收藏本站
《中国食品学报》 2018年01期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

亲和层析法纯化重组大肠杆菌表达的亚油酸异构酶

洛雪  李越  张爽  岳喜庆  张兰威  
【摘要】:亚油酸异构酶能够催化亚油酸(LA)生成不同类型共轭亚油酸(CLA),共轭亚油酸是一类由不同位置和几何异构体组成的有两个共轭双键的十八碳二烯酸,具有多种生理活性,且广泛存在于多种食物中。目前报道的丙酸杆菌虽能够生产t10,c12-CLA,但含量较低。为提高CLA的产量,以痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶基因为研究对象,利用PCR扩增亚油酸异构酶基因到大肠杆菌中表达,采用亲和层析的方法分离纯化重组大肠杆菌发酵液中的亚油酸异构酶。优化的亲和层析条件:上样量10 m L,流速0.25 m L/min。酶被纯化了13.22倍,比活力达12.30 U/(mg蛋白),回收率为94.84%。经SDS-PAGE检测,该蛋白分子质量为55 ku。采用气相色谱检测该蛋白催化LA生成t10,c12-CLA,酶活为(34.775±0.07)U/m L,该酶为亚油酸异构酶。

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李华钟,李寅,林金萍,陈坚;具有高谷胱甘肽合成活性重组大肠杆菌的构建及合成反应过程[J];微生物学报;2001年01期
2 郑志永;姚善泾;;用遗传算法进行重组大肠杆菌发酵动力学的分析[J];生物数学学报;2006年03期
3 张大伟;王鹏;祁庆生;;利用重组大肠杆菌进行寡糖合成的研究进展[J];生物工程学报;2007年01期
4 廖鲜艳;朱至;陈坚;堵国成;;用于谷胱甘肽合成的重组大肠杆菌的培养和诱导表达[J];过程工程学报;2007年01期
5 于丽;马江锋;岳方方;刘树文;姜岷;;产琥珀酸重组大肠杆菌的发酵性能研究[J];中国生物工程杂志;2010年09期
6 孟建华;日本用重组大肠杆菌酶法合成色氨酸[J];生物工程进展;1987年06期
7 李思经;;血红蛋白加速了重组大肠杆菌的好气生长[J];生物技术通报;1988年09期
8 丛春水,苏志国,邓继先;重组大肠杆菌的分批补料培养方法[J];微生物学杂志;1998年04期
9 田杰生,宋海琛,吴柏和,王珍芳,李季伦;高产稳产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌的构建[J];微生物学报;2000年01期
10 王凡强,王正祥,邵蔚蓝,刘吉泉,徐成勇,诸葛健;重组大肠杆菌热稳定性过氧化氢酶的纯化及性质研究[J];微生物学报;2002年03期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 廖美德;梁世中;林剑;;重组大肠杆菌高效表达人碱性成纤维细胞生长因子的条件的优化[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
2 马瑞强;陈明;陆伟;张维;徐玉泉;林敏;;产乙醇重组大肠杆菌的构建及其特性研究[A];中国微生物学会微生物资源专业委员会成立大会暨第一届学术研讨会论文摘要集[C];2009年
3 韩冬梅;仲飞;李秀锦;王淼;李文艳;王璐;;重组大肠杆菌不耐热肠毒素的表达及对小鼠胚胎稳定性的影响[A];全国动物生理生化第十二次学术交流会论文摘要汇编[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 王俊明;利用重组大肠杆菌和核糖开关进行L-赖氨酸生产的研究[D];山东大学;2015年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 周鹏;构建含镍铁氢酶基因的重组大肠杆菌及产氢研究[D];成都理工大学;2015年
2 武传菊;利用重组大肠杆菌合成壳寡糖[D];山东轻工业学院;2012年
3 丁兰宝;重组大肠杆菌高密度发酵研究[D];江南大学;2008年
4 孟晨璐;不对称还原产l-麻黄碱重组大肠杆菌的构建[D];江南大学;2008年
5 刘合栋;高产反式-4-羟脯氨酸重组大肠杆菌的构建和发酵优化[D];江南大学;2013年
6 刘松娇;嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶活性结构及其功能研究[D];南昌大学;2017年
7 周冰;利用代谢工程改良重组大肠杆菌[D];沈阳药科大学;2004年
8 洪浩舟;缺失丙酮酸甲酸裂解酶和乳酸脱氢酶的产乙醇重组大肠杆菌构建及特性分析[D];中国农业科学院;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026