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《中国家禽》 2014年09期
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鸡破骨细胞分离和培养方法的改进

宋瑞龙  仝锡帅  程来洋  高倩  张家铭  王东  顾建红  朱家桥  袁燕  刘学忠  刘宗平  
【摘要】:为获得大量有活力的鸡破骨细胞(Osteoclast,OC),本试验选取18日龄鸡胚,从长骨中提取骨髓细胞,用胰酶消化,40%和70%的percoll梯度离心分离骨髓间质细胞。在此基础上,用60 ng/mL核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、50 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导培养。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨吸收陷窝以及标志性蛋白TRAP、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织蛋白酶K检测鉴定破骨细胞。结果显示,诱导后的TRAP阳性细胞剧增,TRAP、MMP-9和组织蛋白酶K蛋白表达极显著上调,可在牛骨上形成大量的骨吸收陷窝。研究表明,该方法是一种快速、实用、高效的鸡破骨细胞分离培养技术。

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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 王东;顾建红;刘宗平;;组织蛋白酶K在骨吸收中的作用研究进展[J];动物医学进展;2014年06期
2 郭伟;王麓山;;骨保护素在骨相关疾病领域的研究进展[J];中国矫形外科杂志;2013年24期
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2 朱筱;1、Runx2甲基化状态变化对血管平滑肌细胞成骨样分化影响的研究 2、Vaspin对人成骨细胞凋亡的作用机制研究[D];中南大学;2012年
3 付应霄;OPG对破骨细胞活性的影响及其信号转导机制[D];扬州大学;2013年
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中国硕士学位论文全文数据库 前4条
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2 俞永裕,陈贵才,陈剑慧;多杀性巴氏杆菌毒素对大鼠破骨细胞的作用[J];浙江畜牧兽医;1994年01期
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4 顾建红;刘俊栋;刘海霞;谢献胜;郑中朝;张力;刘宗平;;番鸭破骨细胞的培养及鉴定[J];中国兽医学报;2008年01期
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8 薛永峰;章世元;周光玉;张杰;全丽萍;尹玉港;;1,25(OH)_2D_3对体外诱导培养鸡胚破骨细胞的影响[J];畜牧与兽医;2010年07期
9 刘俊栋;顾建红;刘海霞;赵瑞英;王键;刘宗平;;骨保护素和核因子κB受体活化因子配基对体外培养鸭破骨细胞的影响[J];中国兽医学报;2009年01期
10 顾建红;刘俊栋;卓丽玲;王林;赵瑞英;刘宗平;;钙磷对RANKL诱导番鸭破骨细胞生成及活性的影响[J];江苏农业科学;2007年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 吴培福;钟代彬;韩博;黄有德;;氟对动物破骨细胞的影响[A];2003全国家畜内科学学术研讨会论文专辑[C];2003年
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8 李建军;马春全;邓桦;卢玉葵;王境;;1例犬疑似大量骨质溶解症的病理组织学观察[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];2009年
9 李建军;马春全;邓桦;卢玉葵;王境;;1例犬疑似大量骨质溶解症的病理组织学观察[A];中国畜牧兽医学会小动物医学分会第四次学术研讨会、中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十六次学术研讨会论文集(1)[C];2009年
10 潘庆山;薛琴;袁占奎;;犬猫股骨干骨折及股骨远端骨折的内固定技术[A];中国畜牧兽医学会小动物医学分会第四次学术研讨会、中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十六次学术研讨会论文集(1)[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前8条
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3 翟必华;钙、磷和OPG对破骨细胞形成和活化影响的研究[D];扬州大学;2005年
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8 李治学;鸡钙代谢调节物质基因真核表达质粒应用效果的研究[D];扬州大学;2007年
9 朱晓英;低磷及依普拉芬对笼养蛋鸡骨代谢、内分泌及生产的影响[D];南京农业大学;2000年
10 刘然;锰缺乏对肉仔鸡胫骨形态学及OPG/RANKL信号传导通路的影响[D];山东农业大学;2012年
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