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黄连解毒汤及其有效部位调控星形胶质细胞网络对MCAO大鼠丘脑损伤的保护

赵晖  龙建飞  邹海艳  张秋霞  张建  王蕾  张楠  边宝林  赵海誉  
【摘要】:目的:观察黄连解毒汤水提物及3个有效部位(总生物碱、总黄酮、总环烯醚萜)对中动脉栓塞(MCAO)大鼠丘脑的保护作用。方法:线栓法建立MCAO大鼠模型,雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、黄连解毒汤水提物(800 mg·kg-1)、总生物碱组(44 mg·kg-1)、总黄酮组(50 mg·kg-1)、总环烯醚萜组(80 mg·kg-1),连续ig给药7 d,每天给药1次。HE染色观察丘脑病理学改变;高效液相-色谱荧光法检测丘脑谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量;免疫荧光单标染色法检测丘脑谷氨酸脱羧酶(GAD65)的表达;免疫荧光双标染色法检测星形胶质细胞纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)表达。结果:中动脉栓塞7 d大鼠丘脑部分神经元变性,和假手术组相比,丘脑Glu,GABA含量降低(P0.05),GAD65表达减弱(P0.05),GFAP,Cx43表达增强(P0.01)。黄连解毒汤水提取物及3个部位均可不同程度减轻丘脑神经元变性程度。总黄酮可明显上调丘脑GAD65表达,降低GFAP,Cx43蛋白表达,差异较模型组明显(P0.01),促进丘脑Glu,GABA含量恢复至正常水平。黄连解毒汤水提取物、总生物碱组、总环烯醚萜组大鼠丘脑Cx43蛋白表达较模型组明显上调(P0.01),水提物组大鼠GAD65表达也较模型组明显增高(P0.05)。黄连解毒汤水提取物、总生物碱组、总环烯醚萜组大鼠丘脑GFAP蛋白表达较模型组没有显著性差异,GABA含量明显低于假手术组(P0.05)。结论:中动脉栓塞后,丘脑可出现神经细胞变性,递质氨基酸含量减少,星形胶质细胞异常活化,GFAP,Cx43蛋白表达异常。黄连解毒汤总黄酮可减轻脑缺血后丘脑神经细胞损伤,其作用与抑制星形胶质细胞异常活化,调节GFAP,GAD65蛋白表达关系密切。

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