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《中国兽医科学》 2008年02期
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猪带绦虫六钩蚴45W-4BX抗原的制备及其杂交瘤细胞株的建立

孙晓林  骆学农  景志忠  王佩雅  才学鹏  
【摘要】:为获得针对猪带绦虫六钩蚴(TSO)45W-4BX抗原的杂交瘤细胞株,用IPTG对TSO45W-4BX的重组质粒pGEX-4BX进行了诱导表达,并采用Sepharose-4B层析技术对表达产物进行纯化,运用SDS-PAGE和Western-blot分别对其纯度和活性进行了检测。分别用弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂乳化已纯化的猪带绦虫TSO45W-4BX重组抗原,随后用其分别免疫BALB/c小鼠3次,检测血清抗体效价呈阳性。之后,再进行加强免疫,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0细胞进行融合,经TSO45W-4BX抗原和GST抗原双系统间接ELISA筛选,最终获得了18株抗TSO45W-4BX抗原的杂交瘤细胞株。采用有限稀释法对其中的4株进行5次亚克隆,最终获取了4株稳定分泌针对TSO45W-4BX抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,金标试纸条法鉴定其抗体亚类均属于IgG1类,轻链为κ型。

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 喻翠翠;猪结合珠蛋白单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 冯树梅;抗猪囊尾蚴单克隆抗体的制备及鉴定[D];新疆农业大学;2001年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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5 杨宝珍,王利新,潘月英;抗猪囊虫单克隆抗体的制备及应用[J];免疫学杂志;2004年S1期
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8 吴国华;郑亚东;贾万忠;张少华;景志忠;骆学农;刘石泉;才学鹏;;基于重组猪囊虫18ku抗原的间接ELISA方法的建立[J];畜牧兽医学报;2009年12期
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10 孙涛,杨宝珍,潘月英,王利新;抗猪囊虫单克隆抗体对脑囊虫病的诊断价值[J];宁夏医学院学报;2003年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王利晓;莫尼茨属绦虫节片间部分差异基因表达的研究[D];石河子大学;2010年
2 冯树梅;抗猪囊尾蚴单克隆抗体的制备及鉴定[D];新疆农业大学;2001年
3 朱学泰;抗BCG HSP65单克隆抗体的制备[D];西北师范大学;2005年
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8 张艳;猪带绦虫dUTP焦磷酸酶的体外表达及其组织分布[D];甘肃农业大学;2007年
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10 陈晓宇;表达TsoL18抗原的口服减毒鼠伤寒沙门氏菌重组活载体疫苗的构建[D];甘肃农业大学;2008年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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2 陈光;单克隆抗体技术历史与发展简述[J];生物学通报;2003年09期
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李建丽;禽流感病毒非结构蛋白与宿主相关蛋白相互作用及感染鸡组织病理学研究[D];华中农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 张姝慧;禽流感病毒H5、H9亚型单抗及ELISA鉴别诊断方法的研究和应用[D];华中农业大学;2005年
2 项开合;牛乳铁蛋白单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA检测方法的建立[D];吉林大学;2007年
3 王政;抗GST标签蛋白单克隆抗体的制备及其活性鉴定[D];华中农业大学;2008年
4 梅仕林;猪流产嗜性衣原体病间接ELISA抗体检测方法的建立[D];华中农业大学;2009年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 吴兵;斑点叉尾鮰病毒单克隆抗体及血清免疫球蛋白多克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙晓林;骆学农;景志忠;王佩雅;才学鹏;;猪带绦虫六钩蚴45W-4BX抗原的制备及其杂交瘤细胞株的建立[J];中国兽医科学;2008年02期
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5 孙晓林;才学鹏;景志忠;米晓云;王佩雅;陈怀涛;;猪带绦虫六钩蚴超微结构的观察[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2009年01期
6 王哲;王丹;李巍;蔡亚楠;杨桂连;赵权;;体外人工肠液激活与未激活的猪带绦虫六钩蚴差异蛋白质组学比较[J];中国预防兽医学报;2011年06期
7 唐雨德,顾志香,刘玉,陶开华,于明明,郁兴明;以包涵体形式表达的猪带绦虫六钩蚴重组抗原的复性与纯化[J];中国兽医科技;1999年08期
8 孙晓林;景志忠;王佩雅;才学鹏;;猪带绦虫六钩蚴45W-4BX抗原单克隆抗体的制备及鉴定[J];甘肃农业大学学报;2008年01期
9 才学鹏,郑亚东,贾万忠,骆学农,景志忠,陆承平;猪带绦虫六钩蚴45W基因家族分子克隆[J];中国农业科学;2005年10期
10 王福梅;骆学农;景志忠;岳城;才学鹏;;猪带绦虫六钩蚴45W-4B重组蛋白的免疫原性研究[J];中国兽医寄生虫病;2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 景志忠;郭爱疆;海岗;窦永喜;骆学农;郑亚东;才学鹏;;猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建及免疫原基因的筛选与克隆[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
2 景志忠;才学鹏;;猪囊尾蚴病免疫原分子生物学研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
3 才学鹏;骆学农;张少华;侯俊玲;郭爱疆;刘振勇;;猪带绦虫/囊尾蚴病研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
4 牟静;杨光友;;多头带绦虫45W基因的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
5 由弘;张文宝;张壮志;古努尔;哈斯也提;吐尔洪;王进成;;细粒棘球蚴中间宿主的模型动物首次感染六钩蚴对再次感染产生的保护性试验[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
6 才学鹏;景志忠;窦永喜;蒙学莲;吴国华;骆学农;郑亚东;;猪带绦虫六钩蚴TsO1基因的克隆、表达与结构预测[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
7 才学鹏;;猪带绦虫基因工程疫苗的研究进展[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
8 马云祥;苏云普;颜秋叶;贺丽君;闫旭霞;陈建设;冯石献;刘辉;;猪带绦虫孕节片内虫卵数量与成熟率的研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
9 骆学农;侯俊玲;张少华;刘振勇;巩伟;周邦信;才学鹏;;猪带绦虫TSOL18基因工程疫苗的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
10 景志忠;王佩雅;窦永喜;才学鹏;;人-猪囊尾蚴、猪带绦虫动物模型替代性研究进展[A];中国实验动物学会第五届学术年会论文汇编[C];2000年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;给绦虫病羔羊确诊和驱虫的方法[N];中国畜牧兽医报;2007年
2 王金宝;给绦虫病羔羊确诊和驱虫的方法[N];中国畜牧兽医报;2006年
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8 新疆畜牧科学院兽医研究所 王光雷;犬绦虫病的防治[N];新疆科技报(汉);2003年
9 刘明;包虫病[N];农村医药报(汉);2009年
10 记者 生焰明 李玉成;囊虫病包虫病诊断有新法[N];健康报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 景志忠;猪带绦虫六钩蚴cDNA表达文库的构建及免疫原基因的筛选、克隆与表达[D];中国农业科学院;2003年
2 骆学农;猪带绦虫六钩蚴45W-4B和TSO18重组基因工程疫苗的研究[D];中国农业科学院;2005年
3 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 刘永杰;猪囊尾蚴的发育生物学药物作用机理[D];东北农业大学;2000年
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6 郭瀛军;猪带绦虫囊虫病DNA疫苗的中试及免疫效力研究[D];第二军医大学;2004年
7 袁改玲;猪带绦虫六钩蚴TSOL18重组基因工程疫苗的研制[D];中国农业科学院;2005年
8 刘振勇;猪囊尾蚴dUTPase的表达、活性分析及结构预测[D];中国农业科学院;2007年
9 贾万忠;带科主要绦虫45W和14ku/18ku基因变异的研究[D];中国农业科学院;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 方强;猪带绦虫虫卵收集、孵化方法及一氧化氮对猪带绦虫六钩蚴细胞毒作用的实验研究[D];安徽医科大学;2003年
2 王谨;猪带绦虫45W基因的克隆及在毕赤酵母系统中的表达[D];新疆农业大学;2003年
3 郑亚东;猪带绦虫45W基因家族的克隆及A_3与B_2的表达和结构预测[D];甘肃农业大学;2003年
4 余招锋;猪带绦虫45W-4B基因在大肠杆菌和家蚕中的表达及45W蛋白结构和功能的初步研究[D];西北农林科技大学;2004年
5 李永光;多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆、表达及抗原性研究[D];甘肃农业大学;2009年
6 鲁琨;猪囊尾蚴10kD基因的克隆、表达及重组蛋白ELISA方法的建立[D];河南农业大学;2008年
7 刘斌;猪囊尾蚴TSOL18核酸疫苗表达载体构建、免疫原性及安全性研究[D];甘肃农业大学;2008年
8 吴琳;以HBc颗粒为呈现载体的猪囊虫疫苗的构建及其免疫学研究[D];南京师范大学;2005年
9 李海龙;猪囊尾蚴T24基因的克隆、表达与免疫原性分析[D];石河子大学;2006年
10 郑君;重组免疫毒素ScFv-PE40在大肠杆菌中的表达、纯化及活性测定[D];吉林农业大学;2008年
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