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《中华微生物学和免疫学杂志》 2001年01期
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微量酶联杂交法定量检测HBV基因竞争PCR扩增产物

缪晓辉  戚中田  孔宪涛  
【摘要】:目的 建立一种简便、敏感、精确的微反应板酶联杂交技术 ,以鉴定HBV基因的竞争PCR扩增产物。方法 设计了两种捕获探针 ,能分别与竞争PCR扩增产物中的野生片段和突变片段杂交。捕获探针通过 3′ 端修饰的氨基与微量DNA结合板孔表面的NOS基团化学结合而被“竖直”地包被在反应板上 ;将热变性后的产物加入两种捕获探针反应孔内 ,产物中带有生物素的野生或突变片段的一条单链与相应的捕获探针杂交 ;最后用链亲和素 碱性磷酸酶及底物检测杂交信号。结果 该方法检测PCR产物DNA的灵敏度为 80ng/ml,大于琼脂糖凝胶电泳染色鉴定法。获得野生片段和突变片段杂交信号值后 ,可根据公式计算扩增前野生模板的初始量。结论 本方法操作简单、灵敏度高、结果数据化、特异性强 ,适用于竞争PCR产物分析。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
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中国硕士学位论文全文数据库 前2条
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【参考文献】
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
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【同被引文献】
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【二级引证文献】
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【相似文献】
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7 林园园;乙型肝炎病毒RNA上La protein结合位点的缺失对其自身稳定性影响的实验研究[D];华中科技大学;2006年
8 苏倩;14-3-3σ、SFRP基因甲基化与乙型肝炎病毒相关性肝癌的临床研究[D];安徽医科大学;2009年
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