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《中华肿瘤杂志》 2003年06期
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肺巨细胞癌高低转移株转移能力差异相关分子的研究

蒋代凤  陆应麟  邱宗荫  贺福初  
【摘要】:目的 鉴定在肺巨细胞癌高、低转移株差异表达的转移相关分子 ,探讨肺巨细胞癌的转移机制。方法 以肺巨细胞癌高、低转移株 (即PLA80 1D、PLA80 1C)为转移模型 ,通过细胞体外迁移和侵袭实验 ,验证高、低转移株间细胞体外迁移和侵袭能力的差异。以明胶酶谱实验 ,分析肿瘤细胞分泌基质金属蛋白酶 (MMP 2和MMP 9)的活性 ;以Westernblot技术 ,检测肿瘤细胞分泌的MMP 2、MMP 9、组织基质金属蛋白酶抑制剂 (TIMP 1和TIMP 2 )的蛋白水平 ,以及p53、细胞增殖核抗原 (PCNA)、p16、CD44(V6)异构体、细胞骨架蛋白 (CK18)、上皮细胞间黏附分子 (E cadherin)和肿瘤转移抑制蛋白(nm2 3 H1)的蛋白水平 ;以半定量RT PCR技术 ,检测细胞内MMP 2、MMP 9、TIMP 1、TIMP 2和血管内皮生长因子 (VEGF)的mRNA水平。结果 肺巨细胞癌高转移株PLA80 1D的细胞体外侵袭能力显著高于低转移株PLA80 1C ,大约为后者的 4倍。PLA80 1D细胞株分泌的MMP 2活性高于PLA80 1C细胞株 ,其原因主要是由于分泌的MMP 2蛋白以及细胞内MMP 2mRNA水平显著增高所致。在PLA80 1D细胞株内 ,p53、PCNA、CK18蛋白和VEGFmRNA为显著高表达 ,p16、E cadherin和nm2 3 H1蛋白为显著低表达 ,而MMP 9、TIMP 1、TIMP 2和CD44(V6)蛋白的表达在高、低转移株间的差异

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