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小反刍兽疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立

张忠湛  高玉伟  夏咸柱  侯小强  黄耕  
【摘要】:目的建立快速、简便和特异的小反刍兽疫病毒(PPRV)分子生物学诊断方法。方法针对PPRVN基因保守区设计2对特异性引物和1套环引物,对反应体系中的Mg2+、Betaine、Bst DNA Polymerase、dNTP、环引物和反应温度等条件分别进行优化,建立用于检测PPRV的环介导等温扩增方法(LAMP)。结果建立的LAMP方法检测PPRV时,在62℃水浴锅中反应30min即可直接观察结果。该方法具有高度特异性,可检测到1.6个TCID50PPRV。结论建立的PPRV LAMP检测方法具有特异、快速、简便等优点,为小反刍兽疫病提供了一种新的诊断方法。

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