志;2005年06期
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1 赵嘉平;树木溃疡病菌—葡萄座腔菌属及相关真菌系统分类研究[D];中国林业科学研究院;2007年
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1 朱建裕;实时荧光RT-PCR和杂交诱捕RT-PCR-ELISA检测李坏死环斑病毒的研究[D];湖南农业大学;2002年
2 王金利;中国部分地区葡萄座腔菌属及相关属的系统学研究[D];北京林业大学;2003年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 张宏,吴绍熙!210042南京,郭宁如!210042南京,徐贤秀,沈永年!210042南京,RoyL.Hopfer;真菌特异性通用引物的聚合酶链反应系统的实验与临床研究[J];中华皮肤科杂志;1998年05期
2 王英 ,刘维达 ,顾军 ,赵敬军 ,陶苏江 ,吕桂霞;PCR结合基因扫描分析技术对几种深部真菌病致病菌的快速检测及鉴定[J];中华皮肤科杂志;2003年08期
【相似文献】
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1 李波;郭桐生;崔恩博;曲芬;毛远丽;;7株布氏杆菌临床分离株16SRNA基因PCR扩增及序列分析[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
2 李波;曲芬;郭桐生;崔恩博;刘立明;李筱涵;廖华芳;毛远丽;;7株布氏杆菌临床分离株16SRNA基因PCR扩增及序列分析[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
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4 张晓利;王淼淼;吕雪莲;葛一平;刘维达;;菌落PCR技术快速鉴别丝状真菌的实验研究[A];2011全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2011年
5 肖代雯;杨永长;刘华;喻华;姜伟;杜琼;齐伟;段莉;黄文芳;;PCR-RFLP快速鉴定常见致病性葡萄球菌[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
6 张晓利;刘维达;;PCR—RFLP技术快速鉴别8种致病丝状真菌病原菌的实验研究[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
7 原英;朱任媛;陈民钧;马依努尔;;回顾孢子丝菌检验方法 提高丝状真菌诊断水平[A];中国医院协会第十六届全国医院感染管理学术年会资料汇编[C];2009年
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2 符美华;深部念珠菌病快速PCR检测的标准化研究[D];中国协和医科大学;2005年
3 王淼淼;临床常见致病念珠菌的快速鉴定和近平滑念珠菌形态转换观察[D];中国协和医科大学;2010年
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1 杨霞霞;大鼠卡氏肺孢子虫DHFR和DHPS基因序列的测定与分析[D];遵义医学院;2009年
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