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《中国畜牧杂志》 2007年17期
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利用免疫印迹技术检测睾丸中几种20~50ku蛋白的表达

王鲜忠  吴建云  孙燕  罗英  张家骅  
【摘要】:为了建立睾丸中20~50 ku蛋白的免疫印迹检测技术,我们从蛋白提取、电泳条件、转膜条件、免疫反应条件等多方面进行了摸索。结果表明:RIPA和蛋白酶抑制剂不仅能保证蛋白提取的效率,而且可以有效防止蛋白降解;电泳时采用10%的分离胶,可以达到较好的分离效果;采用蛋白预染分子标准结合DAB染色可以获得较好的结果。利用上述程序检测了StAR蛋白、P-ERK和ERK的表达,得到了比较满意的效果。
【作者单位】西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室 西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室 西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室 西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室 西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室
【关键词】免疫印迹 睾丸 蛋白质 小鼠
【基金】:国家自然科学基金项目(30270955) 西农博士启动基金(2004博01)
【分类号】:Q593
【正文快照】:
随着分子生物学技术的发展,大量新基因被克隆,如何进行基因功能的研究却是生物学领域急需解决的一大难道。原位杂交、免疫组化使人们能将mRNA和蛋白的表达精确定位到细胞水平,然而对于基因表达量与功能之间的相互关系这2种方法都很难做出准确的判断,定量PCR技术可以解决mRNA

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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