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《中国食品学报》 2014年09期
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1种快速高效提取乳酸菌质粒的方法

张波  李晨  董慧  寇田田  许文涛  田洪涛  罗云波  
【摘要】:根据碱裂解提取大肠杆菌质粒的原理与程序,借鉴Anderson和O’Sullivan的乳酸菌质粒提取方法,使酶解破壁和碱破膜变性相结合,通过优化乳酸菌质粒提取中酶浓度、酶解时间、质粒沉淀条件,提出1种高效提取乳酸菌质粒的方法。在此基础上,分析并检验该方法提取乳酸菌质粒的适用性、效率和质粒质量。结果表明:采用该方法可提取乳球菌及乳杆菌中的质粒,所提取的乳酸菌质粒不受质粒大小及拷贝数高低的影响,乳酸菌质粒的检出率和提取的成功率显著提高;提取的乳酸菌质粒达到DNA纯化后的水平,可用于酶切等分子生物学操作。操作实践表明:该方法适合乳酸菌质粒的小量提取(1.5~2 mL菌液)到中量提取(10 mL菌液);其操作周期与大肠杆菌质粒提取检测彼此相当,而比Anderson和O’Sullivan提取检测乳酸菌质粒缩短3~4 h。本文还就乳酸菌质粒提取中的主要原理及注意事项进行探讨,以期为进一步开发乳酸菌质粒分离纯化试剂盒提供理论依据。

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 朱剑威;产抗菌肽乳酸菌筛选及抗菌肽PlnF基因的克隆与表达[D];吉林农业大学;2018年
2 北婷婷;红色荧光蛋白标记的鼠李糖乳样菌在小鼠肠道内运动及定植情况研究[D];河北农业大学;2015年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 张玉兰;柯晓静;郭红敏;谷新晰;田洪涛;郭兴华;罗云波;;利用组成型表达载体pMG36e电转化乳酸乳球菌ML23的研究[J];河北农业大学学报;2010年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 应碧;昌晓宇;刘志文;周通;陈瑶;钟平安;徐波;;亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌WU14亚硝酸盐还原酶的食品级高效诱导表达及其酶学性质研究[J];中国农业科学;2015年07期
2 张波;李晨;董慧;寇田田;许文涛;田洪涛;罗云波;;1种快速高效提取乳酸菌质粒的方法[J];中国食品学报;2014年09期
3 张彩荣;吴玲玲;侯向前;马正海;;表达HIV-1gag蛋白重组乳酸乳球菌株的建立及其在小鼠体内定植的研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2013年09期
4 任大勇;李昌;秦艳青;杜寿文;郭欢欢;刘宏锋;洛阳;金宁一;;乳酸乳球菌高效电转化方法的建立[J];中国兽药杂志;2012年01期
5 魏尧;李振;许庆方;;简析影响乳杆菌电转化效率的因素[J];山西农业科学;2011年09期
【同被引文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 杨子萱;质粒pMG36e电转化保加利亚乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和干酪乳杆菌的研究[D];河北农业大学;2014年
2 张超;Ⅱa型抗菌肽PCR筛选方法的优化[D];哈尔滨工业大学;2013年
3 丁硕;九种健脾胃中草药对三种典型益生菌体外生长及溃疡性结肠炎大鼠的影响[D];河北农业大学;2013年
4 方芳;产细菌素乳酸菌的筛选、细菌素的纯化及其特性研究[D];内蒙古农业大学;2008年
5 刘倩;鲤鱼肠道中乳酸菌粘附相关蛋白质的鉴定研究[D];山东师范大学;2007年
6 赵弋清;亮菌多糖对肿瘤免疫效应机制的研究[D];四川大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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2 孙磊,孔文涛,孔健;乳酸乳球菌电转化条件的研究[J];山东大学学报(理学版);2005年03期
3 张莉滟,陈林,张德纯;保加利亚乳杆菌原生质体的制备与回复研究[J];中国微生态学杂志;2004年02期
4 贾士芳,王荫榆,郭兴华,还连栋;乳杆菌电转化条件的研究[J];生物工程学报;1998年04期
【相似文献】
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1 张波;李晨;董慧;寇田田;许文涛;田洪涛;罗云波;;1种快速高效提取乳酸菌质粒的方法[J];中国食品学报;2014年09期
2 陈小英;;质粒的基本特征和分类[J];国外药学(抗生素分册);1980年02期
3 郭丽芳;王明义;;微生物质粒研究进展[J];医学检验与临床;2007年01期
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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5 张冉;曾阿娜;覃重军;;一些链霉菌天然环型质粒加上端粒之后可以复制成线型[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
6 白艳玲;杨之龙;杨亮;董色;徐海津;张秀明;乔明强;;黄瓜线粒体类质粒的分子鉴定[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编(2004-2008)[C];2008年
7 李玉恒;李静;孟宇;孙智峰;李俭;林增;刘从;李鹏;沈冰蕾;李士泽;;CIRPmiRNA干扰质粒的构建及鉴定[A];全国动物生理生化第十二次学术交流会论文摘要汇编[C];2012年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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2 王文丽;一个新铜绿假单胞菌质粒的分离鉴定及其温度敏感型衍生体的构建[D];西北大学;2008年
3 李康佳;水稻条斑病菌内源质粒分析与穿梭质粒载体的构建[D];广西大学;2017年
4 顾群;多元质粒工程的研究与应用[D];天津大学;2013年
5 郑文超;重组大肠杆菌生产类人胶原蛋白高密度发酵调控与质粒稳定性[D];西北大学;2007年
6 罗声栋;贝氏柯克斯体质粒生物学作用与功能研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2017年
7 康小燕;hok/sok介导的质粒稳定性研究[D];扬州大学;2009年
8 刘一尘;地衣芽孢杆菌B.licheniformis29质粒pBL29性质的研究[D];四川农业大学;2002年
9 孙博;质粒D-GPEi纯化工艺及质量检测研究[D];吉林大学;2006年
10 孙夏;粘球菌内源质粒pMF1遗传稳定性控制区域的定位[D];山东大学;2009年
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