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《中国预防兽医学报》 2003年01期
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狂犬病病毒SRV_9克隆株核蛋白基因的克隆、表达与特性分析

袁慧君  扈荣良  张守峰  张茂林  涂长春  
【摘要】:根据已发表的狂犬病病毒核蛋白基因序列 ,设计并合成了一对引物。从SAD株驯化的SRV9。蚀斑株中提取病毒RNA ,通过RT_PCR扩增出核蛋白的全长cDNA序列。测序结果显示 ,其序列与国外报道的SAD母源株序列一致。将核蛋白的cDNA克隆至原核表达载体pET_2 8b ( +)中 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3 )plyss,于 3 0℃ 1mmol/LIPTG条件下诱导表达。大肠杆菌菌体裂解产物经SDS_PAGE分析 ,在分子量约为 5 6kDa处出现一新的蛋白带 ,和预期的目的蛋白分子量相符。Western_blotting检测表明 ,表达产物能与狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应 ,出现单一反应带。扫描分析显示 ,表达产物占菌体总蛋白的 2 3 %。包涵体分离、纯化后 ,纯度达 89%。上述结果为核蛋白在狂犬病基因免疫和免疫检测中的进一步应用奠定了基础。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 李海涛;扈荣良;张守峰;肖跃强;袁慧君;涂长春;;狂犬病病毒核蛋白基因重组犬2型腺病毒的构建研究[J];免疫学杂志;2005年06期
2 赵刚;李刚;陈铁桥;范晓娟;;狂犬病病毒P基因的原核表达及间接ELISA方法的应用[J];中国人兽共患病学报;2010年02期
3 袁慧君,扈荣良,包世俊,张守峰,殷震;狂犬病病毒糖、核蛋白基因疫苗的构建及在小鼠的免疫试验[J];中国兽医学报;2004年02期
4 王政;王小英;马文丽;李孟森;;狂犬病毒pVax-G/N融合基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达[J];中国人兽共患病学报;2012年08期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 赵刚;李刚;范晓娟;;狂犬病病毒P基因的原核表达及间接ELISA方法的应用[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
2 ;Experimental and field immunization of dogs with a‘bivalent'genetic vaccine based on rabies virus glycoprotein and nucleoprotein cDNAs1[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 李茂;动物狂犬病弱毒疫苗生产工艺的建立及免疫试验研究[D];吉林大学;2007年
2 张兴娟;同时检测和区分猪瘟野毒株和兔化弱毒疫苗株及牛病毒性腹泻病毒1型的三重荧光定量RT-PCR方法的建立[D];扬州大学;2010年
3 赵刚;狂犬病病毒P蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立[D];湖南农业大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 李伟,张新梅,张曼夫,王树惠;狂犬病病毒3aG株核蛋白基因cDNA的克隆及序列分析[J];农业生物技术学报;1999年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴丛梅,黄天华,吴德生,谢庆东,徐小虎;pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
2 阮烨,王晓云,谢庆东,黄天华;外源DNA转染精子的实验研究[J];癌变.畸变.突变;2004年03期
3 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
4 谢永芳,舒坤贤,梁亦龙,袁帅,张继承;小鼠胚胎发育中期肠细胞增殖与凋亡的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
5 陈传德,吴中亮,陈家堃;乙酸镍诱导的人支气管上皮细胞系转化细胞基因组不稳定性分析[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
6 王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
7 熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
8 康振桥;季艳霞;杨志勇;苏光;崔彦芝;;血管内皮生长因子亚型在人乳腺癌细胞中的表达差异[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
9 安刚;黄天华;谢庆东;王德刚;;pCXN2-mIZUMO对C57BL/6小鼠生育能力的影响[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
10 朱斌;杨罗艳;赵晓昆;;膀胱癌多药耐药基因MDR-1与金属硫蛋白-3表达的关系[J];癌变.畸变.突变;2007年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王春花;成军;郎振为;吴煜;杨艳杰;张黎颖;刘妍;;基因表达谱芯片技术筛选XTP3蛋白反式调节基因[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
2 唐南洪;王晓茜;李秀金;陈燕凌;;构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因(hGS)的肝细胞[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
3 黄家强;卜夏;李卓娅;龚非力;;人TNFα分泌型、跨膜型和跨膜稳定型重组体的构建表达及杀瘤效应[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
4 郭昱嵩;王中铎;刘楚吾;陈志明;刘筠;;勒氏笛鲷(Lutjanus russellii)线粒体DNA全序列的测定与分析[A];中国海洋学会2007年学术年会论文集(下册)[C];2007年
5 樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;子房注射法获得转基因甜瓜植株[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
6 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫表面抗原SAG2基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
7 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫致密颗粒蛋白GRA4基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
8 唐小江;马争;黄建勋;黄汉林;李来玉;牛侨;;正己烷引起红细胞膜血影蛋白交联的研究[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年
9 商庆龙;谷鸿喜;;HPV16 L1蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性研究[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年(1993—2003)论文集[C];2003年
10 陈振文;赵太云;孙贺娟;路静;王迎;孟霞;曹争和;王钜;;微卫星DNA与生化标记分析对长爪沙鼠群体遗传分析的比较[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 梁勇;白念珠菌高铁还原酶基因表达调控及Aft2p转录因子的功能研究[D];南开大学;2010年
2 于双妮;胰腺癌差异表达microRNAs的鉴定及功能研究[D];北京协和医学院;2008年
3 陈其华;前癃通胶囊治疗良性前列腺增生症临床观察及其对间质细胞作用的实验研究[D];湖南中医药大学;2011年
4 马丽菊;云南宣威肺癌细胞系侧群细胞特征分析[D];昆明医学院;2011年
5 许雷;大青杨纤维素合酶基因的克隆与遗传转化的研究[D];东北林业大学;2011年
6 朱伟;摄食抑制因子NUCB2/Nesfatin-1对机体胰岛素敏感性的影响[D];重庆医科大学;2011年
7 王金鹏;4α糖基转移酶环化活性定向控制及其大环糊精产物的分离及应用研究[D];江南大学;2011年
8 程光平;巴马繐唇鲃生物学及遗传学研究[D];中国海洋大学;2011年
9 宋娜;西北太平洋两种海洋鱼类的分子系统地理学研究及分子标记在褐牙鲆增殖放流中的应用[D];中国海洋大学;2011年
10 郭里;若干图论问题的DNA计算机算法研究[D];湖南大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 朱晓娟;重组免疫毒素抗c-Met/PE38KDEL的构建、表达、纯化及初步鉴定[D];南京医科大学;2009年
2 钱静;携带Apoptin双调控溶瘤腺病毒治疗肝癌的研究[D];浙江理工大学;2010年
3 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
4 陆玉成;AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析[D];郑州大学;2010年
5 吕文兵;杜氏盐藻异养转化藻株的鉴定及初步功能分析[D];郑州大学;2010年
6 李静;父源性HLA-A基因与子痫前期相关性研究[D];郑州大学;2010年
7 张燕松;肾移植术后患者PBMCs中NF-κB的活性和TNF-α mRNA的表达研究[D];郑州大学;2010年
8 张磊;杜氏盐藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗体的制备及其在MDCK细胞中的定位[D];郑州大学;2010年
9 冯玖玲;杜氏盐藻RbcS基因家族新成员的克隆及功能研究[D];郑州大学;2010年
10 陈操;日本七鳃鳗抗增殖蛋白Prohibitin1研究及类B淋巴细胞免疫调节初探[D];辽宁师范大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 涂长春,章金钢,熊光明,江南,金扩士,户荣良,李红卫,殷震;猪瘟病毒反义cDNA片段的化学合成及克隆[J];病毒学报;1992年04期
2 徐葛林,Li Ku,吴杰,C.A.De Mattos,郑新雄,薛经刚,胡巧玲,刘锦彦,朱家鸿,C.C.De Mattos,J S.Smith;中国19个狂犬病病毒街毒分离株N基因的序列分析[J];病毒学报;2002年01期
3 李伟;周海梦;;狂犬病病毒的分子生物学及其保护性抗原的结构和功能[J];传染病信息;1999年04期
4 师志海,李守军;狂犬病病毒的分子生物学研究进展[J];动物医学进展;2005年11期
5 张宁;秦建华;赵博伟;张富梅;胡晓悦;赵月兰;;牛病毒性腹泻-黏膜病诊断方法研究进展[J];动物医学进展;2008年02期
6 孙维庭;王志聪;孙家瑞;潘东云;李进涛;;猪瘟病毒单克隆抗体及其应用[J];动物医学进展;2009年01期
7 孔繁德,陆承平;牛病毒性腹泻-粘膜病的最新研究进展[J];福建畜牧兽医;2005年03期
8 辛志明;王寿昆;;狂犬病病毒与狂犬病在人间流行状况[J];福建畜牧兽医;2006年S1期
9 张立,范为民,严春,陆健,张元兴,宋瑶君,赵一鸣,陈文兰,俞俊棠;用国产生物反应器培养Vero细胞和狂犬病毒[J];高技术通讯;1999年03期
10 杨素,吴小伦,花群义,徐自忠,周晓黎,贾建军,薄清如,潘文波;口蹄疫病毒群特异性荧光PCR检测方法研究[J];中国畜牧兽医;2004年11期
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜海龙;钱爱东;;狂犬病病毒糖/核融合基因原核表达克隆质粒的构建与分析[J];吉林农业大学学报;2005年06期
2 傅秋玲;郑佳琳;林颖仪;张莹;阳佑天;潘姣姣;吴晓薇;郭霄峰;;检测犬源狂犬病毒中和抗体ELISA方法的建立[J];华南农业大学学报;2012年04期
3 赵娜;张守峰;胡永浩;包世俊;王颖;张菲;刘晔;扈荣良;;狂犬病病毒糖蛋白基因重组逆转录病毒的构建及其免疫效果[J];中国生物制品学杂志;2010年04期
4 袁慧君,扈荣良,包世俊,张守峰;犬IL-18 cDNA的克隆及其免疫学特性[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年05期
5 葛叶;张兴娟;朱庆虎;韩秋影;王牟平;李伟杰;孙建宏;仇华吉;;荧光定量RT-PCR方法与兔体定型热试验对于检测猪瘟兔化弱毒疫苗的平行关系[J];中国预防兽医学报;2011年09期
6 袁慧君,扈荣良,张守峰,包世俊,涂长春;狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗和IL-18在犬的免疫试验研究[J];中国人兽共患病杂志;2004年12期
7 肖跃强,张守峰,袁慧君,扈荣良;狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗中间试验生物安全评价[J];中国人兽共患病杂志;2005年04期
8 谭业平;祝艳蕾;郭霄峰;;腺病毒载体及其在狂犬病疫苗研究中的应用[J];中国人兽共患病学报;2008年10期
9 肖跃强;李海涛;刘澜;张守峰;扈荣良;;狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗田间免疫效果评定[J];中国兽医学报;2007年02期
10 程朝飞;宫苗苗;田康乐;王勇;赵占中;史利军;李刚;;基于狂犬病病毒重组蛋白的ELISA检测方法比较研究[J];畜牧兽医学报;2012年12期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 肖跃强;张守峰;扈荣良;沈志强;;狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗安全试验与田间免疫研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 姜海龙;狂犬病病毒糖/核融合基因DNA疫苗的研究[D];吉林农业大学;2006年
2 袁子国;表达狂犬病病毒糖蛋白的重组伪狂犬病病毒的构建及免疫试验研究[D];吉林大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 翟洪月;糖蛋白G基因在基因组P-M位的插入重组表达对狂犬病毒Flury LEP致病力的影响[D];中国农业科学院;2011年
2 肖跃强;狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗生物安全评价及田间免疫研究[D];吉林大学;2005年
3 胡志敏;猪带绦虫六钩蚴TSOL18基因重组犬腺病毒2型活载体疫苗的基础研究[D];新疆农业大学;2006年
4 李清竹;通过RNA干涉(RNAi)阻止免疫应答前狂犬病病毒感染的研究[D];沈阳农业大学;2006年
5 崔艳;犬2型腺病毒六邻体蛋白结构分析、改造及其基因转移载体的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
6 黄辉;北京市狂犬病控制模式研究[D];中国疾病预防控制中心;2008年
7 李红;猪瘟病毒感染巴马小型猪的实验研究[D];黑龙江八一农垦大学;2012年
8 宫苗苗;基于狂犬病病毒四种重组蛋白的间接ELISA方法的比较[D];中国农业科学院;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 赵卫国,朱家鸿,王继麟,蔡兵;狂犬病毒G蛋白和N蛋白在痘苗病毒天坛株中共同表达[J];中国病毒学;1995年01期
2 欧阳沁春,唐彩华,郑坚,朱家鸿;狂犬病毒5aG株核蛋白基因的克隆及序列分析[J];中华实验和临床病毒学杂志;1997年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙建伟;许汴利;;狂犬病病毒分子生物学研究进展[J];现代预防医学;2008年13期
2 袁慧君,扈荣良,张守峰,包世俊,涂长春;狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗和IL-18在犬的免疫试验研究[J];中国人兽共患病杂志;2004年12期
3 卢俭奋;新型狂犬病病毒多肽可用以制备疫苗[J];国际生物制品学杂志;1990年04期
4 李海涛;扈荣良;张守峰;肖跃强;袁慧君;涂长春;;狂犬病病毒核蛋白基因重组犬2型腺病毒的构建研究[J];免疫学杂志;2005年06期
5 韩改会;李回;孟先明;罗廷荣;;狂犬病病毒L蛋白的研究进展[J];广西畜牧兽医;2010年02期
6 邱沙洛;黄福林;;狂犬病病毒的电镜观察及该病的传播[J];自然杂志;1988年09期
7 魏晓锋;胡建华;高诚;;仙台病毒核蛋白的原核表达及鉴定[J];中国动物传染病学报;2010年04期
8 李萍;对狂犬病病毒核酸疫苗的免疫应答[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1996年02期
9 李思经;转基因番茄生产狂犬病病毒外壳蛋白[J];生物技术通报;1996年04期
10 扈荣良,涂长春,李银聚,侯世宽,李红卫,杜坚,冯丽春,崔青山,殷震;狂犬病病毒糖蛋白转基因小鼠对该病毒形成免疫耐受[J];中国兽医学报;1997年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 夏咸柱;;加强动物狂犬病防控研究 从源头上防控人类狂犬病[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
2 许运斌;朱妍;涂长春;;动物狂犬病实验室诊断技术概况[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
3 宋阳威;王水明;张敬友;吴亚力;李超美;柯家法;艾峰;;美洲陆生动物狂犬病防控管理进展研究[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
4 熊毅;刘棋;朱伟;韦友传;陆专灵;郭建刚;李华明;刘科;南松剑;罗廷荣;;广西狂犬病分子流行病学的研究[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
5 曹守春;李加;王玲;唐建蓉;刘景华;曲小肃;吴小红;石磊泰;董关木;俞永新;;狂犬病病毒核蛋白的体外表达及其免疫原性研究[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
6 李亚杰;郁宏伟;韩佳丽;梁武;杨保收;;浅谈狂犬病的诊断技术[A];“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C];2011年
7 马健;席进;李莹莹;苏南;龚文杰;张茂林;涂长春;;狂犬病病毒攻毒犬唾液排毒及病毒在体内的分布研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
8 邵西群;闫喜军;;貉源狂犬病病毒NeiMeng株的分离与鉴定[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
9 赵怀龙;金宁一;;狂犬病病毒分子生物学研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
10 丁继超;张海林;李琼芬;申辛欣;李浩;唐青;;云南省1976~2009年狂犬病流行病学特征分析[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 任倩茹;我州采取措施确保2011年狂犬病例“零报告”[N];凉山日报(汉);2011年
2 本报记者 鞠贵芹 本报实习生 俞丹丹;如何防狂犬病疫情反弹[N];台州日报;2011年
3 记者 李宓;“昏迷疗法”治狂犬病再获成功[N];新华每日电讯;2011年
4 YMG记者 于明君 通讯员 刘正毅 王曰雷;夏季“被狗咬”市民增多[N];烟台日报;2010年
5 郝仁;大家都来重视狂犬病[N];中国畜牧兽医报;2006年
6 郑灵巧;近十年狂犬病发病大幅上升[N];健康报;2007年
7 中国疾控中心传染病所 张永振;我国狂犬病病毒及其传播流行规律[N];健康报;2009年
8 谢苗枫 龙瀚 陈枫 粤卫信;专家会诊:狂犬病害死六龄童[N];南方日报;2011年
9 丁厚勤;全力做好狂犬病防控工作[N];菏泽日报;2006年
10 谷峰;油菜花儿开谨防狂犬病[N];中国中医药报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘富强;湖南省1988~2007年狂犬病流行病学研究[D];中南大学;2009年
2 孟胜利;中国流行的狂犬病病毒时空进化分析[D];武汉生物制品研究所;2010年
3 黄海楠;狂犬病病毒保护性抗原基因重组伪狂犬病毒/杆状病毒活疫苗的实验研究[D];吉林大学;2011年
4 王晓虎;狂犬病病毒感染比较蛋白质组学研究[D];吉林大学;2010年
5 潘铁骊;狂犬病病毒BD06株生物学特性鉴定及反向遗传系统的建立[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
6 姜海龙;狂犬病病毒糖/核融合基因DNA疫苗的研究[D];吉林农业大学;2006年
7 陶丽红;狂犬病Flury病毒致弱分子机制及新型疫苗的研究[D];中国农业科学院;2010年
8 陈立志;牛源致病性坏死梭杆菌分离鉴定及其白细胞毒素免疫特性研究[D];吉林大学;2008年
9 赵宇军;猪戊型肝炎病毒结构蛋白基因表达及其基因特异性噬菌体展示肽库构建[D];中国农业科学院;2005年
10 韩俊友;牛蛙皮肤抗菌肽分离纯化、基因克隆表达及生物学特性的研究[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 马一君;A型流感病毒核蛋白基因的克隆与表达[D];郑州大学;2005年
2 王雷;狂犬病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立[D];吉林大学;2007年
3 焦文强;狂犬病病毒CVS株N基因的原核表达、纯化及鉴定[D];甘肃农业大学;2010年
4 于金宁;中国狂犬病毒时空动力学及其与狂犬病疫情的关系[D];山东大学;2010年
5 吴慧;中国狂犬病流行现状及病毒P、M基因遗传进化研究[D];山东大学;2010年
6 李浩;中国狂犬病2007年流行特征及病毒N基因分子流行病学研究[D];中国疾病预防控制中心;2010年
7 丁继超;云南省狂犬病流行特征及病毒分子流行病学研究[D];大理学院;2010年
8 尹翠萍;2007-2011年中国狂犬病流行状况及病毒N基因特征分析[D];山东大学;2012年
9 杨健;2010年-2011年广西地区动物狂犬病分子流行病学调查[D];广西大学;2012年
10 张娟;中国狂犬病动力学建模及防控措施研究[D];中北大学;2012年
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