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《中国兽医科技》 2005年06期
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用抗体致敏SPA菌体浓缩新城疫病毒方法的建立

包世俊  
【摘要】:将金黄色葡萄球菌与灭活的猪抗新城疫病毒(NDV)抗血清混合,37℃感作致敏30min,将致敏的金黄色葡萄球菌加入NDV污染材料洗脱液中,37℃水浴30min,离心洗涤并悬浮菌体于PBS中,取适量用于电镜观察或RTPCR。结果显示,电镜下观察可见NDV吸附到金黄色葡萄球菌表面;经RTPCR对吸附NDV的菌体进行扩增后可见到特异性扩增带。通过条件优化,建立了NDV浓缩方法。用HA效价为29的NDVF48E9毒株尿囊液1∶800、1∶1600和1∶3200稀释液分别喷洒树叶及谷物,采用上述方法浓缩病毒,并经RTPCR检测。结果表明,致敏的金黄色葡萄球菌能够浓缩病毒,提高RTPCR检测的敏感性。
【作者单位】甘肃农业大学动物医学院
【分类号】:S852.65

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 王洪亮;直接免疫荧光检测GPMV-Ⅰ方法的建立及其应用于GPMV-Ⅰ感染雏鹅后病毒在各器官分布规律的研究[D];湖南农业大学;2007年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 张守峰,扈荣良,赵君;1个改进的DNA分子量标准物——pT13/HindMarke[J];中国兽医学报;2000年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 李海涛;扈荣良;张守峰;肖跃强;袁慧君;涂长春;;狂犬病病毒核蛋白基因重组犬2型腺病毒的构建研究[J];免疫学杂志;2005年06期
2 姚伟,任文陟,张守峰,范志强,扈荣良,涂长春;蚓激酶重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LK~R的构建及其在山羊乳腺组织中的表达[J];中国生化药物杂志;2005年03期
3 张守峰,扈荣良,范志强,姚汝强,梁慧颖,涂长春;蚓激酶基因的人工合成及山羊乳腺表达[J];中国生物工程杂志;2004年09期
4 肖跃强,张守峰,袁慧君,扈荣良;狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗中间试验生物安全评价[J];中国人兽共患病杂志;2005年04期
5 赵君,任文陟,张守峰,刘彬,宇丽,扈荣良,殷震;人Bcl-2乳腺定位表达转基因小鼠的建立[J];中国兽医学报;2002年05期
6 张守峰,扈荣良,牛建强,夏咸柱;感染性犬2型腺病毒全基因组克隆及鉴定[J];中国兽医学报;2002年06期
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 李敏;组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体的构建及其表达研究[D];中国人民解放军军需大学;2002年
2 赵君;Bcl-2及c-myc乳腺定位表达系统和转基因小鼠建立研究[D];中国人民解放军军需大学;2002年
3 刘玉锋;不同毒力的IBDV毒株致病特性和免疫特性的比较研究[D];中国农业大学;2004年
4 周雪艳;瑞替普酶(rPA)及其突变体的构建和在大肠杆菌与CHO细胞中的表达研究[D];吉林大学;2006年
5 王桂兰;IL-4RA基因转染阻止了哮喘模型的炎症发展[D];吉林大学;2006年
6 卜秀娟;蚓激酶表达产物活性在动物体内的检测[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张守峰;病毒启动子调控下t-PA的稳定表达及半定量检测技术研究[D];中国人民解放军军需大学;2001年
2 罗俊;IBDV快速诊断试纸在该病病原和抗体快速检测中的应用及鼠抗兔-IgG单克隆抗体的研究[D];河南农业大学;2003年
3 达来宝力格;鸡传染性法氏囊病毒检测方法的建立[D];河北农业大学;2004年
4 肖跃强;狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗生物安全评价及田间免疫研究[D];吉林大学;2005年
5 张燚;多味中药对IBDV的抑制作用及其组方对IBD防治效果研究[D];吉林农业大学;2005年
6 于志凤;狂犬病病毒糖蛋白哺乳动物细胞稳定表达细胞系建立及特性研究[D];吉林大学;2006年
7 李雪;蚓激酶基因在奶牛乳腺中表达的研究[D];吉林农业大学;2006年
8 李清竹;通过RNA干涉(RNAi)阻止免疫应答前狂犬病病毒感染的研究[D];沈阳农业大学;2006年
9 周兴;蚓激酶重组逆转录病毒载体的构建[D];石河子大学;2007年
10 张智勇;青霉素G多克隆抗体的制备及其快速检测方法的初步研究[D];内蒙古农业大学;2007年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李玉峰,王永坤,严魏巍,周继宏,田慧芳,朱国强,刘华雷,郁斌;禽副粘病毒I型结构蛋白分析[J];山东家禽;2000年05期
2 胡丙杰,陈玉川,祝家镇,李杰;免疫组化技术中抗原修复方法及研究进展[J];中国法医学杂志;1998年04期
3 张莎,李立,姜卫星,朱开明,段文武,张锐,向秀成;琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)在检测珍稀雉类新城疫病毒上的应用[J];湖南林业科技;2004年01期
4 戴荣四;刘毅;胡仕凤;李芬;王贵平;;鸡新城疫免疫胶体金诊断技术的研究[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2006年02期
5 李军;吴时友;尹燕博;牛钟相;;鸡新城疫病毒荧光双链引物实时荧光PCR检测方法的研究[J];家畜生态学报;2006年04期
6 王永坤,田慧芳,周继宏,严维巍,许益民,钱忠明,朱国强,周明荣,庄国宏,陆杏梅,叶斌,卞汝霖;鹅副粘病毒病的研究[J];江苏农业研究;1998年01期
7 万洪全,吴力力,王宝安,朱坤熹;雏鹅实验性副粘病毒病的临诊症状及病理变化研究[J];畜牧兽医学报;2002年01期
8 肖成蕊,梁基,郭翠莲,林廷飞;免疫荧光技术诊断鸡病毒性关节炎的研究[J];中国兽医科技;1990年09期
9 刘华雷,王永坤,周继宏,田慧芳,朱国强,钱忠明,严维巍,李玉峰;鹅副粘病毒毒力特性的研究[J];中国预防兽医学报;2000年03期
10 刘华雷,王永坤,朱国强,严维巍;鹅副粘病毒YG_(97)分离株HN蛋白基因的克隆与序列分析[J];中国预防兽医学报;2002年05期
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