收藏本站
《中国预防兽医学报》 2010年11期
加入收藏 投稿

日本血吸虫Sj22.6-LHD-Sj23融合基因的克隆及原核表达

付媛  卢福庄  石团员  顾昀  俞国乔  陆国林  张雪娟  
【摘要】:为获得具有良好抗原性的日本血吸虫重组蛋白,本研究设计了两对特异性引物,以日本血吸虫mRNA为模板,RT-PCR方法分别克隆基因片段Sj22.6ku和LHD-Sj23,以重叠延伸PCR方法将两个片段连接,构建原核重组表达质粒pET28-Sj22.6-LHD-Sj23;该重组质粒在大肠杆菌Rosetta DE3中表达后所获得的融合蛋白Sj22.6-LHD-Sj23分子量约为35 ku。Western blot鉴定结果表明该重组蛋白有良好的免疫原性,为进一步研制日本血吸虫病分子诊断试剂盒奠定了基础。
【作者单位】浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;浙江省畜牧兽医局;
【关键词】日本血吸虫 Sj.ku蛋白 LHD-Sj蛋白 融合蛋白 重叠延伸PCR
【基金】:浙江省攻关项目资助
【分类号】:S852.7
【正文快照】:
*Corresponding author日本血吸虫病是一种危害严重的人畜共患病,可引起肝脏、肠道以及其他器官的损伤,严重时导致宿主死亡。血吸虫病的诊断在家畜血吸虫病防治中具有重要的作用,寻找制备和纯化较方便的高敏感性、特异性诊断抗原一直是人们研究的重点。基因重组抗原因其具有

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 付媛;张雪娟;赵俊龙;何永强;刘恩勇;卢福庄;江涛;冯尚连;;日本血吸虫22.6ku膜相关蛋白基因的克隆及原核表达[J];华中农业大学学报;2007年03期
2 余传信,朱荫昌,殷旭仁,何伟,华万全;日本血吸虫(大陆株)23kD分子(SjC23)大亲水肽段(HD)在pGEX-5X-1中表达[J];实用寄生虫病杂志;2000年04期
3 林娇娇,李浩,陆珂,石耀军,傅志强,蔡幼民;应用Sj23基因重组抗原诊断牛、羊血吸虫病研究[J];畜牧兽医学报;2003年05期
4 林矫矫;中国大陆株日本血吸虫23kD基因重组抗原的研究──23kD抗原大亲水区多肽基因重组抗原的制备及抗原性测定[J];中国兽医科技;1995年05期
5 张桂筠,张兆松,陈淑贞,沈一平,吴海玮,苏川,吴观陵;日本血吸虫中国大陆株基因重组抗原 Sj22.6kDa 的免疫学活性鉴定[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;1998年01期
6 唐威华,张景六,王宗阳,洪孟民;SDS-PAGE 法测定His-tag 融合蛋白分子量产生偏差的原因[J];植物生理学报;2000年01期
7 章辉;朱荫昌;司进;赵松;王晓婷;殷旭仁;曹利民;曹国群;华万全;徐明;梁幼生;;日本血吸虫复合B细胞表位抗原的制备和鉴定[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2007年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吕英海,李建粤;水稻蜡质基因及其利用研究进展[J];西北植物学报;2005年11期
2 苟惠天;王艳华;李文卉;李航;付宝权;张德林;;刚地弓形虫GJS株微线体蛋白基因MIC3的克隆与原核表达[J];甘肃农业大学学报;2008年05期
3 许蓓妮;刘金花;彭敏;解庭波;朱丽琴;伍欣星;吴承龙;;人乳头瘤病毒16 E7基因的原核表达及表达条件的优化[J];武汉大学学报(医学版);2006年04期
4 谢海燕,郭霄峰;猪α-干扰素的原核表达[J];华南农业大学学报;2004年04期
5 余传信;杨小红;殷旭仁;许永良;;日本血吸虫虫卵毛蚴抗原SjMP10的表达及血清学诊断价值[J];临床检验杂志;2006年06期
6 赵清兰;李友;聂浩;赵俊龙;;检测牛血吸虫病的重组LHD-Sj23蛋白乳胶凝集试验的建立[J];湖北农业科学;2009年09期
7 罗秀菊,王敏,易新元,曾宪芳,章洁;两个日本血吸虫成虫新基因的克隆和分析[J];中国热带医学;2002年03期
8 吴凯威;刘志刚;;红星梭子蟹变应原原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫学鉴定[J];水生生物学报;2009年02期
9 闫广谋;王兴龙;张辉;刘锴;庞盼娇;王学理;高健勇;李晓燕;张付贤;王俊霞;;布鲁菌BP26基因的克隆、表达及纯化[J];中国生物制品学杂志;2007年12期
10 石燕;蒋椒;沈卫英;蒋雅红;申庆祥;;hCGβ-(CTP)_4和hCGβ-(CTP)_4-(C3d-P28)_4在大肠杆菌中的表达及纯化[J];生殖与避孕;2007年04期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 杨桂香;汪洋;吴波浪;张万江;黄伟华;彭险峰;;猪表皮生长因子在毕赤酵母中的表达及鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第九次学术讨论会论文与摘要集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 张伟建;上市公司中重组谨防“引狼入室”[N];证券时报;2005年
2 本报记者 李巧宁;鼓励试点公司进行多种方案模式创新[N];证券时报;2005年
3 深圳证券交易所;关于对佳木斯金地造纸股份有限公司及相关人员予以公开谴责的公告[N];证券时报;2005年
4 李允峰;治理外资避税应立法重罚[N];证券时报;2005年
5 见习记者 蔡晓铭;北京泰跃全面掌控茂化实华新一届董事会[N];证券时报;2005年
6 联合证券分析师 付罗龙;以平常心对待武钢股份钢价调整[N];证券时报;2005年
7 本报记者 黄磊;上海地产市场忐忑迎“六一”[N];证券时报;2005年
8 招商证券 罗晓春;“魔兽世界”公测彰显网游市场魅力[N];证券时报;2005年
9 本报记者 郭蕾;对冲基金对IPO越来越挑剔[N];证券时报;2005年
10 本报记者 李雄文;南京新百 便宜货能捡吗?[N];证券时报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 门静涛;日本血吸虫复合表位基因疫苗免疫研究[D];吉林大学;2009年
2 尚西亮;碳酸酐酶Ⅲ与肌肉疲劳之间的关系及其对疲劳消除作用的初步观察[D];复旦大学;2009年
3 何江虹;FEZ1在星形胶质细胞中的表达及其功能研究[D];苏州大学;2009年
4 胡雪梅;日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关蛋白分子及其抗原表位的克隆和免疫保护作用的研究[D];南京医科大学;2001年
5 黄鹤;牛肠激酶催化亚基cDNA的克隆、表达及表达产物的纯化和应用[D];天津大学;2003年
6 杨雪琴;转移抑制因子nm23-H1与肺癌MAPK通路支架激酶KSR的相互作用关系研究[D];四川大学;2006年
7 林英武;细胞色素b_5向细胞色素c的结构转化以及不同表达体系对其结构、性质和功能的影响[D];复旦大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李敏艳;猪β_2-肾上腺素能受体的克隆、表达及初步分离纯化[D];西北大学;2009年
2 苟惠天;弓形虫GJS株微线体蛋白3基因的克隆、表达及鉴定[D];甘肃农业大学;2008年
3 胡瑜霞;人源磷酸二酯酶6(PDE6)γ亚基蛋白的克隆、表达以及纯化[D];华中师范大学;2009年
4 刘艳;小麦—黑麦易位系材料R59中α-硫素基因的cDNA克隆、表达纯化及FTIR研究[D];电子科技大学;2009年
5 孙帅;日本血吸虫天冬酰胺内肽酶编码基因的克隆表达及其应用研究[D];中国农业科学院;2009年
6 高胜岩;日本血吸虫多价DNA疫苗的构建及免疫保护性研究[D];吉林农业大学;2008年
7 付光伟;日本血吸虫表膜结构蛋白Annexin基因克隆、表达与免疫保护效果评估[D];福建农林大学;2009年
8 李友;牛血吸虫病分子ELISA诊断方法的建立和应用[D];华中农业大学;2008年
9 朱绍春;日本血吸虫22.6kDa表膜蛋白功能的初步研究[D];安徽医科大学;2008年
10 彭运潮;快速诊断家畜日本血吸虫病免疫层析条的研制与初步应用[D];湖南农业大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨丹,叶佩莹,万津,刘永平,马辉文;谷胱甘肽S-转移酶的诱导表达及提纯[J];氨基酸和生物资源;2004年03期
2 杨光,刘玉,李少华,柳川,沈倍奋,邵宁生;TRAP蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达[J];军事医学科学院院刊;2003年02期
3 陈淑贞;蔡银龙;冯笑川;张兆松;吴宜琴;吴观陵;;日本血吸虫成虫cDNA库的构建、免疫学筛选及阳性克隆的初步鉴定[J];实用寄生虫病杂志;1993年01期
4 江涛;周艳琴;刘琴;聂浩;姚宝安;赵俊龙;;弓形虫微线体蛋白MIC3基因的克隆及原核表达[J];畜牧兽医学报;2006年06期
5 谢可鸣,陈家旭,刘述先,龚唯,胡永德,夏超明,宋光承,李允鹤;重组Sj26(rSj26)抗原免疫酶测定新方法诊断日本血吸虫病的研究[J];中国血吸虫病防治杂志;1995年04期
6 汪世平,曾宪芳,甘定祥,李争鸣,冯毅坚,易新元,言敢威;日本血吸虫31/32kDa分子抗原快速诊断试剂盒的研制与现场应用[J];中国血吸虫病防治杂志;1999年06期
7 林矫矫;中国大陆株日本血吸虫23kD基因重组抗原的研究──23kD抗原大亲水区多肽基因重组抗原的制备及抗原性测定[J];中国兽医科技;1995年05期
8 蒋明森;陈静卿;梅柏松;杨孟祥;洪嘉玲;倪永辉;黄菊人;;日本血吸虫虫体抗原导致的保护性免疫及其免疫特征的分析[J];中国寄生虫病防治杂志;1993年04期
9 张桂筠,张兆松,陈淑贞,沈一平,吴海玮,苏川,吴观陵;日本血吸虫中国大陆株基因重组抗原Sj22.6kDa基因克隆与表达的研究[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;1997年06期
10 苏川,马磊,王荣芝,胡雪梅,陈淑贞,邵莉君,吴海玮,沈蕾,张兆松,吴观陵;日本血吸虫22.6kDa重组蛋白对小鼠的免疫保护性研究[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;1999年05期
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026